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    • 4. 发明申请
    • METHODS FOR AMPLIFICATION OF NUCLEIC ACIDS ON SOLID SUPPORT
    • 在固体支持物上放大核酸的方法
    • WO2014153260A1
    • 2014-09-25
    • PCT/US2014/029817
    • 2014-03-14
    • ARNOLD, Lyle, J.NELSON, Norman, C.
    • ARNOLD, Lyle, J.NELSON, Norman, C.
    • C12Q1/68C12P19/34C12N9/10
    • C12P19/34C12Q1/6853C12Q1/6865C12Q2525/186C12Q2533/101C12Q2565/515C12Q2565/537C12Q2531/143
    • The present invention provides methods for amplifying a nucleic acid from a mixture of nucleic acids utilizing a solid support. Methods are provided utilizing user-defined primer oligonucleotides for directional amplification. Methods are also provided utilizing blocker and displacer oligonucleotides for generating amplified target nucleic acids of defined length. A sample is applied to the solid support and the target nucleic acid within the sample binds a first oligonucleotide affixed to a solid support. A primer sequence containing a target binding region and a polymerase promoter sequence is annealed to the bound target nucleic acid and extended producing a first duplex nucleic acid. The target sequence is removed leaving a first nucleic acid that binds a second oligonucleotide affixed to a solid support. The second oligonucleotide is extended to produce a second duplex nucleic acid that contains a second nucleic acid. The second nucleic acid is amplified by adding a polymerase.
    • 本发明提供了利用固体支持物从核酸混合物中扩增核酸的方法。 使用用于定向扩增的用户定义的引物寡核苷酸提供方法。 还提供了利用用于产生具有一定长度的扩增靶核酸的阻断剂和置换寡核苷酸的方法。 将样品施加到固体支持物上,并且样品内的靶核酸结合固定在固体支持物上的第一寡核苷酸。 包含靶结合区和聚合酶启动子序列的引物序列与结合的靶核酸退火并延长产生第一双链体核酸。 去除靶序列,留下结合固定支持物上的第二寡核苷酸的第一核酸。 扩展第二寡核苷酸以产生含有第二核酸的第二双链体核酸。 通过加入聚合酶扩增第二个核酸。