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    • 61. 发明申请
    • NUKLEINSÄUREAUFREINIGUNGSVERFAHREN
    • NUCLEIC纯化方法
    • WO2010072821A1
    • 2010-07-01
    • PCT/EP2009/067878
    • 2009-12-23
    • QIAGEN GmbHFABIS, RolandPETZEL, JanJENNRICH, Sabine
    • FABIS, RolandPETZEL, JanJENNRICH, Sabine
    • C12N15/10
    • C12N15/101
    • Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Aufreinigung von Nukleinsäuren aus einer nukleinsäurehaltigen Probe, das wenigstens die nachfolgenden Schritte aufweist: a. Inkontaktbringen der nukleinsäurehaltigen Probe mit einer protonierbare Gruppen aufweisenden nukleinsäurebindenden Phase, wobei die protonierbaren Gruppen einen pKs-Wert von 9 bis 12 aufweisen; b. Bindung der Nukleinsäuren an die nukleinsäurebindende Phase bei einem pH-Wert (Bindungs pH Wert), der wenigstens eine pH Einheit unterhalb des pKs-Wertes wenigstens einer der protonierbaren Gruppen liegt; c. Elution der Nukleinsäuren bei einem pH-Wert, der oberhalb des Bindungs pH Wertes liegt, jedoch wenigstens eine pH-Einheit unterhalb des pKs-Wertes wenigstens einer der protonierbaren Gruppen liegt. Darüber hinaus werden entsprechende Kits sowie nukleinsäurebindende Phasen, die zur Aufreinigung von Nukleinsäuren eingesetzt werden können, offenbart.
    • 本发明涉及一种用于从含核酸的样品的核酸的纯化方法,其至少包括以下步骤:a。 接触含有可质子化的基团的核酸结合相,样品的核酸,其中具有从9至12的pKa值的质子化基团; 湾 在pH值结合核酸与核酸结合相(结合pH值),它是下面的质子化基团中的至少一个的pK值的至少一个pH单位; 温度。 核酸洗脱,然而,一个pH单位是在pH值至少是下面的质子化基团中的至少一个的pKa值的结合的pH值以上。 此外,其可用于纯化核酸的试剂盒和适当的核酸结合相被公开。
    • 62. 发明申请
    • COMPOSITIONS, METHODS AND KITS FOR ISOLATING NUCLEIC ACIDS FROM BODY FLUIDS USING ANION EXCHANGE MEDIA
    • 用阴离子交换介质从体液中分离核酸的组合物,方法和试剂盒
    • WO2008045505A2
    • 2008-04-17
    • PCT/US2007/021723
    • 2007-10-10
    • XENOMICS, INC.FEAVER, William, JohnMELKONYAN, HovsepUMANSKY, SamuilMEYER, Erik
    • FEAVER, William, JohnMELKONYAN, HovsepUMANSKY, SamuilMEYER, Erik
    • C12Q1/68C07H21/04
    • C12N15/101C12N15/1006C12N15/1017C12Q1/6806
    • This invention provides compositions and methods for rapid separation, isolation and purification of nucleopolymers, especially nucleic acids, from biological samples. using anionic exchange media. The method of the present invention can utilize commercially available strong or weak anion exchanger materials with selected solutions of known ionic strength for adsorption and elution. The medium/nucleoprotein bound complex may be optionally stored or transported, but is subsequently treated with appropriate eluents to remove any undesirable proteins, including destabilizing enzymes, and inorganic salts and the like. The partially purified complex may also be stored or transported prior to further processing. The instant method is particularly advantageous as it provides the means for rapid isolation and purification of soluble nucleic acids obtained from samples of biological fluids of comparatively large volume, allowing ease of handling and storage, and stabilizing the samples against degradation prior to analysis. It also permits the purification and identification of shorter fragments of nucleic acids from bodily fluids which, up till now, had not been identified. The method is widely useful as a means to prepare samples formats that are convenient in diagnostic analytical methods, particularly those that rely on the detection, characterization and identification of nucleic acid sequences, from body fluids.
    • 本发明提供了用于从生物样品中快速分离,分离和纯化核聚合物,特别是核酸的组合物和方法。 使用阴离子交换介质。 本发明的方法可以利用商业上可得到的具有已知离子强度的选定溶液的强阴离子交换剂材料或弱阴离子交换剂材料进行吸附和洗脱。 培养基/核蛋白结合复合物可以任选地储存或运输,但随后用合适的洗脱液处理以除去任何不需要的蛋白质,包括去稳定化酶和无机盐等。 部分纯化的复合物也可以在进一步处理之前储存或运输。 本方法是特别有利的,因为它提供了用于从较大体积的生物流体样品获得的可溶性核酸的快速分离和纯化的手段,使得易于处理和储存,并稳定样品在分析之前不降解。 它还允许从体液中纯化和鉴定较短的核酸片段,直到现在还没有被鉴定出来。 该方法作为一种方法可以广泛用于制备方便诊断分析方法的样品,特别是那些依赖于体液中核酸序列的检测,鉴定和鉴定的方法。
    • 63. 发明申请
    • NUCLEIC ACID PURIFICATION METHOD USING ANION EXCHANGE
    • 使用阴离子交换的核酸纯化方法
    • WO2008039664A1
    • 2008-04-03
    • PCT/US2007/078816
    • 2007-09-19
    • GE HEALTHCARE BIO-SCIENCES CORP.TAKKELLAPATI, Sudhakar RaoAMBAT, Rajesh
    • TAKKELLAPATI, Sudhakar RaoAMBAT, Rajesh
    • C12N15/10
    • C12N15/101
    • The invention provides an improved method for the purification of nucleic acid molecules, which method comprises generating a cellular lysate containing the nucleic acid; contacting the lysate with an anion exchanger bound to a solid support matrix under conditions such that the anion exchanger binds the nucleic acid; followed by eluting the nucleic acid from the anion exchanger with an aqueous mobile phase comprising an elution solution; and desalting the eluted nucleic acid such that it is suitable for downstream applications. The improvement of the method includes adding in the elution solution a composition such that the pH of the aqueous mobile phase is between about pH 9 and about pH 13, wherein the presence of the composition in the elution solution provides an increase in nucleic acid recovery, as compared with the recovery in the absence of the composition.
    • 本发明提供了一种用于纯化核酸分子的改进方法,该方法包括产生含有核酸的细胞裂解物; 使所述裂解物与阴离子交换剂接触,所述阴离子交换剂在使所述阴离子交换剂结合所述核酸的条件下与固体支持基质结合; 随后用含有洗脱溶液的水性流动相从阴离子交换剂洗脱核酸; 并使洗脱的核酸脱盐,使其适合于下游应用。 该方法的改进包括在洗脱溶液中加入组合物使得水性流动相的pH在约pH9至约pH13之间,其中组合物在洗脱溶液中的存在提供了核酸回收率的增加, 与没有组合物的恢复相比。
    • 66. 发明申请
    • VERFAHREN ZUR ANREICHERUNG VON KURZKETTIGEN NUKLEINSÄUREN
    • PROCESS富集短链的NUCLEIC
    • WO2007065950A1
    • 2007-06-14
    • PCT/EP2006/069484
    • 2006-12-08
    • QIAGEN GMBHRITT, ChristophHIMMELREICH, RalfWEBER, Martin
    • RITT, ChristophHIMMELREICH, RalfWEBER, Martin
    • C12N15/10A61K31/7088
    • C12N15/101Y10T436/143333Y10T436/255
    • Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Anreicherung von Nukleinsäuren mit einer Länge von weniger als 300 Nukleotiden, umfassend die Verfahrensschritte i) Bereitstellen einer fluiden, vorzugsweise wässrigen, Phase P 1 beinhaltend (α1) mindestens eine Nukleinsäure mit einer Länge von weniger als 300 Nukleotiden, sowie (α2) mindestens eine von dieser Nukleinsäure (α1) verschiedene Komponente, ii) in Kontakt bringen der Phase P 1 mit einer Anionenaustausch-Matrix zum Anbinden der Nukleinsäure (α1) an die Anionenaustausch-Matrix, iii) gegebenenfalls Waschen der Anionenaustausch-Matrix mit einem Waschpuffer, wobei die Nukleinsäure (α1) an der Anionenaustausch-Matrix gebunden bleibt, sowie iv) Abtrennen, vorzugsweise Eluieren, der an der Anionenaustausch-Matrix gebundenen Nukleinsäure (α1) von der Anionenaustausch-Matrix unter Erhalt einer fluiden, vorzugsweise wässrigen, Phase P 2 beinhaltend die Nukleinsäure (α1). Die Erfindung betrifft auch einen Kit zur Anreicherung von Nukleinsäuren mit einer Länge von weniger als 300 Nukleotiden, die Verwendung dieses Kits, die Verwendung einer Anionenaustausch-Matrix sowie ein Verfahren zur Behandlung einer Krankheit.
    • 本发明涉及一种用于具有小于300个核苷酸的长度的核酸富集的方法,包括以下步骤:i)提供一种流体,优选水,相位P 1 具有包含(a1)中的至少一种核酸的 小于300个核苷酸长度,和(a2)这些核酸(A1)不同的分量中的至少一个,ii)将相位P 带来1 (与用于核酸a1的结合阴离子交换基质) 于阴离子交换基质,iii)任选地洗涤用洗涤缓冲液,其中所述的核酸(A1)保持结合至阴离子交换基质,和iv)中分离,优选地洗脱,结合至阴离子交换基质核酸(A1阴离子交换矩阵 )从阴离子交换基质以获得流体,优选水,相位P 2 包含核酸(A1)。 本发明还涉及一种试剂盒的具有小于300个核苷酸的长度的核酸富集,使用这种试剂盒,使用阴离子交换矩阵和用于治疗疾病的方法。
    • 67. 发明申请
    • VERFAHREN ZUR REINIGUNG DER DNA/RNA VON PROTEINEN UND ZELLULÄREN RESTSTOFFEN IM ZELLENLYSAT
    • 方法用于清洁DNA / RNA蛋白和细胞废物IN细胞裂解物
    • WO2006081597A1
    • 2006-08-10
    • PCT/AT2005/000519
    • 2005-12-22
    • DSHEMELINSKI, Vitali
    • DSHEMELINSKI, Vitali
    • C12N15/10
    • C12N15/101C12N15/1006
    • Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Reinigung der DNA/RNA von Proteinen und zellulären Reststoffen im Zellenlysat, wobei für die Schaffung des vorteilhaften Prozesses wird Reinigung mittels gesteuerter selektiven Flockung von Proteinen und zellulären Reststoffen durch die Anwendung von der Zusammensetzung aus der Polymeren mit negativ, positiv geladenen und gydrophoben Gruppen, Mikropartikel aus dem dreidimensionalen Polymeren-Matrix mit negativ geladenen und gydrophoben Gruppen, der Zusammensetzung aus der ionischer und nichtionischer Tensiden und SS Brücken spaltender Substanz im Puffer mit niedriger pH in der Zugabereihenfolge: 1. Puffer mit niedriger pH, die Zusammensetzung aus der ionischer und nichtionischer Tensiden, SS Brücken spaltende Substanz; 2. Die Zusammensetzung aus der Polymeren mit negativ geladenen Gruppen, Polymeren mit negativ geladenen und gydrophoben Gruppen, Mikropartikel aus dem dreidimensionalen Polymeren-Matrix mit negativ geladenen und gydrophoben Gruppen; 3. Polykationen, mit anschließender Zentrifugierung, durchgeführt.
    • 本发明涉及一种方法,用于DNA / RNA的蛋白质和细胞废物材料在细胞裂解物中,这通过使用的聚合物的组合物是用于创建有利的方法清洁的由蛋白质和细胞废料的控制选择性絮凝的手段具有负,正的纯化 充电和gydrophoben基团,带负电荷的和gydrophoben基的三维聚合物基质的微粒,离子和非离子表面活性剂和斯·布里奇斯另外的顺序在具有低pH值的缓冲液裂解物质的组合物:1.缓冲液具有低pH值,该组合物 从离子和非离子表面活性剂,斯·布里奇斯裂解物质; 2.具有带负电荷的基团,带负电荷的聚合物和gydrophoben基团,带负电荷的和gydrophoben基的三维聚合物基质的微粒的聚合物的组合物; 3.聚阳离子,随后通过离心执行。