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    • 2. 发明申请
    • 3차원 콜라겐 겔 환경 내에서 배양된 세포를 이용한 암 세포의 전이성 모니터링 방법
    • 使用三维胶原环境培养的细胞监测癌细胞分化的方法
    • WO2014185661A1
    • 2014-11-20
    • PCT/KR2014/004146
    • 2014-05-09
    • 재단법인 의약바이오컨버젼스연구단
    • 이정원김성훈이미숙
    • C12Q1/04C12N5/09C12M1/34
    • G01N33/574C12N5/0693C12N2501/727C12N2503/02C12N2533/54G01N33/5011G01N33/5023G01N33/5026G01N33/5029G01N33/57415G01N2333/4703G01N2333/4704G01N2333/4706G01N2440/14G01N2500/10
    • 본 발명은 3차원적 환경에서 배양된 암 세포의 모양관찰, 인바도포디아(invadopodia) 형성 및 전이에 관련된 단백질의 활성, 발현 및 발현위치 변화, 세포외기질의 분해 측정을 이용한 암 세포의 이동, 침윤 및 전이성 모니터링, 및 암 전이억제제 스크리닝 방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로 3차원 콜라겐 겔 환경 내에서 배양된 세포에서 c-Jun 인산화의 감소가 snail1의 발현 증가 및 코르탁틴(cortactin) 발현 감소를 유발하였고, 이러한 단백질들간의 발현조절 관계는 환자로부터 수득한 유방암 세포조직에서도 동일함을 확인하였다. 또한, 3차원적 콜라겐 겔 환경 내의 유방암 세포에 JNK 억제제를 처리하였을 때, 세포의 모양이 길어지고, 세포 및 세포외 기질의 접촉부분이 밋밋해지고 가늘어지며, 암세포의 이동이 감소하고, 단백질 발현 변화에 있어서는 TGFβ1의 발현증가, smad2 및 smad3의 발현 및 활성 증가, snail1의 발현 증가 및 코르탁틴의 발현 감소 및 이에 따른 인바도포디아의 형성 저하를 확인하였다. 또한, 3차원 콜라겐 겔 환경에서 코르탁틴외에도 MT1-MMP가 다른 인바도포디아 마커로 사용될 수 있고, 이는 JNK 억제가 코르탁틴의 발현을 감소시키고, snail1의 발현을 증가시키면서 동시에 MT1-MMP의 위치 및 역할에 부정적 영항을 미쳐 인바도포디아의 형성을 억제하며, 콜라겐 겔 기질의 분해능을 억제하는 것을 확인함으로써 암 세포의 이동, 침윤, 전이성 및 전이 정도를 모니터링하는 방법 및 암 전이억제제의 스크리닝 방법으로 사용할 수 있고, 이는 약물 개발에 필요한 전임상 실험 시 저비용 고효율의 부가가치를 창출할 수 있는 스크리닝 방법 중의 하나로 유용하게 사용될 것이다.
    • 本发明涉及通过观察在三维环境中培养的癌细胞的形状来监测癌细胞的迁移,侵袭和转移的方法,并且测量与侵入体形成相关的蛋白质的表达位点的活性,表达和变化 和转移,以及细胞外基质的降解; 涉及筛选癌症转移抑制剂的方法。 更具体地说,证实了c-Jun磷酸化的减少诱导了在三维环境中培养的细胞中蜗牛1的增加和皮质醇表达的降低,并且蛋白质之间的表达调节关系与乳腺癌中的相同 从患者获得的组织。 此外,证实当用JNK抑制剂处理三维胶原凝胶环境中的乳腺癌细胞时,细胞的形状变长; 细胞和细胞外基质的接触区域变平且变薄; 癌细胞迁移减少; 观察到蛋白质表达的变化,如TGF-bgr1表达增加,smad2和smad3表达和活性的增加,snail1表达的增加,cortactin表达的降低以及由此造成的invadopodia形成的减少。 另外,在三维胶原凝胶环境中,除了皮质激素外,MT1-MMP可以作为侵袭过程的标记,证实JNK的抑制作用导致皮质激素表达的降低和snail1表达的增加, 严重影响MT1-MMP的抑制形成侵袭性的位点和作用,抑制胶原凝胶底物的降解活性。 因此,本发明可以用作监测癌细胞的迁移,侵袭,转移和转移程度的方法和用于筛选癌症转移抑制剂的方法,并且将作为能够产生低分子量的筛选方法之一 - 药物开发所需的临床前试验时的高效附加值。
    • 8. 发明申请
    • HIGH THROUGHPUT INSTRUMENTATION TO SCREEN CELLS AND PARTICLES BASED ON THEIR MECHANICAL PROPERTIES
    • 基于其机械性能的高电导率仪器筛选细胞和颗粒
    • WO2013056253A1
    • 2013-04-18
    • PCT/US2012/060297
    • 2012-10-15
    • THE REGENTS OF THE UNIVERSITY OF CALIFORNIA
    • ROWAT, AmyQI, Dongping
    • C12Q1/24C12Q1/02B07B1/00
    • G01N33/5091B07B1/46B07B13/04G01N33/5005G01N33/5011G01N33/5026G01N2500/10
    • A system for the high-throughput screening of mechanical properties of cells and/or particles is provided. In certain embodiments the system comprises a first structure comprising a plurality of sample receiving wells; a second structure comprising a plurality of exit ports; a porous structure disposed between said plurality of sample receiving wells and said plurality of exit ports and in communication with said plurality of sample receiving wells and in communication with said plurality of exit ports, and said first structure, said second structure and said porous structure are sealed or configured such that when sufficient pressure is applied to sample receiving wells in said first structure said cells or particles migrate through the porous structure into said exit ports, and wherein the mean or the median pore size of said porous structure is smaller than the mean or median cross-section of a cell or particle that is to be screened.
    • 提供了用于高通量筛选细胞和/或颗粒的机械性能的系统。 在某些实施例中,系统包括包括多个样品接收孔的第一结构; 第二结构,包括多个出口; 设置在所述多个样品接收孔和所述多个出口之间并与所述多个样品接收阱连通并与所述多个出口连通的多孔结构,所述第一结构,所述第二结构和所述多孔结构是 密封或构造使得当对所述第一结构中的样品接收孔施加足够的压力时,所述细胞或颗粒通过多孔结构迁移到所述出口中,并且其中所述多孔结构的平均孔径或中值孔径小于平均值 或要筛选的细胞或颗粒的中间截面。