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    • 1. 发明申请
    • OPTISCHES ABBILDUNGSSYSTEM ZUR MULTISPEKTRALEN BILDGEBUNG
    • 光学图像中多光谱成像
    • WO2012034852A1
    • 2012-03-22
    • PCT/EP2011/064955
    • 2011-08-31
    • CARL ZEISS AGWESTPHAL, PeterKRAMPERT, Gerhard
    • WESTPHAL, PeterKRAMPERT, Gerhard
    • G02B21/00G01J3/02G01J3/28G01J3/32G01J3/44
    • G01N21/25G01J3/02G01J3/021G01J3/06G01J3/2823G01J3/32G01J3/4406G01J2003/1213G02B21/0064G02B21/0076G02B21/008
    • Die Erfindung bezieht sich auf ein optisches Abbildungssystem zur multispektralen Bildgebung. In einem von einem abzubildenden Objekt (1) kommenden Strahlengang befindet sich eine Filteranordnung (11) zur Selektion bestimmter Spektralbereiche, und es ist mindestens eine Detektionseinrichtung (14) für den Empfang der selektierten Spektralbereiche vorgesehen. Erfindungsgemäß umfasst ein solches Abbildungssystem optische Baugruppen (2, 3, 8, 10, 15) zur Erzeugung eines Abbildungsstrahlengangs aus dem von dem abzubildenden Objekt kommenden polychromatischen Licht, eine Filteranordnung (11) zur sequentiellen oder simultanen Selektion bestimmter, zur Abbildung des Objektes vorgesehener Spektralbereiche aus dem Abbildungsstrahlengang, mindestens eine Detektionseinrichtung für das Licht der selektierten Spektralbereiche, und eine mit der Detektionseinrichtung verbundene Bildwiedergabe- und/oder Bildauswerteeinrichtung, wobei die Filteranordnung mehrere, lateral zur Ausbreitungsrichtung des Abbildungsstrahlengangs nebeneinander angeordnete Einzelfilterareale aufweist, die zur Selektion unterschiedlicher Spektralbereiche ausgebildet sind, und eine Ablenkeinrichtung (9) vorhanden ist, durch welche der Abbildungsstrahlengang auf Einzelfilterareale gerichtet ist, deren Eigenschaften den zu selektierenden Spektralbereichen entsprechen.
    • 本发明涉及一种用于多光谱成像的光学成像系统。 在一个成像对象(1)未来的光束路径中的一个有特定光谱范围的选择的过滤器组件(11),它是所选择的光谱范围的接收的至少一个检测装置(14)被提供。 根据本发明,用于根据从所述对象到达的成像光束路径这样的成像系统的光学部件(2,3,8,10,15)被成像的多色光,一个过滤器装置(11),用于特定的顺序或同时选择,提供了一种用于对对象成像的光谱 从成像光束路径,对于所选的光谱区的光的至少一个检测装置的装置,以及连接于该检测装置的图像再现和/或图像分析装置,其中,所述过滤器组件包括多个横向于成像光束路径的传播方向并置了为不同光谱范围的选择形成的单独的过滤区, 和偏转器(9)被提供,通过该成像光束路径被引导到其属性对应的光谱范围来选择单独的过滤区域。
    • 2. 发明申请
    • LUMINESZENZMIKROSKOPIE
    • 发光
    • WO2011076458A1
    • 2011-06-30
    • PCT/EP2010/065969
    • 2010-10-22
    • CARL ZEISS MICROIMAGING GMBHKEMPE, MichaelNETZ, RalfKRAMPERT, Gerhard
    • KEMPE, MichaelNETZ, RalfKRAMPERT, Gerhard
    • G01N21/64G02B21/16
    • G01N21/6458G02B21/16
    • Lumineszenzmikroskopie -Verfahren, das umfaßt: es wird eine Probe (P) verwendet, die eine bestimmte Substanz aufweist, oder die Probe wird mit dieser bestimmten Substanz versehen, wobei die bestimmte Substanz wiederholt von einem ersten Zustand (A), in dem sie zur Abgabe von Lumineszenzstrahlung (3) anregbar ist, in einen zweiten Zustand (B) überführbar ist, in dem sie nicht zur Abgabe von Lumineszenzstrahlung anregbar ist, die in der Probe vorhandene bestimmte Substanz wird durch Einstrahlung von Schaltstrahlung (1) in den ersten Zustand gebracht, die in der Probe vorhandene bestimmte Substanz wird durch Einstrahlung von Anregungsstrahlung (2) zur Abgabe von Lumineszenzstrahlung angeregt und die Lumineszenzstrahlung abgebende Probe wird abgebildet, wobei eine hochaufgelöste Selektion von sich senkrecht zu einer Probenoberfläche erstreckenden Probenbereichen erfolgt, indem entweder die Schaltstrahlung oder die Anregungsstrahlung als strukturierte Beleuchtung (6) der Probe eingestrahlt wird, und wobei eine hochaufgelöste Selektion der Probenoberfläche erfolgt, indem die Schaltstrahlung und/oder die Anregungsstrahlung als TIRF-Beleuchtung der Probe eingestrahlt wird.
    • 发光方法,该方法包括:使用样品(P),其具有特定的物质,或将样品提供与该特定物质,从第一状态(A),其中它们提供重复的特定物质 发光辐射(3)被激励时,在第二状态(B)可以被转移,其中不被激励以发出发光辐射,这是存在于样品中,给定的物质通过的在第一状态切换辐射(1)照射引起, 在样品特定物质的存在是通过激发辐射的照射被激发(2)以发射发光辐射和发光辐射发射样本进行成像时,延伸垂直于样品表面的样品区域的高分辨率的选择由或者开关辐射或激发辐射进行 样品eingestr的结构化照明(6) 被选择,并且其中所述样品表面的高分辨率的选择由开关辐射和/或激发辐射进行照射的样品的TIRF照明。
    • 5. 发明申请
    • FLUORESCENCE MICROSCOPE COMPRISING A PHASE MASK
    • 与相位模板荧光显微镜
    • WO2010037486A3
    • 2010-11-04
    • PCT/EP2009006817
    • 2009-09-22
    • ZEISS CARL MICROIMAGING GMBHKEMPE MICHAELKRAMPERT GERHARDKLEPPE INGOWOLLESCHENSKY RALF
    • KEMPE MICHAELKRAMPERT GERHARDKLEPPE INGOWOLLESCHENSKY RALF
    • G01N21/64G01B21/16
    • G01N21/6428G01N21/6458G01N2021/6417G02B21/0076G02B21/16
    • Disclosed is an apparatus, especially a microscope, characterized by a diffraction-limited resolution volume, comprising multiple dye molecules (UF) that can be switched between different states, at least one of which is fluorescent. The fluorescence is focused using an objective (O) and is imaged onto a spatially resolving detector. In at least one portion of the sample, the UF have a distribution density that is greater than the inverse of the diffraction-limited resolution volume. Said apparatus further comprises one or more light sources for emitting a switching radiation in order to switch a first subset of the UF in the sample, and for emitting an excitation radiation in order to excite the first subset of UF. A phase mask which generates a light distribution (PSF) having an at least partially limited local minimum radiation on the detector plane is provided in the beam path, preferably in the detection beam path. Alternatively, an axicon is provided for generating a Bessel distribution (PSF) on the detector plane, a means for structuring the illumination distribution is provided in the illumination beam path, means for spectrally splitting the sample light are provided in the detection beam path, a receiver array composed of position-sensitive receivers (psd) is provided for detection purposes, means causing a color-dependent light distribution (PSF) on the detector plane are provided in the detection beam path, or an achromatic beam splitter is arranged in or near the pupil.
    • 是设备,特别是显微镜,其特征在于通过衍射限制的分辨率体积,具有多个可切换的之间不同状态染料分子(UF),所述至少一个条件是荧光的,收集到的荧光与目标(O),并与一个位置敏感探测器上的光学系统成像 其中,UF具有分布密度在比衍射极限分辨率体积的倒数越大,样品的至少一部分上; 用于发射的切换辐射来切换所述样品中的UF的第一子集和用于发送激发辐射来激发UF,其中一个相位掩模在光路设置的第一子集,最好是在检测光路,一个在检测器平面中的一个或多个光源 通过局部辐射最小至少部分地限定或用于生成贝塞尔分布(PSF)的旋转三棱镜产生的光分布(PSF)是在检测器平面内,或者是提供的照明光束的路径,以构建照度分布的手段,或者在检测光束路径装置,用于将样品的光的光谱分离设置,或用于 检测,位置敏感接收器的接收器阵列(PSD)被提供,或在检测光束路径设置装置,一颜色相关的光分布(PSF)诱导检测器平面,或消色差分束 R位于或瞳孔附近。
    • 6. 发明申请
    • VORRICHTUNG, INSBESONDERE EIN MIKROSKOP, ZUR UNTERSUCHUNG VON PROBEN
    • 装置,尤其是显微镜,调查样本
    • WO2010037486A2
    • 2010-04-08
    • PCT/EP2009/006817
    • 2009-09-22
    • CARL ZEISS MICROIMAGING GMBHKEMPE, MichaelKRAMPERT, GerhardKLEPPE, IngoWOLLESCHENSKY, Ralf
    • KEMPE, MichaelKRAMPERT, GerhardKLEPPE, IngoWOLLESCHENSKY, Ralf
    • G01N21/64G01B21/16
    • G01N21/6428G01N21/6458G01N2021/6417G02B21/0076G02B21/16
    • Vorrichtung, insbesondere ein Mikroskop, charakterisiert durch ein beugungsbegrenztes Auflösungsvolumen, mit mehreren zwischen unterschiedlichen Zuständen umschaltbaren Farbstoffmolekülen (UF), wobei mindestens ein Zustand fluoreszierend ist, die Fluoreszenz mit einem Objektiv (O) gesammelt und mit einem optischen System auf einen ortsauflösenden Detektor abgebildet wird, wobei die UF in mindestens einem Teil der Probe eine Verteilungsdichte aufweisen, die größer ist als das Inverse des beugungsbegrenzten Auflösungsvolumens; einer oder mehrere Lichtquellen zur Aussendung einer Umschaltstrahlung, um eine erste Untermenge der UF in der Probe umzuschalten und zur Aussendung einer Anregungsstrahlung, um die erste Untermenge der UF anzuregen, wobei im Strahlengang, vorzugsweise im Detektionsstrahhlengang eine Phasenmaske vorgesehen ist, die in der Detektorebene eine Lichtverteilung (PSF) mit zumindest teilweise begrenztem lokalen Strahlungsminimum erzeugt oder ein Axicon zur Erzeugung einer Besselverteilung (PSF) in der Detektorebene vorgesehen ist oder im Beleuchtungsstrahlengang ein Mittel zur Strukturierung der Beleuchtungsverteilung vorgesehen ist oder im Beleuchtungsstrahlengang ein Mittel zur Strukturierung der Beleuchtungsverteilung vorgesehen ist oder im Detektionsstrahlengang sind Mittel zur spektralen Aufspaltung des Probenlichtes vorgesehen sind oder zur Detektion ein Empfängerarray aus positionsempfindlichen Empfängern ( psd) vorgesehen ist oder Mittel im Detektionsstrahlengang vorgesehen sind, die eine farbabhängige Lichtverteilung (PSF) in der Detektorebene hervorrufen oder ein achromatischer Strahlteiler in oder in der Nähe der Pupille angeordnet ist.
    • 是设备,特别是显微镜,其特征在于通过衍射限制的分辨率体积,具有多个可切换的之间不同状态染料分子(UF),所述至少一个条件是荧光的,收集到的荧光与目标(O),并与一个位置敏感探测器上的光学系统成像 其中,UF具有分布密度在比衍射极限分辨率体积的倒数越大,样品的至少一部分上; 用于发射的切换辐射来切换所述样品中的UF的第一子集和用于发送的激发辐射来激发在检测器平面中的UF,其中一个相位掩模在光路中设置,优选地在Detektionsstrahhlengang,一个的第一子集的一个或多个光源 通过局部辐射最小至少部分地限定或用于生成贝塞尔分布(PSF)的旋转三棱镜产生的光分布(PSF)是在检测器平面内,或者是提供的照明光束的路径,以构建照度分布的手段,或者在照明光束路径中,装置被提供用于照明分布的结构或 检测光束的路径,用于将所述样品的光的光谱分离设置,或用于检测位置灵敏的接收器的接收器阵列(PSD)被提供,或在检测光束路径装置被提供,二 Ë导致检测器平面中的颜色相关的光分布(PSF),或消色差分束器被布置在或靠近瞳孔。
    • 7. 发明申请
    • STRAHLKOMBINIERER ZUM KOMBINIEREN VON ZWEI JEWEILS EIGENSTÄNDIG GESCANNTEN BELEUCHTUNGSSTRAHLEN EINES LICHTRASTERMIKROSKOPS
    • 合束器将两种光学显微镜网格的每个独立扫描光束照明
    • WO2012168423A1
    • 2012-12-13
    • PCT/EP2012/060879
    • 2012-06-08
    • CARL ZEISS AGKRAMPERT, GerhardSTUTZ, Michel
    • KRAMPERT, GerhardSTUTZ, Michel
    • G02B21/00
    • G02B21/0048G02B21/0032G02B21/0076G02B27/108G02B27/143
    • Ein Strahlkombinierer zum Kombinieren von zwei, jeweils eigenständig scanbaren Beleuchtungsstrahlen eines Lichtraster-Mikroskops, der aufweist: - einen ersten Strahlengang (B1), der einen ersten Beleuchtungsstrahl (2) längs einer ersten optischen Achse (OA1) führt und der eine erste Optikeinrichtung (L1) aufweist, die den ersten Beleuchtungsstrahl (2) in einer Zwischenbildebene bündelt, - einen zweiten Strahlengang (B2), der einen zweiten Beleuchtungsstrahl (3) längs einer zweiten optischen Achse (OA2) führt, die die erste optische Achse (OA1) in einem in der Zwischenbildebene gelegenen oder einem nahe der Zwischenbildebene gelegenen Schnittpunkt (Z) schneidet, und der einen Scanner (S2) zur Ablenkung des zweiten Beleuchtungsstrahls (3) aufweist, wobei der Scanner (S2) in Ausbreitungsrichtung des zweiten Beleuchtungsstrahls (3) vor dem Schnittpunkt (Z) der optischen Achsen (OA1, OA2) angeordnet ist, - eine Einkoppeleinheit (4), die am Schnittpunkt (Z) der optischen Achsen (OA1, OA2) angeordnet ist und die entweder eine Spiegelfläche (5) aufweist, die am Auftreffpunkt der ersten optischen Achse (OA1) eine Durchlaßöffnung (6; 7) hat, oder die bis auf ein Spiegelelement, das am Auftreffpunkt der ersten optischen Achse (OA1) liegt, transparent ist, wobei die Größe der Durchlaßöffnung (6; 7) bzw. des Spiegelelements dem Querschnitt entspricht, den der erste Beleuchtungsstrahl (2) am Auftreffpunkt überdeckt, und so diesen passieren läßt bzw. reflektiert, wobei nach der Einkoppeleinheit (4) erster und zweiter Beleuchtungsstrahl (2, 3) als kombinierter Beleuchtungsstrahl (8) propagieren.
    • 用于独立地可扫描照射束组合两个,在各情况下的光扫描显微镜的,包括光束组合: - 第一波束路径(B1),第一照明光束(2)沿第一光轴(OA1)和第一光学装置进行(L1 ),其重点在中间像平面上的第一光束(2), - 具有第二照明光束的第二光束路径(B2)(3)沿着第二光轴(OA2)导致第一光轴(OA1)的一 位于中间图像平面或位于靠近交叉点(Z)的中间像平面相交,和用于偏转所述第二光束的扫描器(S2)(3),其中,在交叉路口跟前的第二光束(3)的传播方向上的扫描器(S2) 光轴(OA1,OA2)的(Z)布置, - 布置在所述光轴的交叉点(Z)的点的连结部(4)(OA1,O- A2),其设置和其中任一个具有(在第一光轴OA1的碰撞点)的通道开口(6反射镜表面(5); 7),或者是透明的反射镜元件,其位于(在第一光轴OA1的入射点),其中,所述通道开口(6的尺寸; 7)或所述反射镜元件对应于所述的横截面,所述第一照射光束(2 )覆盖在冲击点,因此这可能发生或反射,其中(根据耦合单元4)的第一和第二照明光束(2,3),其为组合光束(8)中传播。
    • 8. 发明申请
    • APPARATUS, ESPECIALLY MICROSCOPE, FOR THE ANALYSIS OF SAMPLES
    • 装置,特别是显微镜,用于研究样品
    • WO2010037486A8
    • 2010-07-15
    • PCT/EP2009006817
    • 2009-09-22
    • ZEISS CARL MICROIMAGING GMBHKEMPE MICHAELKRAMPERT GERHARDKLEPPE INGOWOLLESCHENSKY RALF
    • KEMPE MICHAELKRAMPERT GERHARDKLEPPE INGOWOLLESCHENSKY RALF
    • G01N21/64G01B21/16
    • G01N21/6428G01N21/6458G01N2021/6417G02B21/0076G02B21/16
    • Disclosed is an apparatus, especially a microscope, characterized by a diffraction-limited resolution volume, comprising multiple dye molecules (UF) that can be switched between different states, at least one of which is fluorescent. The fluorescence is focused using an objective (O) and is imaged onto a spatially resolving detector. In at least one portion of the sample, the UF have a distribution density that is greater than the inverse of the diffraction-limited resolution volume. Said apparatus further comprises one or more light sources for emitting a switching radiation in order to switch a first subset of the UF in the sample, and for emitting an excitation radiation in order to excite the first subset of UF. A phase mask which generates a light distribution (PSF) having an at least partially limited local minimum radiation on the detector plane is provided in the beam path, preferably in the detection beam path. Alternatively, an axicon is provided for generating a Bessel distribution (PSF) on the detector plane, a means for structuring the illumination distribution is provided in the illumination beam path, means for spectrally splitting the sample light are provided in the detection beam path, a receiver array composed of position-sensitive receivers (psd) is provided for detection purposes, means causing a color-dependent light distribution (PSF) on the detector plane are provided in the detection beam path, or an achromatic beam splitter is arranged in or near the pupil.
    • 是设备,特别是显微镜,其特征在于通过衍射限制的分辨率体积,具有多个可切换的之间不同状态染料分子(UF),所述至少一个条件是荧光的,收集到的荧光与目标(O),并与一个位置敏感探测器上的光学系统成像 其中所述样品的至少一部分中的所述UF具有大于所述衍射极限分辨率体积的倒数的分布密度; 用于发射的切换辐射来切换所述样品中的UF的第一子集和用于发送的激发辐射来激发在检测器平面中的UF,其中一个相位掩模在光路中设置,优选地在Detektionsstrahhlengang,一个的第一子集的一个或多个光源 通过局部辐射最小至少部分地限定或用于生成贝塞尔分布(PSF)的旋转三棱镜产生的光分布(PSF)是在检测器平面内,或者是提供的照明光束的路径,以构建照度分布的手段,或者在照明光束路径中,装置被提供用于照明分布的结构或 提供用于样本光的光谱分离的检测光束路径装置或用于检测位置敏感接收器(psd)的接收器阵列或在检测光束路径中提供装置,di e在检测器平面中产生依赖于颜色的光分布(PSF)或在瞳孔中或在瞳孔附近布置消色差分束器。
    • 10. 发明申请
    • KOMBINATIONSMIKROSKOPIE
    • 数据组合
    • WO2010060515A1
    • 2010-06-03
    • PCT/EP2009/007693
    • 2009-10-28
    • CARL ZEISS MICROLMAGING GMBHWOLLESCHENSKY, RalfKLEPPE, IngoKRAMPERT, GerhardKEMPE, Michael
    • WOLLESCHENSKY, RalfKLEPPE, IngoKRAMPERT, GerhardKEMPE, Michael
    • G02B21/00G02B21/36G02B27/64G02B27/58
    • G02B27/642G01N21/6458G02B21/0076G02B21/367G02B27/58
    • Er wird ein Verfahren zum Erzeugen eines Bildes einer Probe mittels Mikroskopieverfahren, die unterschiedliche Ortsauflösung umfassen, beschrieben, wobei mindestens zwei der folgenden Mikroskopieverfahren kombiniert werden: Laserscanningmikroskopie zur Erzeugung eines LSM-Mikroskopiebildes, ein Mikroskopieverfahren, bei dem die Probe durch strukturierte Linien- oder Weitfeldbeleuchtung zur Lumineszenz angeregt wird, die Strukturierung gedreht und für jede Drehstellung mehrmals verschoben wird, wobei mindestens drei Drehlagen und pro Drehlage mindestens drei Verschiebelagen realisiert werden, jeweils die lumineszierende Probe auf einen Flächendetektor abgebildet wird und aus den so erhaltenden Bildern ein erstes Mikroskopie-Bild mit über die optische Auflösung der Abbildung hinaus gesteigerter Ortsauflösung erzeugt wird, ein weiteres Mikroskopieverfahren gemäß dem PAL-Prinzip, mit ein zweites Mikroskopie-Bild erzeugt wird, das geometrische Orte von Lumineszenzstrahlung abgebenden Markierungsmoleküle mit einer über die optische Auflösung gesteigerten Ortsauflösung angeben, und noch ein weiteres Mikroskopieverfahren, bei dem die Probe mit zur STED-, ESA- oder RESOLFT-Technik geeigneten Markierungsmolekülen markiert wird und mittels STED, ESA oder RESOLFT ein drittes Mikroskopiebild erzeugt wird, wobei die erhaltenen Mikroskopiebilder überlagert werden.
    • 它描述了一种方法,用于产生通过显微镜方法,包括不同空间分辨率的样品,其中至少两个下列显微镜方法结合起来的图像:激光扫描显微镜,用于产生LSM显微镜图像,显微镜方法,其中,通过结构化的线或宽视场照明的样品 结构化被激发发光,旋转并移动用于每个转动位置几次,其中每旋转位置的至少三个旋转位置的至少三个变速位置可以实现的,在每种情况下,发光试料被映射到区域检测器,并从如此获得的图像中,第一显微镜图像与 由成像另外的光学分辨率生成增加的空间分辨率,按照PAL-原理的另一显微镜方法中,通过一个第二显微图像生成,发光的几何位置供 指定Ñ标记分子具有增加的超过光学分辨率的空间分辨率,和另一个显微镜方法,其中,与所述STED,ESA或RESOLFT技术合适的标记物分子的样品被标记,并且由装置产生的第三显微镜图像STED,ESA或RESOLFT, 其中所获得的显微图像叠加。