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    • 6. 发明申请
    • 逆転写酵素のH型RNA分解酵素阻害剤のスクリーニング方法
    • 筛选逆转录酶的H型RNA酶抑制剂的方法
    • WO2005083112A1
    • 2005-09-09
    • PCT/JP2005/003100
    • 2005-02-25
    • 塩野義製薬株式会社吉永 智一宍戸 貴雄
    • 吉永 智一宍戸 貴雄
    • C12Q1/48
    • C12Q1/48G01N2333/9125G01N2500/00
    • テンプレート:5’−NRWXZ− 3’ プライマー  :3’−Y− 5’ (YはテンプレートのXにハイブリダイズし、 Nは13~19merのDNA、RNA又はキメラ核酸、 RはRNA、 WはDNA又はキメラ核酸、 Xは15mer以上のDNA、RNA又はキメラ核酸、 YはハイブリダイズするXと同じ長さのDNA、RNA又はキメラ核酸であり、ハイブリダイズするXがDNAの場合はDNA、ハイブリダイズするXがRNAの場合はRNA、ハイブリダイズするXがキメラ核酸の場合はキメラ核酸(キメラ核酸中、XがDNAの場合はDNA、XがRNAの場合はRNAである)、 ZはDNA、RNA又はキメラ核酸 (但し、WとZは無くてもよい)である)を用いることにより、金属イオン存在下で形成される逆転写酵素‐基質複合体に対して被検化合物をプレインキュベーションすることを可能とし、ポリメレース依存的R Nase H活性を阻害する物質のスクリーニング方法を確立した。
    • 通过使用:模板5'-NRWXZ-3'和引物3'-Y-5',可以将试验化合物与金属离子存在下形成的逆转录酶 - 底物复合物进行预温育。 其中Y可与模板中的X杂交; N代表13至19聚体DNA,RNA或嵌合核酸; R代表RNA; W表示DNA或嵌合核酸; X表示15聚体或更高级的DNA,RNA或嵌合核酸; Y代表具有与待杂交的X长度相同长度的DNA,RNA或嵌合核酸,条件是当与其杂交的X为DNA时,Y为DNA,Y为RNA, 要与其杂交的X是RNA,或在与其杂交的X是嵌合核酸的情况下Y是嵌合核酸(在嵌合核酸中,Y是在X是DNA的情况下的DNA, 或者Y是在X是RNA的情况下的RNA); Z表示DNA,RNA或嵌合核酸,条件是W和Z可以为无; 因此建立了筛选抑制聚合酶的核糖核酸酶H活性物质的方法。
    • 9. 发明申请
    • 強皮症の診断薬
    • SCLERODERMA诊断
    • WO2003056332A1
    • 2003-07-10
    • PCT/JP2002/012909
    • 2002-12-10
    • 学校法人 慶應義塾桑名 正隆
    • 桑名 正隆
    • G01N33/53
    • C07K16/40C07K2317/21G01N33/686G01N33/6881G01N2333/9125
    • Antibodies against RNA polymerase (RNAP) are frequently detected in patients suffering from diffuse scleroderma showing the rapid progress of sclerema and relate to a disease type accompanied by sclerodermatous renal crisis as a complication and showing extremely poor prognosis. Thus, it is intended to provide a method of conveniently detecting anti-RNAP antibodies which are highly useful in diagnosing scleroderma, classifying disease types and presuming organ disorders, in particular, sclerodermatous renal crisis. To identify an epitope recognized commonly by anti-RNAP antibodies, the full-length RPC62 and a fragment of RPC155, which are 2 subunits of RNAPIII of 62 kDa and 155 kDa respectively, are expressed as a recombinant protein in Escherichia coli. Then the reactivities with anti-RNAP antibody-positive and negative patients suffering from scleroderma are examined by the immunoblotting method so as to confirm that an epitope which is recognized commonly by anti-RNAP antibodies in the sera of the patients suffering from scleroderma exists in the amino acid residues at the 891- to 1020-positions of the RPC155.
    • 患有弥漫性硬皮病的患者经常检测到针对RNA聚合酶(RNAP)的抗体,其显示了sclerema的快速进展,并且涉及伴有硬皮病性肾脏危象的疾病类型并发症并且显示极差的预后。 因此,旨在提供一种方便地检测在诊断硬皮病,分类疾病类型和推定器官功能障碍,特别是硬皮病性肾脏危象中非常有用的抗-RNAP抗体的方法。 为了鉴定抗-RNAP抗体通常识别的表位,分别作为62kDa和155kDa的RNAPIII的2个亚基的全长RPC62和RPC155的片段在大肠杆菌中表达为重组蛋白。 然后通过免疫印迹法检测抗-RNAP抗体阳性和阴性患者与硬皮病的反应性,以证实在患有硬皮病的患者血清中通常被抗-RNAP抗体识别的表位存在于 RPC155在891-至1020位的氨基酸残基。
    • 10. 发明申请
    • METHOD FOR IDENTIFYING MODULATORS OF TRANSCRIPTION
    • 识别转录调节子的方法
    • WO02046461A2
    • 2002-06-13
    • PCT/GB2001/005354
    • 2001-12-04
    • G01N33/50A61K45/00A61P31/04A61P43/00C12N9/99C12N15/09C12Q1/02C12Q1/48C12Q1/68G01N33/15
    • C12Q1/48C12Q1/6837G01N2333/195G01N2333/9125G01N2500/10C12Q2565/507
    • A method for identifying a modulator of RNA polymerase (RNAP) comprises providing a host cell which expresses a first RNAP and has a first and second polynucleotide construct. The first polynucleotide construct comprises a first promoter operably linked to a first gene wherein the first gene is transcribed by the first RNAP. The second polynucleotide construct comprises a second promoteroperably linked to a second gene which is a reporter gene and wherein the second reporter gene is transcribed by a second RNAP. The host cell is provided with a source of the second RNAP. A test substance is contacted with the host cell under conditions that would permit the expression of the firs and second genes in the absence of the test substance. It can be determined thereby whether the test substance modulates RNAP.
    • 鉴定RNA聚合酶(RNAP)调节剂的方法包括提供表达第一RNAP并具有第一和第二多核苷酸构建体的宿主细胞。 第一多核苷酸构建体包含与第一基因可操作地连接的第一启动子,其中第一基因由第一RNAP转录。 第二多核苷酸构建体包含可操作地连接到作为报告基因的第二基因的第二个启动子,其中第二个报告基因由第二个RNAP转录。 宿主细胞具有第二RNAP的来源。 在允许在不存在测试物质的情况下允许第一和第二基因表达的条件下,将测试物质与宿主细胞接触。 可以确定测试物质是否调节RNAP。