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    • 2. 发明申请
    • BIOTECHNOLOGISCHE HERSTELLUNG VON 3-HYDROXYISOBUTTERSÄURE
    • 生物技术制造3-羟基
    • WO2013083374A1
    • 2013-06-13
    • PCT/EP2012/072594
    • 2012-11-14
    • EVONIK DEGUSSA GMBHHAAS, ThomasSCHAFFER, SteffenPÖTTER, MarkusWESSEL, MirjaPFEFFER, Jan, ChristophGEHRING, ChristianKIRCHNER, NicoleWITTMANN, Eva, Maria
    • HAAS, ThomasSCHAFFER, SteffenPÖTTER, MarkusWESSEL, MirjaPFEFFER, Jan, ChristophGEHRING, ChristianKIRCHNER, NicoleWITTMANN, Eva, Maria
    • C12P7/42C12N15/52C12N9/02
    • C12P7/42C12N9/0004C12N9/001C12N9/1217C12N9/13C12N9/88C12N9/93C12N15/52C12Y103/99002C12Y207/02007C12Y402/01017C12Y602/01002
    • Die Erfindung betrifft ein Verfahren umfassend die Schritte a) Bereitstellen von Isobuttersäure, b) Kontaktieren von Isobuttersäure mit der Kombination aus Isobutyrat-Kinase und Phosphotransisobutyrylase und/oder Isobutyryl-Coenzym A-Synthetase/Ligase und/oder Isobutyrat-Coenzym A-Transferase, c) Kontaktieren des Produktes aus Schritt a) mit Isobutyryl-Coenzym A-Dehydrogenase, d) Kontaktieren des Produktes aus Schritt b) mit Methacrylyl-Coenzym A-Hydratase, und e) Hydrolyse des Produktes aus Schritt d) unter Bildung von 3-Hydroxyisobuttersäure, wobei wenigstens eines der Enzyme in Form einer Zelle verwendet wird, die eine ihrem Wildtyp gegenüber verringerte Aktivität einer 3-Hydroxyisobuttersäure-Dehydrogenase oder einer Variante davon umfasst, eine Zelle, die wenigstens ein Enzym aus der Gruppe umfassend Isobutyryl-Coenzym A-Synthetase/Ligase, Isobutyrat-Coenzym A-Transferase, Isobutyrat-Kinase, Phosphotransisobutyrylase, Isobutyryl-Coenzym A-Dehydrogenase, Methacrylyl-Coenzym A-Hydratase und 3-Hydroxisobutyryl-Coenzym A-Hydrolase und eine gegenüber ihrem Wildtyp verringerte Aktivität einer 3-Hydroxyisobuttersäure-Dehydrogenase oder einer Variante davon aufweist, wobei die Zelle bevorzugt zusätzlich eine Monooxygenase, noch bevorzugter eine Monooxygenase des AlkBGT-Typs oder eine Variante davon aufweist und die Verwendung einer solchen Zelle zur Herstellung von 3-Hydroxyisobuttersäure.
    • 本发明涉及包括以下步骤:a)提供异丁酸,b)用异丁激酶和Phosphotransisobutyrylase和/或异丁酰辅酶A合成酶/连接酶和/或异丁 - 辅酶A转移酶,C的组合的异丁酸的接触的方法 )步骤a与异丁酰辅酶A脱氢酶,d)步骤b的产物接触)甲基丙烯 - 辅酶A水合酶,和e)从步骤d的产物水解)的产品)接触,以形成3-羟基异丁酸, 其中,在电池的形式的酶中的至少一个被用于其包括给的3-羟基异丁酸脱氢酶或其变体的活性降低一个与其野生型相对于,细胞包含选自异丁酰辅酶A合成酶/连接酶组成的组的至少一种酶 ,异丁 - 辅酶A转移酶,异丁激酶Phosphotransisobutyrylase,异丁酰辅酶A脱氢酶,甲基丙烯 - 辅酶A -Hydratase和3- Hydroxisobutyryl辅酶A水解酶和相对与其野生型活性降低的3-羟基异丁酸脱氢酶或其变体,其中所述细胞是优选另外一个单加氧酶,更优选AlkBGT型的单加氧酶或其变体 和所述使用用于生产3-羟基异丁酸这种细胞的。