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    • 8. 发明申请
    • APROTININ-VARIANTEN MIT VERBESSERTEN EIGENSCHAFTEN
    • 抑肽酶具有改进性能的变体
    • WO2008110301A1
    • 2008-09-18
    • PCT/EP2008/001820
    • 2008-03-07
    • BAYER HEALTHCARE AGHARRENGA, AxelOEHME, FelixAPELER, HeinerDITTMER, FrankFRANZ, JürgenSPERZEL, MichaelSTELTE-LUDWIG, BeatrixZIEGELBAUER, KarlGREVEN, Simone
    • HARRENGA, AxelOEHME, FelixAPELER, HeinerDITTMER, FrankFRANZ, JürgenSPERZEL, MichaelSTELTE-LUDWIG, BeatrixZIEGELBAUER, KarlGREVEN, Simone
    • C07K14/81
    • C07K14/8117
    • Ziel der vorliegenden Erfindung ist die Herstellung von Aprotinin-Varianten mit einer dem Aprotinin vergleichbaren oder verbesserten Wirksamkeit bei geringerer Antigenizität und Immunogenizität. Die gewünschten Eigenschaften werden durch den Austausch von Aminosäureresten im aktiven Zentrum und außerhalb des aktiven Zentrums gegen entsprechende Aminosäurereste anderer natürlicher oder nicht-naturlicher Kunitz-Domänen erzielt. Eine detaillierte Analyse des Aprotinins ergab überraschenderweise Positionen von Aminosäureresten des Aprotinins, deren gezielter Austausch gegen entsprechende Aminosäurereste anderer natürlicher oder nicht-natürlicher Kunitz-Domänen Aprotinin-Varianten ergibt (Fig 1: Seq Nr. 2 bis Seq Nr. 6 und Seq Nr. 10 bis Seq Nr. 14), die eine geringere Kreuzreaktivität mit Seren Aprotinin-behandelter Patienten aufweisen (verringerte Antigenizität) (Tabelle 4), in T-Zell-Epitop-Profilierungen eine verringerte Immunogenizität zeigen (Fig 1: Seq Nr.10 und Seq Nr. 13) (Tabelle 5) und eine dem Aprotinin vergleichbare oder bessere Wirkung in Bezug auf Enzyminhibition von Plasmin und Plasmakallikrein (Tabelle 4), Inhibition der Fibrinolyse (Fig. 3 und Fig. 4), Inhibition der Koagulation (Fig. 5 und Fig. 6), Inhibition komplexer inflammatorischer Prozesse (Fig. 7 und Fig. 8) und Verringerung der Blutungszeit haben.
    • 本发明的目的是具有在较低的抗原性和免疫原性的抑肽酶相当或改进的功效抑肽酶变体的制备。 所期望的特性是通过氨基酸残基的活性位点的交换和对应于氨基酸其他天然或非naturlicher Kunitz结构域的氨基酸残基的活性位点的外实现。 抑肽酶的详细分析得到的抑肽酶的氨基酸残基的令人惊讶的位置,对于对应其他天然或非天然Kunitz结构的氨基酸残基的目标交换域抑肽酶变体的结果(图1:.. SEQ第2号于Seq第6号,和Seq第10号 。于Seq#14),它具有较小的交叉反应性血清抑肽酶治疗的患者(降低的抗原性)(表4),在T细胞表位剖面显示降低的免疫原性(图1:SEQ第10号和Seq号 (13)(表5)和在纤维蛋白溶酶和血浆激肽释放酶(表4)抑制纤维蛋白溶解中的酶抑制方面的抑肽酶相当或更好的效果(图3和图4),抑制凝血图5和图 有6)复合物的炎性过程的抑制(图7和图8)和减少出血时间。