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    • 1. 发明申请
    • 다중 타겟 위치의 단일 핵산서열로의 어셈블리 방법
    • 用于将多个目标位置组装成单个核酸序列的方法
    • WO2012124965A2
    • 2012-09-20
    • PCT/KR2012/001808
    • 2012-03-13
    • 연세대학교 산학협력단방두희한효준
    • 방두희한효준
    • C12Q1/68C12N15/11
    • C12Q1/686C12P19/34C12Q1/6858C12Q1/6869C12Q2531/113C12Q2537/143C12Q2537/149
    • 본 발명은 다중 타겟 위치(multiple target loci)를 하나의 어셈블된 핵산서열로의 어셈블리하는 방법 및 이를 이용한 동시 검출방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 두 번의 PCR, 즉 제1차 PCR(polymerase chain reaction) 및 제2차 PCR 반응을 통해 다중 타겟 위치를 하나의 어셈블된 핵산서열로 어셈블리시킨다. 보다 상세하게는, 본 발명에서 이용되는 제1차 증폭용 프라이머쌍(정방향 프라이머 및 역방향 프라이머)은 타겟-특이적 서열(타겟 혼성화 뉴클레오타이드 서열) 및 5'-플랭킹 어셈블리 스페이서 서열(오버래핑 서열)로 이루어져 있다. 또한, 상기 제1차 증폭용 프라이머쌍을 이용하여 증폭된 제1차 증폭결과물을 제2차 증폭용 프라이머 세트를 통해 간편하고 용이하게 하나의 단축된 핵산서열로 어셈블리시켜 다중 타겟 위치를 동시에 검출할 수 있다. 따라서, 본 발명의 방법 및 키트는 시료(바람직하게는, 인간의 혈액)의 DNA 서열 상의 다중 변이성(예컨대, SNPs)을 동시에 검출 및 분석함으로써, 변이 검출을 위한 시퀀싱 비용을 현저하게 감소시킬 수 있을 뿐 아니라 맞춤형 의약의 개념을 실현하기 위한 중요한 접근방법 및 수단을 제공한다.
    • 本发明涉及用于将多个目标基因座组装成单个组装的核酸序列的方法,以及使用所述组装方法同时检测多个靶基因座的方法。 本发明的方法包括通过两个聚合酶链反应(PCR)将多个目标基因座组装成单个组装的核酸序列,即初级PCR和二级PCR。 更具体地,用于初次扩增的一对引物(正向引物和反向引物)由靶特异性序列(靶杂交核苷酸序列)和5'-侧翼组装间隔物序列(重叠序列)组成。 此外,通过用于初级扩增的一对引物扩增的初级扩增产物通过用于二次扩增的一组引物以方便和容易的方式组装成单个缩短的核酸序列,从而能够同时检测 多个目标基因座。 因此,本发明的方法和试剂盒可以同时检测和分析样品(优选人血液)的DNA序列中的多种变异性,因此不仅显着降低了检测变异性的测序成本,而且提供了关键方法和手段 实现定制医学的概念。
    • 8. 发明申请
    • 코돈 조합화 및 변이유발을 이용한 유전자 라이브러리의 합성 방법
    • 使用CODON组合和MUTAGENESIS合成基因库的方法
    • WO2014092458A1
    • 2014-06-19
    • PCT/KR2013/011492
    • 2013-12-11
    • 연세대학교 산학협력단
    • 방두희박상언이준구이지원
    • C12Q1/68C40B40/08C12N15/11
    • C12N15/102C12N15/1089C12N15/1093C12N15/67C12Q2563/179
    • 같은 단백질로 번역되는 3개의 핵산 염기서열(코돈)의 조합을 이용함으로써 유전자 라이브러리 합성 후, 핵산 염기서열의 다양한 라이브러리 서열의 분석 시 쉽게 에러를 찾아낼 수 있는 방식을 제안한다. 이를 이용해 단백질 서열은 같지만 핵산 염기서열은 서로 다른 유전자 라이브러리를 만들 수 있다는 것을 보여준다. 이는 생체 내에서 특정 유전자를 발현시키기 위해 최적화되어 있는 코돈의 사용을 변화시킴으로써 코돈 변화에 따른 유전자 발현의 상관관계를 측정할 수 있는 새로운 실험방법을 제공한다. 또한, 같은 방식으로 단백질 서열 역시 일부 유사단백질 서열로 변환시킨 유전자 라이브러리를 동시에 합성 및 분석할 수 있으며, 이를 통해 발현된 유전자의 일부 단백질 서열의 변화가 해당 유전자의 기능에 어떠한 영향을 미치는지 확인할 수 있는 방법을 제공한다.
    • 提出了一种能够在通过使用翻译成相同蛋白质的三个核酸碱基序列(密码子)的组合合成基因文库之后在分析核酸碱基序列的各种文库序列期间容易地发现错误的方法。 这表明可以产生具有相同蛋白质序列但不同核酸碱基序列的基因文库。 本发明提供了一种新的测试方法,其能够通过改变在体内表达特定基因而优化的密码子的使用来测量根据密码子变化的基因表达之间的相关性。 同样地,本发明同样地提供能够同时合成和分析其中蛋白质序列被相似蛋白质序列改变的基因文库的方法,因此能够鉴别部分蛋白质序列的变化的影响 的表达基因具有相应基因的功能。