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热词
    • 3. 发明公开
    • cDNA로부터의 비분절 네가티브 쇄 RNA 바이러스의회수를 위한 개선된 방법
    • 用于从CDNA恢复非分离的负面条件的病毒RNA病毒的改进方法
    • KR1020060028691A
    • 2006-03-31
    • KR1020057023762
    • 2004-06-08
    • 와이어쓰 엘엘씨
    • 팍스크리스토퍼엘우뎀스티븐에이시두모딘데르지트에스
    • C12N15/86C12N15/10C12N7/00
    • C07K14/005A61K39/00A61K48/00A61K2039/5254A61K2039/5256A61K2039/5258C12N7/00C12N15/86C12N2760/18022C12N2760/18422C12N2760/18451C12N2760/18452C12N2760/18551C12N2760/18552C12N2760/18622C12N2760/18651C12N2760/18652C12N2760/18662C12N2760/20243C12N2760/20251C12N2760/20252C12N2760/20262
    • Methods for producing infectious, non-segmented, negative-stranded RNA viruses of the Order Mononegavirales are provided that involve coexpression of a viral cDNA along with essential viral proteins, N, P, and L in a host cell transiently transfected with an expression vector encoding an RNA polymerase. In alternate methods, after the host cell is transfected with a viral cDNA expression vector and one or more vectors encoding the RNA polymerase, N protein, P protein, and L protein, the host cell is exposed to an effective heat shock under conditions sufficient to increase recovery of the recombinant virus. In other alternate embodiments, the host cells are transferred after viral rescue begins into co-culture with a plaque expansion cell, typically a monolayer of expansion cells, and the assembled infectious, non-segmented, negative-stranded RNA virus is recovered from the co-culture. Also provided within the invention are compositions for producing infectious, non-segmented, negative-stranded RNA virus of the Order Mononegavirales, recombinant viruses produced using the foregoing methods and compositions, and immunogenic compositions and methods employing the recombinant viruses. In additional embodiments, the methods and compositions of the invention are employed to produce growth- or replication-defective non-segmented negative-stranded RNA viruses and subviral particles.
    • 提供了产生单宁单胞菌属的感染性,非分段的负链RNA病毒的方法,其涉及病毒cDNA与基本病毒蛋白N,P和L共表达于用表达载体编码瞬时转染的宿主细胞中 RNA聚合酶。 在替代方法中,在用病毒cDNA表达载体和编码RNA聚合酶,N蛋白,P蛋白和L蛋白的一种或多种载体转染宿主细胞后,将宿主细胞暴露于有效的热休克, 增加重组病毒的恢复。 在其它替代实施方案中,宿主细胞在病毒救治开始与噬菌斑扩增细胞(通常为单层扩增细胞)共培养之后被转移,并且从共同体中回收组装的感染性,非分段的负链RNA病毒 -文化。 在本发明中还提供了用于产生单宁属(Mononegavirales)的感染性,非分段的负链RNA病毒的组合物,使用前述方法和组合物产生的重组病毒,以及使用重组病毒的免疫原性组合物和方法。 在另外的实施方案中,本发明的方法和组合物用于产生生长或复制缺陷型非分段负链RNA病毒和亚病毒颗粒。
    • 5. 发明授权
    • cDNA로부터의 비분절 네가티브 쇄 RNA 바이러스의 회수를 위한 개선된 방법
    • 从cDNA中回收非分段负链RNA病毒的改进方法
    • KR101020532B1
    • 2011-03-09
    • KR1020107014673
    • 2004-06-08
    • 와이어쓰 엘엘씨
    • 팍스크리스토퍼엘우뎀스티븐에이시두모딘데르지트에스
    • C12N7/00C12N15/86C12N15/33
    • C07K14/005A61K39/00A61K48/00A61K2039/5254A61K2039/5256A61K2039/5258C12N7/00C12N15/86C12N2760/18022C12N2760/18422C12N2760/18451C12N2760/18452C12N2760/18551C12N2760/18552C12N2760/18622C12N2760/18651C12N2760/18652C12N2760/18662C12N2760/20243C12N2760/20251C12N2760/20252C12N2760/20262
    • 본 발명은 바이러스 cDNA와 함께 필수적인 바이러스 단백질인 N, P 및 L 단백질을 RNA 폴리머라제를 암호화하는 발현 벡터로 일시적으로 형질감염된 숙주 세포내에서 공발현시킴을 포함하여, 모노네가비랄레스의 감염성의 비분절 네가티브 쇄 RNA 바이러스를 생산하는 방법을 제공한다. 다른 방법에서, 숙주 세포는 바이러스 cDNA 발현 벡터 및 RNA 폴리머라제, N 단백질, P 단백질 및 L 단백질을 암호화하는 하나 이상의 벡터로 형질감염된 후 재조합체 바이러스의 회수를 증가시키기에 충분한 조건하에 효과적인 열 쇼크에 노출시킨다. 다른 양태에서, 숙주 세포는, 바이러스 구조가 플라크 증대 세포, 통상적으로 증대 세포의 단층내로 개시된 후 형질감염되고, 조립된 감염성의 비분절 네가티브 쇄 RNA 바이러스는 공-배양물로부터 회수된다. 또한 모노네가비랄레스 목의 감염성의 비분절 네가티브 쇄 RNA 바이러스를 생산하기 위한 조성물, 당해 방법을 사용하여 생산된 재조합체 바이러스, 및 당해 재조합체 바이러스를 사용하는 면역원성 조성물 및 방법이 제공된다. 추가의 양태에서, 본 발명의 방법 및 조성물은 성장- 또는 복제-결함의 분획화되지 않은 네가티브 쇄 RNA 바이러스 및 준바이러스 입자를 생산하는데 사용된다.
    • 本发明是必需的病毒蛋白N,P和L蛋白与病毒cDNA,包括在感染了瞬态与RNA聚合酶的表达载体编码转染的宿主细胞锡金球表达,单声道你比拉尔少感染的非 Lt分段的负链RNA病毒。 在替代方案中,所述宿主细胞是条件下有效的热休克足以然后用一种或多种载体编码病毒的cDNA的表达载体转染,和RNA聚合酶,N蛋白,P蛋白和L蛋白,增加重组病毒的回收 暴露出来。 在另一个实施方案中,宿主细胞,病毒结构,然后转染到所公开的斑块生长细胞的单个层,通常的细胞的增加,组装传染性非节段负链RNA病毒是共从培养物中回收。 生产在颈部的感染性非节段负链RNA病毒的这也你比拉尔单少的组合物,提供了一种使用重组病毒的免疫原性,以及使用该方法的身体组成和方法制得的重组病毒。 在进一步的实施方案中,本发明的生长方法和组合物被用于生产负链RNA病毒和病毒样颗粒不属于缺陷的或复制的半分馏。