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    • 3. 发明授权
    • 뱀의 독소로부터 분리된 신규한 트롬빈 유사효소 및 그의제조방법
    • 新型蛇毒凝血酶样酶及其制备方法
    • KR100350906B1
    • 2002-09-05
    • KR1020000032654
    • 2000-06-14
    • 주식회사 앤씨비아이티
    • 정광회김두식고유석
    • C12N9/74
    • 본 발명은 뱀 독소로부터 분리된 신규한 트롬빈 유사효소(thrombin-like enzyme) 및 그의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 트롬빈 유사효소는 한국산 칠점사(
      Agkistrodon saxatilis emelianov )의 독소를 음이온 교환 크로마토그래피를 수행하고 겔 여과한 후, 음이온 교환 크로마토그래피를 재수행하는 단계를 포함하는 정제방법에 의하여 분리 정제되며, 다음과 같은 특성을 가지는 세린계 단백분해효소인 신규한 트롬빈 유사효소로 밝혀졌다: (ⅰ) 한국산 칠점사의 독소로부터 유래되며; (ⅱ) IIGGDEXNINEHRFL인 N-말단 아미노산 서열을 포함하고; (ⅲ) 분자량이 약 39kD의 당단백질이며; (ⅳ) 펩타이드-N-글리코시다제-F에 의하여 아스파라긴 잔기에 연결된 당이 제거된 후의 분자량은 약 28kD이고; (ⅴ) PMSF 또는 류펩틴에 의하여 효소 활성이 억제되며; (ⅵ) 트롬빈 특이성 기질인 D-Phe-Pip-Arg-
      p -nitroanilide 또는 칼리크레인 특이성 기질인 N-benzoyl-Phe-Val-Arg-
      p- nitroanilide을 분해하고, 이들 기질에 대한 K
      m 값은 34 내지 64μM이고; (ⅶ) 효소 활성의 초기 단계에서 피브리노겐 A 사슬을 분해하고, 반응이 연장될 경우 피브리노겐 B 사슬을 분해하며; 및, (ⅷ) 피브린 용해효소에 의하여 용이하게 분해되는 불안정한 피브리노겐 응괴(fibrinogen clotting)를 유도한다.
    • 4. 发明公开
    • 디스인테그린을 포함하는 항혈전제
    • 抗菌药物,包括从ADAM-15蛋白质衍生的病毒作为有效成分,用于治疗血栓形成
    • KR1020050012457A
    • 2005-02-02
    • KR1020030051430
    • 2003-07-25
    • 주식회사 앤씨비아이티
    • 정광회유원규홍성유손영덕고유석강승우최원석장양수김두식
    • A61K38/16
    • A61K38/4886C12N9/6418C12Y304/24
    • PURPOSE: An antithrombotic agent including disintegrin, hD15k, derived from Adam-15 protein as an effective ingredient is provided. The hD15k effectively inhibits thrombus formation while remarkably reducing adverse effects induced by conventional disintegrin binding to αvβ3 integrin without cytotoxicity. Therefore, it is useful as a therapeutic for thrombosis. CONSTITUTION: The antithrombotic agent contains an effective amount of, preferably 0.1 to 0.5mg/kg weight of a new recombinant protein, hD15k. The hD15k is obtained by mutating a disintegrin gene derived from Adam-15 protein and expressing it in Pichia pastoris. It has SEQ IN NO:2 and inhibits thrombus formation specifically on GPIIb/IIIa integrin present on the platelet surface.
    • 目的:提供一种抗凝血剂,包括以Adam-15蛋白为有效成分的解联蛋白,hD15k。 hD15k有效地抑制血栓形成,同时显着降低常规的解离酶与αvβ3整联蛋白结合而不产生细胞毒性的不良反应。 因此,作为血栓形成的治疗剂是有用的。 构成:抗血栓剂含有有效量的,优选0.1至0.5mg / kg重量的新重组蛋白质hD15k。 通过突变来自Adam-15蛋白的去整合素基因并在巴斯德毕赤酵母中表达来获得hD15k。 它具有SEQ NO NO:2并且抑制血小板表面上存在的GPIIb / IIIa整联蛋白上的血栓形成。
    • 6. 发明公开
    • 효모로부터 발현된 재조합 트롬빈 유사 효소 배트록소빈 및그 생산방법
    • 由PICHIA SP表示的类似THROMBIN的类似重组蛋白 及其生产方法
    • KR1020070004541A
    • 2007-01-09
    • KR1020067010448
    • 2003-10-31
    • 주식회사 앤씨비아이티
    • 유원규최원석고유석강승우정광회
    • C12N15/81
    • Thrombin-like recombinant batroxobin expressed by Pichia sp. and a production method thereof are provided to reduce the time of hemorrhage and blood coagulation without affecting other blood coagulating factors in blood, so that it is useful as a hemostatic agent. A yeast expression vector pPIC-rBAT containing the thrombin-like recombinant batroxobin is provided, wherein the thrombin-like recombinant batroxobin has the amino acid sequence of SEQ ID NO:1. A transformed yeast, Pichia pastoris GS115 is produced with the expression vector pPIC-rBAT. The thrombin-like recombinant batroxobin is produced by culturing the transformed yeast Pichia pastoris GS115 in a medium of pH 5.0-7.0 at 20-40 deg.C for 12-24 hours, centrifuging the cultured medium, culturing the cells in a medium(pH 5.0-7.0) containing 0.5-1.5%(v/v) methanol at 20-40 deg.C for 72-120 hours, and recovering the thrombin-like recombinant batroxobin by using hydrophobic chromatography and affinity chromatography.
    • 由毕赤酵母表达的凝血酶样重组巴曲酶 并且提供其制造方法以减少出血和血液凝固的时间,而不影响血液中的其它凝血因子,从而其可用作止血剂。 提供了含有凝血酶样重组巴曲酶的酵母表达载体pPIC-rBAT,其中凝血酶样重组巴曲酶具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列。 用表达载体pPIC-rBAT产生转化酵母巴斯德毕赤酵母GS115。 凝血酶样重组巴曲酶通过在20-40℃的pH 5.0-7.0的培养基中培养转化酵母巴斯德毕赤氏酵母GS115产生12-24小时,离心培养的培养基,在培养基(pH 5.0-7.0),在20-40℃下含有0.5-1.5%(v / v)甲醇72-120小时,并使用疏水层析和亲和层析回收凝血酶样重组巴曲酶。
    • 8. 发明公开
    • 뱀의 독소로부터 분리된 신규한 피브린 용해효소 및 그의제조방법
    • 从SNAKE VENOM衍生的新型纤维蛋白酶及其制备方法
    • KR1020010111892A
    • 2001-12-20
    • KR1020000032655
    • 2000-06-14
    • 주식회사 앤씨비아이티
    • 정광회김두식고유석
    • C12N9/74
    • C12N9/6429A61K38/4833C07K1/18
    • 본 발명은 뱀의 독소로부터 분리된 신규한 피브린 용해효소(fibrinolytic enzyme) 및 그의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 피브린 용해효소는 한국산 칠점사(
      Agkistrodon saxatilis emelianov )의 독소를 음이온 교환 크로마토그래피를 수행하고 겔 여과한 후, 음이온 교환 크로마토그래피를 재수행하는 단계를 포함하는 정제방법에 의하여 분리 정제되며, 다음과 같은 특성을 가지는 세린계 단백분해효소인 신규한 피브린 용해효소임이 밝혀졌다: (ⅰ) 한국산 칠점사의 독소로부터 유래되는 당단백질이며; (ⅱ) VIGGDEXNINEHRFLVALYT의 N-말단 아미노산 서열을 포함하고; (ⅲ) SDS-PAGE로 분석시, 분자량이 약 39kD의 당단백질이며; (ⅳ) 펩타이드-N-글리코시다제-F로 아스파라긴 잔기에 연결된 당이 제거된 후의 분자량은 약 28kD이고; (ⅴ) PMSF에 의하여 효소활성이 억제되며; (ⅵ) 트롬빈 특이성 기질인 D-Phe-Pip-Arg-
      p -nitroanilide 또는 칼리크레인 특이성 기질인 N-Pro-Phe-Arg-
      p- nitroanilide를 분해하고, 플라스미노겐 활성인자의 기질인 D-Val-Leu-Lys-
      p -nitroanilide를 급격히 분해하고, 이들에 대한 K
      m 값은 196 내지 324μM이고; (ⅶ) 효소 활성의 초기 단계에서 피브리노겐 B 사슬을 분해하고, 반응이 연장될 경우 피브리노겐 A 사슬을 분해하며; 및, (ⅷ) 트롬빈 또는 트롬빈 유사효소에 의하여 형성된 피브린 응괴를 용이하게 분해한다.