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1. 发明授权

KR100500796B1 고분자량의 폴리-감마-글루탐산을 생산하는 내염성 균주 바실러스 서브틸리스 청국장 有权
标题翻译： BACILLUS SUBTILIS VAR CHUNGKOOKJANG生产高分子量聚氨基葡萄糖酸
公开(公告)号：KR100500796B1
公开(公告)日：2005-07-12
申请号：KR1020027010976
申请日：2001-08-11
申请人： 한국생명공학연구원 , 주식회사 바이오리더스
发明人： 성문희 , 백대헌 , 이승구 , 송재준 , 홍승표 , 최윤호 , 한재숙 , 아시우치마코토 , 소다겐지 , 부하령 , 나유진
IPC分类号： C12N1/20
CPC分类号： C12R1/125 , C07K14/32
摘要： 본 발명은 한국의 전통 콩발효식품인 "청국장"으로부터 분리된 내염성 균주 바실러스 서브틸리스 청국장(
Bacillus subtilis var.
chungkookjang , KCTC 0697BP) 및 전기 균주로부터 생산되는 식용, 수용성, 음이온성, 생분해성 고분자물질인 폴리-감마-글루탐산에 관한 것이다.
본 발명의 '바실러스 서브틸리스 청국장'은 통상의 폴리-감마-글루탐산 생산균주인 바실러스
속 균주보다 고분자량의 폴리-감마-글루탐산을 고농도로 생산하여 그 생산성을 향상시켰으므로, 전기 균주로부터 생산되는 폴리-감마-글루탐산은 고부가가치의 화장품 소재, 흡습제, 생분해성 플라스틱 용재 등의 제품개발에 유용하게 활용될 것이다.

2. 发明公开

KR1020020061022A 신규 Ｄ-글루탐산 합성효소 유전자 ＤＮＡ 및 이를 이용한 항생제 비의존성 벡터 失效
标题翻译：用于恒定高表达的抗生素独立载体和使用该基因表达的基因表达方法
公开(公告)号：KR1020020061022A
公开(公告)日：2002-07-22
申请号：KR1020010001690
申请日：2001-01-12
申请人： 주식회사 바이오리더스 , 한국생명공학연구원
发明人： 성문희 , 이승구 , 홍승표 , 윤은자 , 최윤호 , 부하령 , 이상철
IPC分类号： C12N15/65
CPC分类号： C12N15/65
摘要： PURPOSE: Provided are an antibiotics-independent vector for constant high-expression and a method for gene expression using the same. The antibiotics-independent vector can be applied to high expression of useful DNAs and proteins, and production of recombinant proteins. CONSTITUTION: The antibiotics-independent plasmid vector is constructed by using a major amino acid composing a cell wall and a gene associated with D-glutamic acid synthase, as an auxotrophic maker, and it contains DNA or its fragment which is represented by the SEQ ID NO:1. The antibiotics-independent plasmid vector expresses a foreign gene in the absence of antibiotics, and shows D-glutamic acid synthesis activity in a bacterium. The foreign gene is characteristically selected from the group consisting of nucleic acids coding proteins, anti-sense RNA, and ribozyme. A transformant including the expression vector is cultured without adding antibiotics to its culture medium in order to give proteins.
摘要翻译：目的：提供用于恒定高表达的抗生素非依赖载体和使用其的基因表达方法。抗生素无关载体可用于高表达有用的DNA和蛋白质，以及重组蛋白的产生。构成：通过使用构成细胞壁的主要氨基酸和与D-谷氨酸合酶相关的基因作为营养缺陷型制剂，构建与抗生素无关的质粒载体，并且其含有由SEQ ID NO：1。不含抗生素的质粒载体在不存在抗生素的情况下表达外源基因，并在细菌中显示D-谷氨酸合成活性。外源基因特征性地选自编码蛋白质，反义RNA和核酶的核酸组。培养包含表达载体的转化体，而不向其培养基中加入抗生素以产生蛋白质。

3. 发明授权

KR100427587B1 신규 Ｄ-글루탐산 합성효소 유전자 ＤＮＡ 및 이를 이용한 항생제 비의존성 벡터 失效
标题翻译： 신규D-글루탐산합성효소유전자DNA및이를이용한항생제비의존성벡터
公开(公告)号：KR100427587B1
公开(公告)日：2004-04-27
申请号：KR1020010001690
申请日：2001-01-12
申请人： 주식회사 바이오리더스 , 한국생명공학연구원
发明人： 성문희 , 이승구 , 홍승표 , 윤은자 , 최윤호 , 부하령 , 이상철
IPC分类号： C12N15/65
CPC分类号： C12N15/65
摘要： An antibiotic-independent vector for stable vector maintenance and high protein expression and a method for gene expression using this vector are disclosed. The stable maintenance of the vector is due to expression of a glutamic acid racemase to complement a D-glutamic acid auxotroph. No antibiotics, such as ampicillin, are necessary for the stable maintenance of this vector.
摘要翻译：公开了用于稳定载体维持和高蛋白表达的抗生素非依赖性载体以及使用该载体的基因表达方法。载体的稳定维持是由于表达谷氨酸消旋酶以补充D-谷氨酸营养缺陷体。为了稳定维持这种载体，不需要抗生素，如氨苄青霉素。

4. 发明授权

KR100656546B1 티로신 페놀리아제의 고속 스크리닝 방법 및 이에 의해스크리닝된 변이체 失效
标题翻译：筛选酪氨酸酚解酶和突变体的方法
公开(公告)号：KR100656546B1
公开(公告)日：2006-12-11
申请号：KR1020050022892
申请日：2005-03-18
申请人： 주식회사 바이오리더스 , 한국생명공학연구원
发明人： 이승구 , 송재준 , 나유진 , 최수림 , 홍승표 , 최윤호 , 성문희
IPC分类号： C12Q1/34 , C12N15/55 , C12N9/14
摘要： 본 발명은 티로신 페놀리아제의 고속 스크리닝 방법 및 이에 의해 스크리닝된 변이체에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 티로신을 미세 결정의 형태를 갖도록 제조하고 이를 미생물 배지에 첨가하여 불투명 평판 배지를 만든 후, 미생물 생장에 따라서 콜로니 주변에 형성되는 투명환의 크기를 관찰함으로써 티로신 페놀리아제 효소 활성을 가지는 미생물을 선발하는 방법 및 상기 방법에 의해 선발된 티로신 페놀리아제의 돌연변이체에 대한 것이다.
본 발명의 티로신 페놀리아제의 고속 스크리닝 방법을 이용하게 되면, 대량 라이브러리로부터 효소 활성을 고속으로 탐색할 수 있게 되어, 티로신 페놀리아제를 합성하는 미생물을 스크리닝할 수 있으며, 또한, 티로신 페놀리아제의 효소 변이체 라이브러리에서 활성이 개선된 변이 효소를 분리하는데 유용하게 이용될 수 있어, 티로신 페놀리아제의 방향성 분자진화(directed molecular evolution) 연구 및 효소 개량에 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 티로신 페놀리아제 돌 연변이체는 기존의 티로신 페놀리아제에 비해 활성이 월등히 뛰어나므로, 산업적으로 유용하다.
티로신 페놀리아제, 방향성 분자진화, 고속탐색, 미세결정, 티로신

5. 发明公开

KR1020060101051A 티로신 페놀리아제의 고속 스크리닝 방법 및 이에 의해스크리닝된 변이체 失效
标题翻译：筛选类风湿酚酸的方法及其筛选方法
公开(公告)号：KR1020060101051A
公开(公告)日：2006-09-22
申请号：KR1020050022892
申请日：2005-03-18
申请人： 주식회사 바이오리더스 , 한국생명공학연구원
发明人： 이승구 , 송재준 , 나유진 , 최수림 , 홍승표 , 최윤호 , 성문희
IPC分类号： C12Q1/34 , C12N15/55 , C12N9/14
CPC分类号： C12Q1/527 , C12Y401/99002
摘要： 본 발명은 티로신 페놀리아제의 고속 스크리닝 방법 및 이에 의해 스크리닝된 변이체에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 티로신을 미세 결정의 형태를 갖도록 제조하고 이를 미생물 배지에 첨가하여 불투명 평판 배지를 만든 후, 미생물 생장에 따라서 콜로니 주변에 형성되는 투명환의 크기를 관찰함으로써 티로신 페놀리아제 효소 활성을 가지는 미생물을 선발하는 방법 및 상기 방법에 의해 선발된 티로신 페놀리아제의 돌연변이체에 대한 것이다.
본 발명의 티로신 페놀리아제의 고속 스크리닝 방법을 이용하게 되면, 대량 라이브러리로부터 효소 활성을 고속으로 탐색할 수 있게 되어, 티로신 페놀리아제를 합성하는 미생물을 스크리닝할 수 있으며, 또한, 티로신 페놀리아제의 효소 변이체 라이브러리에서 활성이 개선된 변이 효소를 분리하는데 유용하게 이용될 수 있어, 티로신 페놀리아제의 방향성 분자진화(directed molecular evolution) 연구 및 효소 개량에 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 티로신 페놀리아제 돌 연변이체는 기존의 티로신 페놀리아제에 비해 활성이 월등히 뛰어나므로, 산업적으로 유용하다.
티로신 페놀리아제, 방향성 분자진화, 고속탐색, 미세결정, 티로신

6. 发明公开

KR1020020079889A 고분자량의 폴리-감마-글루탐산을 생산하는 내염성 균주 바실러스 서브틸리스 청국장 有权
标题翻译：生产高分子量聚乳酸的BSA-4能够生产聚氨基酸的高分子量的HALOPHILE MICROORGANISM BACILLUS SUBTILIS BS-4
公开(公告)号：KR1020020079889A
公开(公告)日：2002-10-19
申请号：KR1020027010976
申请日：2001-08-11
申请人： 한국생명공학연구원 , 주식회사 바이오리더스
发明人： 성문희 , 백대헌 , 이승구 , 송재준 , 홍승표 , 최윤호 , 한재숙 , 아시우치마코토 , 소다겐지 , 부하령 , 나유진
IPC分类号： C12N1/20
CPC分类号： C12R1/125 , C07K14/32
摘要： PURPOSE: Provided are halophile microorganism Bacillus subtilis BS-4 capable of producing high molecular weight of poly-γ-glutamic acid and a method for producing the high molecular weight of poly-γ-glutamic acid using the same, thereby producing the high molecular weight poly-γ-glutamic acid in higher yield. CONSTITUTION: The halophile microorganism Bacillus subtilis BS-4 (KCTC 0697BP) capable of producing high molecular weight of poly-γ-glutamic acid is isolated from 'Chug Kook Jang'(Fermented soybean paste) by the steps of: diluting 'Chug Kook Jang' in distilled water; heating the diluted solution at 60 deg. C for 20 minutes; plating the diluted solution on GS agar medium; culturing it at 37 deg. C for 3 days; isolating high viscosity of colonies; culturing the colonies in a broth at 37 deg. C for 20 hours; and selecting a strain showing the best growth activity. The method for producing the high molecular weight of poly-γ-glutamic acid comprises the steps of: (a) culturing the Bacillus subtilis BS-4(KCTC 0697BP) to obtain poly-γ-glutamic acid; and (b) removing polysaccharides from the poly-γ-glutamic acid; dissolving the precipitate of poly-γ -glutamic acid and adding a protease into the solution to decompose an extracellular protein; and dialyzing the solution to remove free glutamic acid and concentrating the solution.
摘要翻译：目的：提供能够生产高分子量聚-γ-谷氨酸的嗜碱性微生物枯草芽孢杆菌BS-4，以及使用其制备高分子量聚-γ-谷氨酸的方法，从而产生高分子量聚-γ-谷氨酸。构成：通过以下步骤从“Chug Kook Jang”（发酵大豆酱）分离能够产生高分子量聚-γ-谷氨酸的嗜碱性微生物枯草芽孢杆菌BS-4（KCTC 0697BP），稀释“Chug Kook Jang 在蒸馏水中将稀释溶液加热至60℃。 C 20分钟; 将稀释的溶液电镀在GS琼脂培养基上; 在37度培养 C 3天; 分离菌落的高粘度; 在37℃的肉汤培养菌落。 C 20小时; 并选择显示最佳生长活性的菌株。制备高分子量聚-γ-谷氨酸的方法包括以下步骤：（a）培养枯草芽孢杆菌BS-4（KCTC 0697BP）以获得聚-γ-谷氨酸; 和（b）从聚-γ-谷氨酸中除去多糖; 溶解聚-γ-谷氨酸的沉淀物，并向溶液中加入蛋白酶以分解细胞外蛋白质; 并透析溶液以除去游离谷氨酸并浓缩溶液。

7. 发明授权

KR100632764B1 신규 프로모터 및 이 프로모터를 사용한 유전자 발현방법 有权
标题翻译：使用促销者的新型促销者和基因表达方法
公开(公告)号：KR100632764B1
公开(公告)日：2006-10-11
申请号：KR1020027014299
申请日：2001-04-26
申请人： 주식회사 바이오리더스 , 다카라 바이오 가부시키가이샤
发明人： 성문희 , 이승구 , 홍승표 , 서화정
IPC分类号： C12N15/75
CPC分类号： C07K14/32 , C12N15/70 , C12N15/75
摘要： 유전자 발현을 유도하지 않아도, 이 유전자를 고레벨로 발현할 수 있는 프로모터, 재조합 DNA, 유전자 발현용 벡터, 발현 벡터 및 형질전환세포 및 조작이 간편하고, 또한 저가로 실시할 수 있는, 단백질의 제조방법 및 그 키트를 제공하는 것. 서열표의 서열번호 : 1 또는 2 의 염기서열을 갖는 DNA 또는 그 단편에서, 대장균 또는 바실러스속 세균에서 구성적 프로모터 활성을 나타내는 단리 DNA ; 이 DNA 에 하이브리다이즈 가능하고, 대장균 또는 바실러스속 세균에서 구성적 프로모터 활성을 나타내는 단리 DNA ; 이 DNA 와 외래유전자가, 이 외래유전자가 발현가능한 상태로 배치된 재조합 DNA ; 이 DNA 를 적어도 함유한 유전자 발현용 벡터 ; 이 재조합 DNA 를 함유한 발현 벡터 ; 이 재조합 DNA 또는 이 발현 벡터를 함유한 형질전환세포 ; 이 형질전환세포를 배양하여, 얻어진 배양물에서 단백질을 채취하는, 단백질의 제조방법 그리고 이 DNA 또는 이 유전자 발현용 벡터를 적어도 함유한 단백질 제조용 키트.

8. 发明公开

KR1020030072208A 신규 프로모터 및 이 프로모터를 사용한 유전자 발현방법 有权
标题翻译：用于调节基因表达的新型促进剂和方法
公开(公告)号：KR1020030072208A
公开(公告)日：2003-09-13
申请号：KR1020027014299
申请日：2001-04-26
申请人： 주식회사 바이오리더스 , 다카라 바이오 가부시키가이샤
发明人： 성문희 , 이승구 , 홍승표 , 서화정
IPC分类号： C12N15/75
CPC分类号： C07K14/32 , C12N15/70 , C12N15/75
摘要： PURPOSE: Novel promoter which is capable of expressing a gene with a high level and a method for regulating gene expression using the same are provided, thereby easily and cheaply expressing the gene. CONSTITUTION: An isolated DNA having a base sequence represented by SEQ ID NO: 1 or 2 or its fragment showing a constitutive promoter activity in Escherichia coli or bacteria belonging to the genus Bacillus is provided. An isolated DNA hybridizable with the above DNA and showing a constitutive promoter activity in Escherichia coli or bacteria belonging to the genus Bacillus is provided. A recombinant DNA including the above DNA and a foreign gene is provided. A vector containing at least the above DNA for gene expression is provided. An expression vector containing the above recombinant DNA is provided. A transformed cells carrying the above recombinant DNA or the above expression vector is provided. A process for producing a protein comprises culturing the above transformed cell and collecting the protein from the culture medium. A kit for producing a protein contains at least the above DNA or the above vector for gene expression.
摘要翻译：目的：提供能够表达高水平基因的新型启动子和使用其的基因表达调节方法，从而容易且廉价地表达该基因。构成：提供了具有由SEQ ID NO：1或2表示的碱基序列的分离的DNA或其在大肠杆菌或属于芽孢杆菌属的细菌中显示组成型启动子活性的片段。提供了与上述DNA杂交的分离的DNA，并在大肠杆菌或属于芽孢杆菌属的细菌中显示组成型启动子活性。提供了包含上述DNA和外来基因的重组DNA。提供了至少含有上述用于基因表达的DNA的载体。提供含有上述重组DNA的表达载体。提供携带上述重组DNA或上述表达载体的转化细胞。制备蛋白质的方法包括培养上述转化细胞并从培养基中收集蛋白质。用于产生蛋白质的试剂盒至少含有上述DNA或上述用于基因表达的载体。

9. 发明公开

KR1020010078440A 고분자량의 폴리-감마-글루탐산을 생산하는 내염성 균주바실러스 서브틸리스 청국장 无效
标题翻译： BACILLUS SUBTILISVAR。 CHUNGKOOKJANG（KTCT 0697BP）生产高分子量的多糖 - 谷氨酸
公开(公告)号：KR1020010078440A
公开(公告)日：2001-08-21
申请号：KR1020010001481
申请日：2001-01-11
申请人： 주식회사 바이오리더스 , 가부시키 가이샤 파마푸즈
发明人： 성문희 , 백대헌 , 이승구 , 송재준 , 홍승표 , 최윤호 , 신선영 , 한재숙 , 아시우치마코토 , 소다겐지
IPC分类号： C12N1/20
CPC分类号： C12R1/125 , C07K14/32
摘要： PURPOSE: Provided is salt tolerant strain, Bacillus subtilisvar. chungkookjang (KTCT 0697BP) isolated from Korean traditional fermented food, chungkookjang. And poly-gamma-glutamic acid is also provided which is edible, water-soluble, anionic, biodegradable and produced from the strain, and which is used in cosmetics, absorbent, biodegradable plastic materials. CONSTITUTION: A Bacillus subtilisvar. chungkookjang (KTCT 0697BP) is isolated from chungkookjang. A preparation method of poly-gamma-glutamic acid from the strain comprises the steps of: (a) inoculating and cultivating Bacillus subtilisvar. chungkookjang (KTCT 0697BP) in a medium to produce poly-gamma-glutamic acid and then, adding acids until PH becomes 2 to 4 , to obtain liquid that includes poly-gamma-glutamic acid; (b) removing polysaccharide from the resultant liquid, followed by extracting with solvent and centrifuging it to obtain precipitate of poly-gamma-glutamic acid; (c) dissolving the precipitant by adding distilled water, then degrading exogenous protein by proteinase; and (d) dialyzing it to remove free glutamic acid and concentrating it.
摘要翻译：目的：提供耐盐菌株，枯草芽胞杆菌菌。 chungkookjang（KTCT 0697BP）从韩国传统发酵食品，chungkookjang分离。还提供了可从食品，水溶性，阴离子性，生物降解性和从菌株生产的聚γ-谷氨酸，并且用于化妆品，吸收性，可生物降解的塑料材料中。构成：枯草芽孢杆菌。 chungkookjang（KTCT 0697BP）从chungkookjang隔离。来自菌株的聚-γ-谷氨酸的制备方法包括以下步骤：（a）接种并培养枯草芽孢杆菌菌素。（KTCT 0697BP）在培养基中产生聚-γ-谷氨酸，然后加入酸直到PH变为2〜4，得到包含聚-γ-谷氨酸的液体; （b）从所得液体中除去多糖，然后用溶剂萃取，离心分离得到聚-γ-谷氨酸沉淀物; （c）通过加入蒸馏水溶解沉淀剂，然后通过蛋白酶降解外源蛋白质; 和（d）透析以除去游离谷氨酸并浓缩。

10. 发明授权

KR101971678B1 신규한 세스퀴테르펜 신타아제 및 이를 이용한 세스퀴테르펜 생산방법 有权
公开(公告)号：KR101971678B1
公开(公告)日：2019-04-23
申请号：KR1020170135146
申请日：2017-10-18
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 이승구 , 이대희 , 김성근
IPC分类号： C12N9/88 , C12N15/52 , C12N15/70 , C12P5/00

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