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    • 6. 发明申请
    • プロテインホスファターゼ2A型酵素ヘテロニ量体誘導体の製造方法
    • 生产蛋白磷酸酶2A型酶的高效液相色谱衍生物的方法
    • WO2006048923A1
    • 2006-05-11
    • PCT/JP2004/016256
    • 2004-11-02
    • 株式会社トロピカルテクノセンター安元 健池原 強
    • 安元 健池原 強
    • C12N15/09
    • C12N9/14
    •  遺伝子工学的に活性を有するPP2Aを大量に、しかも純粋な形で提供すること。  第1のタグを付したプロテインホスファターゼ2A型酵素(PP2A)の触媒サブユニットをコードするcDNAを組み込んだバキュロウイルスと、第2のタグを付したPP2AのAサブユニットをコードするcDNAを組み込んだバキュロウイルスとを、一緒に昆虫培養細胞に感染させて培養した後、当該培養細胞を破砕して細胞破砕液を得、この細胞破砕液を、第1のタグと結合する物質が担持された固相および第2のタグと結合する物質が担持された固相を用いて精製することを特徴とするPP2Aヘテロ2量体誘導体の製造方法。  
    • 旨在从大量和纯形式的基因工程的角度提供具有活性的PP2A。 提供了一种生产PP2A异二聚体衍生物的方法,其特征在于同时用杆状病毒同时感染培养的昆虫细胞,所述杆状病毒插入其中编码具有粘附有第一标签的蛋白质磷酸酶2A型酶(PP2A)的催化亚单位的cDNA, 杆状病毒,其中插入有编码具有第二标签的PP2A的A亚基的cDNA; 孵化感染的混合物; 粉碎培养的细胞,从而获得破碎的细胞液; 并且通过携带能够与第一标签结合的物质的固相和携带能够与第二标签结合的物质的固相来纯化破碎的细胞液体。
    • 7. 发明申请
    • プロテインホスファターゼ2A型酵素ヘテロ二量体誘導体の製造方法
    • 蛋白质磷酸酯酶2A型酶的制备方法
    • WO2007057949A1
    • 2007-05-24
    • PCT/JP2005/021011
    • 2005-11-16
    • 株式会社トロピカルテクノセンター安元 健池原 強新城 富喜子
    • 安元 健池原 強新城 富喜子
    • C12N15/09C12N9/16C12Q1/42
    • C12N9/16
    •  遺伝子工学的に活性を有するPP2Aを大量に、しかも純粋な形で提供することを目的とし、第1のタグを付したプロテインホスファターゼ2A型酵素(PP2A)の触媒サブユニットをコードするcDNAを組み込んだバキュロウイルスと、第2のタグを付したPP2AのAサブユニットをコードするcDNAを組み込んだバキュロウイルスとを、一緒に昆虫培養細胞に感染させて培養した後、当該培養細胞を破砕して細胞破砕液を得、この細胞破砕液を、第1のタグと結合する物質が担持された固相および第2のタグと結合する物質が担持された固相を用いて精製するPP2Aヘテロ2量体誘導体の製造方法において、バキュロウイルスが感染した昆虫細胞を、18ないし22°Cの温度で培養することを特徴とするPP2Aヘテロ2量体誘導体の製造方法を提供する。
    • 旨在提供大量和纯粹状态下具有遗传工程活性的PP2A。 即,制备PP2A异二聚体衍生物的方法,其包括用杆状病毒感染昆虫细胞,其具有编码携带其中整合有第一标签的蛋白质磷酸酶2A型(PP2A)酶的催化亚单位的cDNA以及另一种杆状病毒,其具有 编码PP2A的A亚基的cDNA携带其中整合的第二个标签; 孵化昆虫细胞; 破坏昆虫细胞以产生破坏的细胞悬浮液; 然后使用携带能够与第一标签结合的物质的固相和另一种携带能够结合第二标签的物质的固相纯化破碎的细胞悬浮液,其特征在于已经感染了所述第二标签的昆虫细胞 杆状病毒在18至22℃的温度下孵育。