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    • 6. 发明专利
    • 單步驟純化重組胃幽門螺旋桿菌嗜中性白血球激活蛋白(HP-NAP)的方法
    • 单步骤纯化重组胃幽门螺旋杆菌嗜中性白血球激活蛋白(HP-NAP)的方法
    • TW201331368A
    • 2013-08-01
    • TW101102406
    • 2012-01-20
    • 國立清華大學NATIONAL TSING HUA UNIVERSITY
    • 傅化文FU, HUA WEN施國順SHIH, KUO SHUN林志昌LIN, CHIH CHANG楊昱琪YANG, YU CHI
    • C12N9/00B01D15/04C12N15/70
    • C07K14/205
    • 本發明揭露一種單步驟純化重組胃幽門螺旋桿菌嗜中性白血球激活蛋白(HP-NAP)的方法,其步驟包括:提供一含有HP-NAP之待純化樣本,其中該待純化樣本係取自一可表現重組HP-NAP之蛋白質表現系統;將該含有重組HP-NAP之待純化樣本以一二乙氨乙基(DEAE)離子交換樹脂,在一預定pH值區間進行純化;以及收集經由該上述步驟後之一流出液(flowthrough fraction)及清洗液(wash fraction),其中該流出液及清洗液包含一預定純度之重組HP-NAP。本發明利用高親和性的DEAE Sephadex離子交換樹脂以單一步驟將水溶性蛋白的重組HP-NAP純化出來,藉此從枯草桿菌表現系統中純化出低內毒素殘留的重組HP-NAP,且純化出來的重組HP-NAP具有典型的α-helix二級結構且可活化嗜中性白血球以產生活性氧。
    • 本发明揭露一种单步骤纯化重组胃幽门螺旋杆菌嗜中性白血球激活蛋白(HP-NAP)的方法,其步骤包括:提供一含有HP-NAP之待纯化样本,其中该待纯化样本系取自一可表现重组HP-NAP之蛋白质表现系统;将该含有重组HP-NAP之待纯化样本以一二乙氨乙基(DEAE)离子交换树脂,在一预定pH值区间进行纯化;以及收集经由该上述步骤后之一流出液(flowthrough fraction)及清洗液(wash fraction),其中该流出液及清洗液包含一预定纯度之重组HP-NAP。本发明利用高亲和性的DEAE Sephadex离子交换树脂以单一步骤将水溶性蛋白的重组HP-NAP纯化出来,借此从枯草杆菌表现系统中纯化出低内毒素残留的重组HP-NAP,且纯化出来的重组HP-NAP具有典型的α-helix二级结构且可活化嗜中性白血球以产生活性氧。
    • 7. 发明专利
    • 腸胃疾病生物標記分子及其檢測方法
    • 肠胃疾病生物标记分子及其检测方法
    • TWI317811B
    • 2009-12-01
    • TW095145918
    • 2006-12-08
    • 國立台灣大學
    • 周綠蘋林玉芬林肇堂吳明賢
    • G01N
    • C07K14/205C12Q1/6883C12Q1/689C12Q2600/158G01N33/57446G01N2333/205
    • 本發明提供一種用於檢測腸胃疾病之生物標記分子,其係選自:GroES之寡核苷酸序列、其互補股或其衍生物、其胺基酸序列或其衍生物、其片段、其變異體、其對應之抗體或其組合物。利用上述標記分子,本發明亦提供一種腸胃疾病之檢測套組以及一種腸胃疾病之檢測方法,尤其是篩選與幽門螺旋菌有關之胃癌。 【創作特點】 有鑑於臨床上有使用生物標記分子以檢測腸胃疾病之需要,本發明提供一用於檢測腸胃疾病之生物標記分子,其主要目的在於檢測幽門螺旋菌感染與否,以供臨床上針對不同狀態腸胃疾病以進行治療。
      本發明之另一目的在於提供一種腸胃疾病之檢測套組,可從檢體的檢測瞭解腸胃疾病發生狀態,以進行臨床上的診斷與治療。
      本發明之又一目的在於提供一種腸胃疾病之檢測方法,用以幫助臨床上之腸胃疾病的診斷與治療。
      為達上述目的,本發明提供一種用於檢測腸胃疾病之生物標記分子,其係選自:GroES之寡核苷酸序列、其互補股或其衍生物、其胺基酸序列或其衍生物、其片段、其變異體、其對應之抗體或其組合物。前述GroES係為一幽門螺旋桿菌之特異蛋白。
      在一較佳實施例中,GroES寡核苷酸序列係選自SEQ ID NO:1。GroES胺基酸序列係選自SEQ ID NO:2。
      本發明較佳係用於檢測由幽門螺旋菌所導致之胃癌。
      本發明另提供一種用於檢測腸胃疾病之生物標記分子,其係選自:SEQ ID NO:1所示之寡核苷酸序列、其互補股、其衍生物或SEQ ID NO:2所示之胺基酸序列或其衍生物、其片段、其變異體、其對應之抗體或其組合物。
      本發明另提供一種腸胃疾病之檢測套組,包含:生物標記分子,其係選自於GroES之寡核苷酸序列、其互補股和衍生物、其胺基酸序列或其衍生物、其片段、其變異體、其對應之抗體或其組合物。GroES係為一幽門螺旋桿菌之特異蛋白。
      在一較佳實施例中,GroES寡核苷酸序列係為SEQ ID NO:1。GroES胺基酸序列係為SEQ ID NO:2。
      在一較佳實施例中,前述之檢測套組可進一步包含可辨識SEQ ID NO:2所示之任一胺基酸序列或其衍生物、其片段、其變異體、其組合物或其對應之抗體的二級抗體。
      本發明亦提供一種胃癌之檢測方法,係包含下列步驟:(a)提供一檢體;(b)提供一生物標記分子,其係選自:SEQ ID NO:1、所示之寡核苷酸序列、其互補股、其衍生物或SEQ ID NO:2所示之胺基酸序列或其衍生物、其片段、其變異體、其對應抗體或其組合物;(c)將前述生物標記分子與檢體中之待測物質接觸,前述待測物質係選自:GroES之寡核苷酸序列、其互補股、其衍生物或胺基酸序列或其衍生物、其片段、其變異體、其對應抗體或其組合物;及(d)偵測前述步驟(c)中生物標記分子與檢體中之待測物質接觸後之產物。前述檢體係包含血清、唾液及胃部組織。
      於本發明之一實施態樣中,前述生物標記分子係可進一步先行固定於基材上。該基材包含,但不限於,薄膜、免疫分析盤或生物晶片。
      在一較佳實施例中,前述檢體中待測物質係可進一步先行以螢光標記進行標示。
      在一較佳實施例中,前述檢測方法係可於步驟(d)之前增加一利用二級抗體辨識吸附對應抗體之步驟。
      在一較佳實施例中,前述步驟(d)當偵測胺基酸序列時,係利用酵素連結免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、放射免疫分析(RIA)、西方墨點法(western blot)或免疫螢光分析(Immunofluorescence)方法。
      在一較佳實施例中,前述步驟(d)當偵測寡核苷酸序列時,係利用反轉錄酶-聚合酶鏈鎖反應(reverse transcriptase-polymerase chain reactioin,RT-PCR)或原位雜交反應(In situhybridization)。
      本發明又提供一種用於檢測胃癌之生物標記分子,其係選自:GroES之胺基酸序列或其衍生物、其片段、其變異體、其對應之抗體或其組合物。GroES係為一幽門螺旋桿菌之特異蛋白。
      在一較佳實施例中,GroES胺基酸序列係選自SEQ ID NO:2。
      本發明又提供一種胃癌之檢測套組,包含:生物標記分子,其係選自於GroES之胺基酸序列或其衍生物、其片段、其變異體、其對應之抗體或其組合物;其中前述GroES係為一幽門螺旋桿菌之特異蛋白。
      在一較佳實施例中,前述之GroES胺基酸序列係為SEQ ID NO:2。
      在一較佳實施例中,前述之檢測套組可進一步包含可辨識SEQ ID NO:2所示之任一胺基酸序列或其衍生物、其片段、其變異體、其組合物或其對應之抗體的二級抗體。
      本發明所述之”變異體”與GroES之原胺基酸序列具有大於80%之序列同一性。本發明所述之”衍生物”係指於前述核苷酸之序列或其互補股之3’端或5’端修飾其他核苷酸序列,使其仍和原序列具有70%或以上相似性之寡核苷酸序列,較佳為具有90%或以上相似性之寡核苷酸序列。
      本發明利用GroES之寡核苷酸序列或胺基酸序列等分子做為生物標記分子,可有效檢測幽門螺旋菌所導致的腸胃疾病甚至是胃癌,以供臨床上針對不同病因進行治療。
    • 本发明提供一种用于检测肠胃疾病之生物标记分子,其系选自:GroES之寡核苷酸串行、其互补股或其衍生物、其氨基酸串行或其衍生物、其片段、其变异体、其对应之抗体或其组合物。利用上述标记分子,本发明亦提供一种肠胃疾病之检测套组以及一种肠胃疾病之检测方法,尤其是筛选与幽门螺旋菌有关之胃癌。 【创作特点】 有鉴于临床上有使用生物标记分子以检测肠胃疾病之需要,本发明提供一用于检测肠胃疾病之生物标记分子,其主要目的在于检测幽门螺旋菌感染与否,以供临床上针对不同状态肠胃疾病以进行治疗。 本发明之另一目的在于提供一种肠胃疾病之检测套组,可从检体的检测了解肠胃疾病发生状态,以进行临床上的诊断与治疗。 本发明之又一目的在于提供一种肠胃疾病之检测方法,用以帮助临床上之肠胃疾病的诊断与治疗。 为达上述目的,本发明提供一种用于检测肠胃疾病之生物标记分子,其系选自:GroES之寡核苷酸串行、其互补股或其衍生物、其氨基酸串行或其衍生物、其片段、其变异体、其对应之抗体或其组合物。前述GroES系为一幽门螺旋杆菌之特异蛋白。 在一较佳实施例中,GroES寡核苷酸串行系选自SEQ ID NO:1。GroES氨基酸串行系选自SEQ ID NO:2。 本发明较佳系用于检测由幽门螺旋菌所导致之胃癌。 本发明另提供一种用于检测肠胃疾病之生物标记分子,其系选自:SEQ ID NO:1所示之寡核苷酸串行、其互补股、其衍生物或SEQ ID NO:2所示之氨基酸串行或其衍生物、其片段、其变异体、其对应之抗体或其组合物。 本发明另提供一种肠胃疾病之检测套组,包含:生物标记分子,其系选自于GroES之寡核苷酸串行、其互补股和衍生物、其氨基酸串行或其衍生物、其片段、其变异体、其对应之抗体或其组合物。GroES系为一幽门螺旋杆菌之特异蛋白。 在一较佳实施例中,GroES寡核苷酸串行系为SEQ ID NO:1。GroES氨基酸串行系为SEQ ID NO:2。 在一较佳实施例中,前述之检测套组可进一步包含可辨识SEQ ID NO:2所示之任一氨基酸串行或其衍生物、其片段、其变异体、其组合物或其对应之抗体的二级抗体。 本发明亦提供一种胃癌之检测方法,系包含下列步骤:(a)提供一检体;(b)提供一生物标记分子,其系选自:SEQ ID NO:1、所示之寡核苷酸串行、其互补股、其衍生物或SEQ ID NO:2所示之氨基酸串行或其衍生物、其片段、其变异体、其对应抗体或其组合物;(c)将前述生物标记分子与检体中之待测物质接触,前述待测物质系选自:GroES之寡核苷酸串行、其互补股、其衍生物或氨基酸串行或其衍生物、其片段、其变异体、其对应抗体或其组合物;及(d)侦测前述步骤(c)中生物标记分子与检体中之待测物质接触后之产物。前述检体系包含血清、唾液及胃部组织。 于本发明之一实施态样中,前述生物标记分子系可进一步先行固定于基材上。该基材包含,但不限于,薄膜、免疫分析盘或生物芯片。 在一较佳实施例中,前述检体中待测物质系可进一步先行以萤光标记进行标示。 在一较佳实施例中,前述检测方法系可于步骤(d)之前增加一利用二级抗体辨识吸附对应抗体之步骤。 在一较佳实施例中,前述步骤(d)当侦测氨基酸串行时,系利用酶链接免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、放射免疫分析(RIA)、西方墨点法(western blot)或免疫萤光分析(Immunofluorescence)方法。 在一较佳实施例中,前述步骤(d)当侦测寡核苷酸串行时,系利用反转录酶-聚合酶链锁反应(reverse transcriptase-polymerase chain reactioin,RT-PCR)或原位杂交反应(In situhybridization)。 本发明又提供一种用于检测胃癌之生物标记分子,其系选自:GroES之氨基酸串行或其衍生物、其片段、其变异体、其对应之抗体或其组合物。GroES系为一幽门螺旋杆菌之特异蛋白。 在一较佳实施例中,GroES氨基酸串行系选自SEQ ID NO:2。 本发明又提供一种胃癌之检测套组,包含:生物标记分子,其系选自于GroES之氨基酸串行或其衍生物、其片段、其变异体、其对应之抗体或其组合物;其中前述GroES系为一幽门螺旋杆菌之特异蛋白。 在一较佳实施例中,前述之GroES氨基酸串行系为SEQ ID NO:2。 在一较佳实施例中,前述之检测套组可进一步包含可辨识SEQ ID NO:2所示之任一氨基酸串行或其衍生物、其片段、其变异体、其组合物或其对应之抗体的二级抗体。 本发明所述之”变异体”与GroES之原氨基酸串行具有大于80%之串行同一性。本发明所述之”衍生物”系指于前述核苷酸之串行或其互补股之3’端或5’端修饰其他核苷酸串行,使其仍和原串行具有70%或以上相似性之寡核苷酸串行,较佳为具有90%或以上相似性之寡核苷酸串行。 本发明利用GroES之寡核苷酸串行或氨基酸串行等分子做为生物标记分子,可有效检测幽门螺旋菌所导致的肠胃疾病甚至是胃癌,以供临床上针对不同病因进行治疗。
    • 8. 发明专利
    • 血液中幽門螺桿菌抗原 Helicobacter Pylori Antigens in Blood
    • 血液中幽门螺杆菌抗原 Helicobacter Pylori Antigens in Blood
    • TWI237695B
    • 2005-08-11
    • TW089126426
    • 2000-12-12
    • 九毓生物科技股份有限公司
    • 尹慶燧 CHING SUI A. YI洪忠和 CHUNG-HO HUNG
    • G01N
    • G01N33/56922C07K14/205C07K16/121Y10S435/975Y10S436/806Y10S436/824
    • 本發明係關於發現並檢測受感染個體之血液中的幽門螺桿菌(H. pylori)抗原。幽門螺桿菌抗原係來幽門螺桿菌細胞之成分,其包含,但不限於DNA、RNA及核酸、蛋白質或胜之片段。幽門螺桿菌DNA、RNA及核酸片段可藉由聚合鏈反應(PCR)、連接鏈反應(LCR)或DNA雜交法或其他擴增法檢測。幽門螺桿菌蛋白質或其胜或其他的抗原性成分可藉由使用抗幽門螺桿菌之抗體,較佳係由親和性管柱純化得之抗體之免疫分析或免疫印跡法予以檢測。本發明進一步提供用於檢測血清樣品中之幽門螺桿菌抗原之免疫分析方法、診斷套組及免疫層析分析裝置。
    • 本发明系关于发现并检测受感染个体之血液中的幽门螺杆菌(H. pylori)抗原。幽门螺杆菌抗原系来幽门螺杆菌细胞之成分,其包含,但不限于DNA、RNA及核酸、蛋白质或胜之片段。幽门螺杆菌DNA、RNA及核酸片段可借由聚合链反应(PCR)、连接链反应(LCR)或DNA杂交法或其他扩增法检测。幽门螺杆菌蛋白质或其胜或其他的抗原性成分可借由使用抗幽门螺杆菌之抗体,较佳系由亲和性管柱纯化得之抗体之免疫分析或免疫印迹法予以检测。本发明进一步提供用于检测血清样品中之幽门螺杆菌抗原之免疫分析方法、诊断套组及免疫层析分析设备。