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1. 发明授权

KR100360594B1 인간 인터페론 알파의 발현 분비벡터 및 이를 이용한인터페론 알파의 생산 방법 有权
标题翻译：人干扰素α的表达分泌载体及使用其产生干扰素α的方法
公开(公告)号：KR100360594B1
公开(公告)日：2002-11-13
申请号：KR1020000002434
申请日：2000-01-19
申请人： 한미사이언스 주식회사
发明人： 권세창 , 정성엽 , 최기두 , 김차순 , 배성민 , 이관순
IPC分类号： C12N15/21
摘要： 본 발명은 대장균의 변형된 열안정성 엔테로톡신 II 분비서열 유전자 및 그의 3'-말단에 연결된 인간 인터페론 알파(human Interferon α: hIFN α) 유전자를 포함하는 인간 인터페론 알파의 분비생산용 발현벡터, 상기 발현벡터로 형질전환된 세포주 및 상기 세포주를 배양하여 인간 인터페론 알파를 분비 생산하는 방법에 관한 것으로, 본 발명의 방법을 이용하면 아미노 말단에 추가의 메티오닌이 첨가되지 않고 활성화된 가용화 형태의 인간 인터페론 알파를 대장균 페리플라즘 내로 대량으로 분비 생산할 수 있다.

2. 发明授权

KR100356140B1 인간 과립구 콜로니 자극인자 변이체 및 이의 생산 방법 有权
标题翻译：改良人粒细胞集落刺激因子及其制备方法
公开(公告)号：KR100356140B1
公开(公告)日：2002-10-19
申请号：KR1019990027418
申请日：1999-07-08
申请人： 한미사이언스 주식회사
发明人： 권세창 , 정성엽 , 최기두 , 김차순 , 최재도 , 이관순
IPC分类号： C12N15/70 , C12N15/12
CPC分类号： C07K14/535 , C07K2319/034 , C07K2319/75 , C12N15/625 , C12N15/70
摘要： 본발명은인간과립구콜로니자극인자(human granulocyte-colony stimulating factor; hG-CSF) 변이체, 이를코드하는 DNA, 이를포함하는발현벡터, 및상기발현벡터로형질전환된세포주에관한것이다. 또한, 본발명은 hG-CSF 변이체를코딩하는유전자및 그의 5'-말단에연결된분비서열유전자를포함하는발현벡터로대장균을형질전환시키고, 형질전환된대장균을적절한조건하에배양함으로써아미노말단에추가의메티오닌이첨가되지않은 hG-CSF 변이체를대장균페리플라즘내로분비생산하는방법에관한것이다.

3. 发明公开

KR1020010073658A 인간 인터페론 알파의 발현 분비벡터 및 이를 이용한인터페론 알파의 생산 방법 有权
标题翻译：表达人体干扰素的表达载体和使用其的人间干细胞生产方法
公开(公告)号：KR1020010073658A
公开(公告)日：2001-08-01
申请号：KR1020000002434
申请日：2000-01-19
申请人： 한미사이언스 주식회사
发明人： 권세창 , 정성엽 , 최기두 , 김차순 , 배성민 , 이관순
IPC分类号： C12N15/21
CPC分类号： C07K14/245 , C07K14/56 , C07K2319/02 , C12N15/70
摘要： PURPOSE: The expression vectors expressing human interferon alpha and a method for producing human interferon alpha using the same vectors are provided, thereby the interferon alpha having the same amino acid sequence as that of natural interferon alpha can be mass produced using E. coli. CONSTITUTION: The expression vector contains the gene encoding the modified thermostable enterotoxin II sequence, in which at least one of amino acids among 4th, 20th and 22th amino acids of normal thermostable enterotoxin II sequence represented by the sequence ID. No. 3 is substituted by other amino acids such as threonine, glutamine or valine, and the human interferon alpha gene linked at 3'-terminal of the modified thermostable enterotoxin II sequence. The human interferon alpha is produced by incubating microorganisms transformed with the expression vectors under the appropriate conditions.
摘要翻译：目的：提供表达人干扰素α的表达载体和使用相同载体产生人干扰素α的方法，由此可以使用大肠杆菌大量生产具有与天然干扰素α相同的氨基酸序列的干扰素α。构成：表达载体含有编码经修饰的耐热肠毒素II序列的基因，其中由序列ID表示的正常耐热性肠毒素II序列的第4位，第20位和第22位氨基酸中的至少一个氨基酸。 3号被其他氨基酸如苏氨酸，谷氨酰胺或缬氨酸取代，而人干扰素α基因在修饰的热稳定性肠毒素II序列的3'-末端连接。通过在合适的条件下温育用表达载体转化的微生物来产生人类干扰素α。

4. 发明公开

KR1020010009171A 인간 과립구 콜로니 자극인자 변이체 및 이의 생산 방법 有权
标题翻译：人造粒菌群刺激因子变异及其生产方法
公开(公告)号：KR1020010009171A
公开(公告)日：2001-02-05
申请号：KR1019990027418
申请日：1999-07-08
申请人： 한미사이언스 주식회사
发明人： 권세창 , 정성엽 , 최기두 , 김차순 , 최재도 , 이관순
IPC分类号： C12N15/70 , C12N15/12
CPC分类号： C07K14/535 , C07K2319/034 , C07K2319/75 , C12N15/625 , C12N15/70
摘要： PURPOSE: Provided are a human granulocyte-colony stimulating factor (hG-CSF) variant, a DNA encoding it, an expression vector comprising the DNA and a cell line transformed with the expression vector. The hG-CSF variant has high expression efficiencies, in case of expressing with a secretory sequence, it has an excellent secretion rate. Also, methionine free hG-CSF at its amino terminal or the variant thereof can be produced in large scale by secreting into periplasm . CONSTITUTION: The hG-CSF variant has one or more amino acids that is substituent of 1st, 2nd, 3rd and 17th amino acids of nature hG-CSF having an amino acid sequence of SEQ ID NO : 2 substituted, with other amino acids. Preferably, the variant has independently Thr1 and Cys17 substituted with Ser, Pro2 substituted with Met and Leu3 substituted with Val. The producing method of the hG-CSF variant comprises the steps of : transforming E. coli with an expression vector comprising a gene encoding hG-CSF or the variant thereof and a secretory sequence gene linked to 5'-end thereof; culturing the transformed E. coli under suitable condition to secrete the methionine free hG-CSF variant into the periplasm. The secretory sequence gene is E. coli-derived thermal-stable enterotoxin secretory sequence.
摘要翻译：目的：提供人粒细胞集落刺激因子（hG-CSF）变体，编码它的DNA，包含DNA和表达载体转化的细胞系的表达载体。 hG-CSF变体具有高表达效率，在用分泌序列表达的情况下，具有优异的分泌速率。此外，其氨基末端的甲硫氨酸游离hG-CSF或其变体可以通过分泌到周质中而大量生产。构成：hG-CSF变体具有一个或多个氨基酸，其是具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列与其它氨基酸取代的天然hG-CSF的第1，第2，第3和第17氨基酸的取代基。优选地，所述变体独立地被Ser1取代的Thr1和Cys17，被Met取代的Pro2和被Val取代的Leu3。 hG-CSF变体的制备方法包括以下步骤：用包含编码hG-CSF或其变体的基因的表达载体和与其5'末端连接的分泌序列基因转化大肠杆菌; 在合适的条件下培养转化的大肠杆菌以将无甲硫氨酸的hG-CSF变体分泌到周质中。分泌序列基因是大肠杆菌来源的热稳定肠毒素分泌序列。

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