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1. 发明授权

KR101217718B1 신규한 다중 클로닝 부위 서열 및 이를 포함하는 발현 벡터 失效
标题翻译：新的多个克隆站点和包含其的表达向量
公开(公告)号：KR101217718B1
公开(公告)日：2013-01-02
申请号：KR1020110137706
申请日：2011-12-19
申请人： 한국기초과학지원연구원
发明人： 이지원 , 김수현 , 김승일 , 김수연 , 신지영 , 황정미
IPC分类号： C12N15/11 , C12N15/85 , C12N5/10
摘要： PURPOSE: A novel multi-cloning site sequence(MCS) and an expression vector containing the same are provided to effectively prepare a library using a full length gene. CONSTITUTION: A polynucleotide encoding a novel multi-cloning site has a base of sequence number 1. A recombinant expression vector contains polynucleotide of sequence number 1. The expression vector additionally contains a promoter and fluorescent protein which is operatively linked to the promoter. The expression vector has a base of sequence number 2 or 3. Cells are transformed with the expression vector. The transformed cells are CHO-k1(ATCC CCL-61, Cricetulus griseus, hamster, Chinese), HEK293(ATCC CRL-1573, Homo sapiens, human), HeLa(ATCC CCL-2, Homo sapiens, human), SH-SY5Y(ATCC CRL-2266, Homo sapiens, human), Swiss 3T3(ATCC CCL-92, Mus musculus, mouse), 3T3-L1(ATCC CL-173, Mus musculus, mouse), NIH/3T3(ATCC CRL-1658, Mus musculus, mouse), L-929(ATCC CCL-1, Mus musculus, mouse), 3T3-L1(ATCC CL-173, Mus musculus, mouse), NIH/3T3(ATCC CRL-1658, Mus musculus, mouse), L-929(ATCC CCL-1, Mus musculus, mouse), Rat2(ATCC CRL-1764, Rattus norvegicus, rat), RBL-2H3(ATCC CRL-2256, Rattus norvegicus, rat), and MDCK(ATCC CCL-34, Canis familiaris).
摘要翻译：目的：提供新的多克隆位点序列（MCS）和含有该多克隆位点序列的表达载体，以有效地制备使用全长基因的文库。构成：编码新的多克隆位点的多核苷酸具有序列号1的碱基。重组表达载体含有序列号1的多核苷酸。表达载体另外含有与启动子有效连接的启动子和荧光蛋白。表达载体具有序列号2或3的碱基。用表达载体转化细胞。经转化的细胞是CHO-k1（ATCC CCL-61，灰，us，仓鼠，中文），HEK293（ATCC CRL-1573，智人，人），HeLa（ATCC CCL-2，智人，人），SH-SY5Y （ATCC CRL-2266，智人，人），Swiss 3T3（ATCC CCL-92，Mus musculus，小鼠），3T3-L1（ATCC CL-173，Mus musculus，小鼠），NIH / 3T3（ATCC CRL-1658，小鼠肌肉，小鼠），L-929（ATCC CCL-1，Mus musculus，小鼠），3T3-L1（ATCC CL-173，Mus musculus，小鼠），NIH / 3T3（ATCC CRL-1658，Mus musculus，，L-929（ATCC CCL-1，Mus musculus，小鼠），Rat2（ATCC CRL-1764，Rattus norvegicus，大鼠），RBL-2H3（ATCC CRL-2256，Rattus norvegicus，大鼠）和MDCK（ATCC CCL- 34，Canis familiaris）。

2. 发明授权

KR101212029B1 화합물 결합단백질 검출 방법 有权
标题翻译：检测分子化合物与其结合蛋白质之间相互作用的方法
公开(公告)号：KR101212029B1
公开(公告)日：2012-12-13
申请号：KR1020110137868
申请日：2011-12-20
申请人： 한국기초과학지원연구원
发明人： 이지원 , 김수현 , 김승일 , 황정미 , 이경복
IPC分类号： C12N15/63 , C12N9/12 , C12N5/10 , G01N33/52
CPC分类号： G01N33/5035 , C12N15/1055 , G01N33/5008 , G01N33/5011 , G01N33/581 , G01N33/582 , G01N2333/90666 , G01N2333/912 , G01N2500/02 , G01N2500/10
摘要： PURPOSE: A method and a kit for screening a target are provided to effectively detect interaction between bio materials. CONSTITUTION: A method for screening a target material which interacts with an interest material comprises: a step of preparing cells which express a first component containing a moving module, a first marker, and a first medium and a third component containing the target material and a second marker; a step of injecting a second component containing the interest material and a second medium which binds to the first medium; and a step of interacting the target material and interest material. The first and second media are streptavidin and biotin, respectively. The kit for screening the target material contains the cells and the second component.
摘要翻译：目的：提供用于筛选靶标的方法和试剂盒，以有效检测生物材料之间的相互作用。构成：用于筛选与感兴趣材料相互作用的靶材料的方法包括：制备表达含有移动模块的第一组分的细胞的步骤，第一标记以及含有靶物质的第一培养基和第三组分，第二标记注入包含感兴趣材料的第二组分和与第一介质结合的第二介质的步骤; 以及与目标材料和兴趣材料相互作用的步骤。第一和第二种培养基分别是链霉亲和素和生物素。用于筛选靶材料的试剂盒包含细胞和第二组分。

3. 发明授权

KR100948767B1 생체 고분자 물질의 상호작용 검출 방법 有权
标题翻译：用于检测两种和更多生物大分子之间相互作用的方法
公开(公告)号：KR100948767B1
公开(公告)日：2010-03-23
申请号：KR1020080112354
申请日：2008-11-12
申请人： 한국기초과학지원연구원
发明人： 이지원 , 김수현
IPC分类号： G01N33/53 , G01N33/48
CPC分类号： G01N33/5035 , C07K2319/01 , C07K2319/60 , G01N33/542 , G01N33/557 , G01N33/582 , G01N33/6845 , G01N33/5044 , G01N2500/02
摘要： PURPOSE: A method for detecting interaction of novel biopolymers is provided to enhance accuracy and perform novel real time non-antibody analysis. CONSTITUTION: A method for detecting interaction between a bait and prey comprises: a step of preparing cells having a first component and second component; a step of detecting intracellular distribution of the first component and second component and a step of treating a signal substance. The first component contains a first marker, bait and mobile module having protein kinase C or its C1 domain. The second component contains a prey and second marker. A mutant containing protein kinase C and its C1 domain comprises an amino acid sequence of sequence number 1, 3, 5, or 7. The treatment using the signal substance is performed with 50nM-5μM of PMA(Phorbol 12-myristate 13-acetate).
摘要翻译：目的：提供一种检测新生物聚合物相互作用的方法，以提高准确性并进行新的实时非抗体分析。构成：用于检测诱饵和猎物之间的相互作用的方法包括：制备具有第一组分和第二组分的细胞的步骤; 检测第一成分和第二成分的细胞内分布的步骤和处理信号物质的步骤。第一组分含有具有蛋白激酶C或其C1结构域的第一标记物，诱饵和移动模块。第二个组件包含一个猎物和第二个标记。含有蛋白激酶C及其C1结构域的突变体包含序列号1,3,5或7的氨基酸序列。使用50nM-5μMPMA（佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯）进行处理，。

4. 发明公开

KR1020110118231A 형광표지 유전자 라이브러리를 이용한 결합단백질 스크리닝 방법 无效
标题翻译：使用荧光蛋白标记的SINGLETON基因库筛选未知结合合作伙伴的方法
公开(公告)号：KR1020110118231A
公开(公告)日：2011-10-31
申请号：KR1020100037714
申请日：2010-04-23
申请人： 한국기초과학지원연구원
发明人： 이지원 , 김수현 , 황정미 , 김건화
IPC分类号： C12Q1/02 , G01N33/52 , G01N33/58 , C12N15/63
摘要： 본 발명은 형광표지 유전자 라이브러리를 이용한 새로운 결합단백질 스크리닝 방법에 관한 것으로서 보다 상세하게는 (a) (i) 목적물질(bait), 제1표지물질 및 이동모듈을 포함하는 제1구성물 및 (ii) 오폼(ORFeome) 라이브러리에서 선택된 표적물질(prey) 및 제2표지물질을 포함하는 제2구성물이 공동으로 발현하는 세포를 제조하는 단계; (b) 표적물질과 목적물질간 상호작용이 이루어지도록 하는 단계; 및 (c) 제1구성물 및 제2구성물의 세포내 분포를 검출하여 표적물질과 목적물질간 상호작용을 확인하는 단계를 포함하는 목적물질(bait)과 상호작용하는 표적물질(prey)의 스크리닝 방법 등에 관한 것이다. 본 발명은 세포내에서 일어나는 물질결합(binding) 및 상호작용(interaction)을 살아있는 세포에서 실시간으로 검출하여 목적물질과 결합 또는 상호작용하는 미지의 표적물질을 스크리닝 방법을 제공한다. 본 발명의 방법은 현재까지 알려진 생체물질 상호작용 탐색 방법들이 가지는 부정확성 및 복잡성 등의 단점을 극복하였고, 구성물 모두에 표지를 함으로써 정확도를 더욱 높일 수 있을 뿐 아니라 고속/대용량으로 결합여부를 판별할 수 있어 종래의 분석기술과 차별화되는 새로운 고속/대용량 결합단백질 검출 방법을 제공하는 효과가 있다.

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