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1. 发明公开

KR1020030036580A 신규한 옥시게네이즈 유전자를 내포시킨 재조합 대장균을이용한 인디고 및 인디루빈의 생물학적 제조방법 有权
标题翻译：生物学方法生产靛蓝和靛蓝由重组体大肠杆菌共培养新型氧化亚基
公开(公告)号：KR1020030036580A
公开(公告)日：2003-05-09
申请号：KR1020030025761
申请日：2003-04-23
申请人： 학교법인조선대학교 , 김시욱
发明人： 김시욱 , 최학선 , 김진권 , 김용철 , 김재일
IPC分类号： C12N15/53
CPC分类号： C12P1/04 , C12N15/70 , C12P17/165
摘要： PURPOSE: Biological methods for producing indigo and indirubin by a recombinant E. coli harboring a novel oxygenase gene are provided, in which indigo and indirubin can be produced by a microorganism without using organic solvents causing environmental pollution. CONSTITUTION: The oxygenase gene isolated from Methylophaga thalassica SK1(KCTC-10323BP) has the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1. The oxygenase expressed by the oxygenase gene of SEQ ID NO: 1 has the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2. The method for producing indigo and indirubin comprises isolating and amplifying the oxygenase gene of SEQ ID NO: 1; cloning the oxygenase gene into a vector; transforming E. coli with the recombinant vector containing the oxygenase gene; and culturing the transformed E. coli in a medium containing tryptophane, so that indol derived from tryptophane is converted indol oxide by the oxygenase, wherein indigo is produced by dimerization of indol oxide(indoxyl) and indirubin is produced by combination of indoxyl with isatin; and the recombinant E. coli is cultured in a medium containing 5 to 15 mM of tryptophane, 0.5 to 1.5% of NaCl and 0.2 to 0.8% of yeast extract under the aeration rate of 0.5 to 2.0 vvm.
摘要翻译：目的：提供含有新型加氧酶基因的重组大肠杆菌生产靛蓝和靛玉红的生物学方法，其中靛蓝和靛玉红可以由微生物生产而不使用引起环境污染的有机溶剂。构成：从Methylophaga thalassica SK1（KCTC-10323BP）分离的加氧酶基因具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列。由SEQ ID NO：1的加氧酶基因表达的加氧酶具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列制备靛蓝和靛玉红的方法包括分离并扩增SEQ ID NO：1的加氧酶基因; 将加氧酶基因克隆到载体中; 用含有加氧酶基因的重组载体转化大肠杆菌; 并在含有色氨酸的培养基中培养转化的大肠杆菌，使得由色氨酸衍生的吲哚通过加氧酶转化为吲哚氧化物，其中靛蓝通过吲哚氧化物（吲哚氧基）的二聚产生，靛玉红是通过吲哚氧基与靛红的组合产生的; 并在0.5〜2.0vvm的通气速度下，将含有5〜15mM色氨酸，0.5〜1.5％NaCl，0.2〜0.8％酵母提取物的培养基重组。

2. 发明授权

KR100494764B1 신규한 옥시게네이즈 유전자를 내포시킨 재조합 대장균을이용한 인디고 및 인디루빈의 생물학적 제조방법 有权
标题翻译：使用含有新型加氧酶基因的重组大肠杆菌生产靛蓝和靛玉红的方法
公开(公告)号：KR100494764B1
公开(公告)日：2005-06-10
申请号：KR1020030025761
申请日：2003-04-23
申请人： 학교법인조선대학교 , 김시욱
发明人： 김시욱 , 최학선 , 김진권 , 김용철 , 김재일
IPC分类号： C12N15/53
摘要： 본 발명은 메틸로파가 탈라시카(
Methylophaga thalassica )
SK1(기탁번호 : KCTC-10323BP)에서 분리된 서열번호 1의 DNA 염기서열을 지니는 옥시게네이즈 유전자 및 상기 옥시게네이즈 유전자에 의해 발현되는 서열번호 2의 아미노산 서열을 지니는 옥시게네이즈 효소를 제공하는 것이다. 또한 본 발명은 상기 서열번호 1의 옥시게네이즈 유전자를 분리 증폭시킨후 벡터에 삽입하고 대장균에 삽입 형질전환시킨 재조합 대장균을 트립토판을 함유하는 배지에서 배양하여 트립토판에서 유래된 인돌을 옥시게네이즈 활성을 이용하여 인돌옥사이드로 전환시켜 인디고 및/또는 인디루빈으로 제조하는 방법을 제공하는 것이다.

3. 发明授权

KR100588803B1 암세포주에 항암활성을 지닌 인디루빈 유도체 有权
标题翻译：对人癌细胞株具有抗癌性的靛玉红衍生物
公开(公告)号：KR100588803B1
公开(公告)日：2006-06-12
申请号：KR1020040005114
申请日：2004-01-27
申请人： 학교법인조선대학교
发明人： 김용철 , 김시욱 , 김태성 , 이상국 , 김재일 , 문명주
IPC分类号： A61K31/403 , A61P35/00
CPC分类号： A61K31/403 , C07D209/36 , C07D209/40
摘要： 본 발명은 인간 암세포주에 항암활성 및 백혈병 세포주에 분화유도를 통한 세포사멸 효능을 지닌 인디루빈 유도체에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 CDK(Cyclin-dependent kinase) 저해제로 알려져 있는 인디루빈의 유도체를 합성하고 인간 암세포주의 성장억제 저해 활성 및 백혈병 세포주에 분화유도를 통한 세포사멸 효능 측정을 통해 선택적으로 백혈병 세포주 및 각종 암세포주에 암세포 저해 기능이 탁월한 신규한 인디루빈 화합물을 개발한 것이다.
항암활성, 인디루빈, CDK 저해제, 백혈병 세포주, 폐암 세포주

4. 发明公开

KR1020050077173A 암세포주에 항암활성을 지닌 인디루빈 유도체 有权
标题翻译：具有反对人类癌细胞系抗原性质的靛蓝衍生物
公开(公告)号：KR1020050077173A
公开(公告)日：2005-08-01
申请号：KR1020040005114
申请日：2004-01-27
申请人： 학교법인조선대학교
发明人： 김용철 , 김시욱 , 김태성 , 이상국 , 김재일 , 문명주
IPC分类号： A61K31/403 , A61P35/00
CPC分类号： A61K31/403 , C07D209/36 , C07D209/40
摘要： 본 발명은 인간 암세포주에 항암활성 및 백혈병 세포주에 분화유도를 통한 세포사멸 효능을 지닌 인디루빈 유도체에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 CDK(Cyclin-dependent kinase) 저해제로 알려져 있는 인디루빈의 유도체를 합성하고 인간 암세포주의 성장억제 저해 활성 및 백혈병 세포주에 분화유도를 통한 세포사멸 효능 측정을 통해 선택적으로 백혈병 세포주 및 각종 암세포주에 암세포 저해 기능이 탁월한 신규한 인디루빈 화합물을 개발한 것이다.

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