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    • 1. 发明专利
    • ボツリヌス毒素の製造方法
    • JP2018533977A
    • 2018-11-22
    • JP2018540360
    • 2016-11-23
    • デウォン・カンパニー・リミテッド
    • キム,ギョン−ユンキム,チョンセイキム,ミュンセオブスル,ヘ−ヨン
    • C07K14/33C07K1/14C07K1/18C07K1/30C07K1/34C07K1/36C12P1/04
    • C12N9/52B01D15/362B01D15/363B01D61/145B01D61/147B01D61/58B01D2315/16C07K14/33C12Y304/24069
    • 本発明は、動物由来成分を含まない(Animal Product Free、APF)工程を用いたボツリヌス毒素の製造方法に関し、より詳細には、ボツリヌス毒素の生産菌株培養液を酸で処理して酸沈殿させるステップと、ボツリヌス毒素を含む沈殿物に緩衝液を添加した後、深層濾過(depth filtration、DF)、精密濾過(microfiltration、MF)、限外濾過(ultrafiltration、UF)、滅菌濾過(sterile filtration)、メンブレンクロマトグラフィー(membrane chromatography、MC)、および遠心分離(centrifugation)からなる群から選択される1つ以上の方法により浄化(clarification)するステップと、浄化されたボツリヌス毒素を含む溶液に対して、UFダイアフィルトレーション(UF diafiltration)、硫酸アンモニウム沈殿、または塩酸沈殿を行った後、前記UFダイアフィルトレーションの透析残留物(retentate)を緩衝液に希釈するか、硫酸アンモニウム沈殿または塩酸沈殿の沈殿物を緩衝液に溶解させるステップと、希釈された透析残留物、硫酸アンモニウム沈殿物の溶解物、または塩酸沈殿物の溶解物に対して、陰イオン交換クロマトグラフィー(Anion exchange chromatography:AEX)を用いてボツリヌス毒素を精製するステップと、を含むボツリヌス毒素の製造方法に関する。 本発明によるボツリヌス毒素の製造方法は、動物由来成分の流入が根本的に遮断され、伝染性海綿状脳症(Transmissible Spongiform Encephalopathy:TSE)などのような感染を予防することができる。また、本発明の簡単な工程により高純度のボツリヌス毒素を製造することができるため、非常に経済的で且つ効率的であり、従来の方法により生産されたボツリヌス毒素に比べて純度が高く、局所作用力が増加するため、副作用として現われ得るボツリヌス毒素の全身循環性が低くなって安全性が増加する利点がある。したがって、神経筋肉障害、シワ除去剤、強直性片麻痺および脳性麻痺の治療などに多様に用いられることができる。