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    • 45. 发明公开
    • Verfahren zur Reinigung von Plasminogen-Aktivator-Inhibitor 2 (PAI-2)
    • Verfahren zur Reinigung von Plasminogen-Aktivator-Inhibitor 2(PAI-2)。
    • EP0418647A1
    • 1991-03-27
    • EP90117038.1
    • 1990-09-05
    • BEHRINGWERKE Aktiengesellschaft
    • Radtke, Klaus-Peter, Dr.Heimburger, Norbert, Prof. Dr.Wenz, Karlheinz
    • C07K3/28
    • C07K14/8132
    • Es wird ein Verfahren zur Reinigung von Plasminogen-­Aktivator-Inhibitor 2 (PAI-2), wobei Verunreinigungen mit einer Acridin- oder Chinolinbase ausgefällt werden, beschrieben.
    • 纤溶酶原激活物抑制剂2(I)的纯化包括(1)预孵育(I) - 接头。 SOLN。 与用于分解二硫桥的试剂(A)(2)用水溶性吖啶或喹啉碱(优先2-乙氧基-6,9-二氨基吖啶乳酸酯(II))处理,使得ppte。 形成包含很少或没有(I),(3)sepn。 的这个ppte。 和(4)从上清液中回收(I)并选择。 通过已知方法进一步纯化。 (A)是pref。 二硫苏糖醇(DTT) 为10-250(首选100)mM,预孵育为0.25-3(特别是1)小时。 在10-40(优先37℃)。 开始的soln。 是pref。 通过重组DNA方法制备胎盘提取物或含有(I)的化合物,并且用DTT孵育后,用0.2-2g / g蛋白质溶液处理。 在pH 5.5-8.5。 所得上清液(其含有(I)的85-90%,但仅占总蛋白的5-8%)可以用5%NaCl处理以盐析出(II),然后进行pptn。 与(NH4)SO4(a)在30%饱和。 以除去更多的杂质和(b)在80%的饱和度。 恢复(I)。 (I)在治疗上用于调节纤维蛋白溶解系统。 与已知的纯化方法(I)(涉及8个阶段)相比,该方法更简单,适用于大规模操作。 基地pptes。 杂质,而(I)保留在溶剂中。
    • 47. 发明公开
    • Enzymatic purification process
    • Enzymatisches Reinigungsverfahren。
    • EP0370163A1
    • 1990-05-30
    • EP89109212.4
    • 1989-05-23
    • Bayer Corporation
    • Dove, George B.Mitra, Gautam
    • C07K3/28C12P21/00
    • C07K1/36
    • Controlled enzymatic treatment may be used to selectively degrade undesirable contaminants to a size or charge range which can be more readily removed by subsequent separation steps. Treatment is especially useful for purifying rDNA or monoclonal antibody culture products by using nuclease enzyme treatment to degrade undesirable residual nucleic acids to a molecular size or charge range sufficiently different from the product to be purified so that this difference can be exploited in a subsequent purification step (e.g. precipitation, size exclusion chromatography or ion exchange chromatography).
    • 可以使用受控的酶处理来选择性地将不期望的污染物降解到尺寸或电荷范围,这可以通过后续的分离步骤更容易地去除。 通过使用核酸酶处理将不需要的残留核酸降解至与待纯化产物完全不同的分子大小或电荷范围,从而可以在随后的纯化步骤中利用这种差异,治疗对于纯化rDNA或单克隆抗体培养产物是特别有用的 (例如沉淀,尺寸排阻层析或离子交换层析)。