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    • 3. 发明专利
    • Producción de ARN mediante unas levaduras con partículas pseudovirales recombinantes
    • ES2910993T3
    • 2022-05-17
    • ES18717217
    • 2018-03-21
    • CENTRE NAT RECH SCIENTUNIV ORLEANS
    • PIGEON LUCIERAHMOUNI A RACHIDPICHON-RABENANDRASANA HARIVONYMIDOUX PATRICK
    • C12N7/04C12N15/113C12N15/86
    • Procedimiento de producción recombinante de ARN mensajero (ARNm) o de ARN largo no-codificante (ARNlnc), que comprende: - el hecho de cultivar unas células de levadura, que han sido modificadas genéticamente para producir unas partículas pseudovirales recombinantes que comprenden dicho ARNm o ARNlnc, y - el hecho de recoger el ARNm o ARNlnc que está contenido en las partículas pseudovirales así formadas, en el que las células de levadura son unas células de una levadura que está naturalmente desprovista de retrotransposón Ty, o que ha sido modificada genéticamente para no producir ningún retrosoma T, en el que las modificaciones genéticas aportadas a estas células de levadura para que produzcan dichas partículas pseudovirales comprenden la transfección de estas células de levadura mediante i. un ácido nucleico que comprende una primera secuencia nucleotídica, y ii. un ácido nucleico que comprende una segunda secuencia nucleotídica, en el que: - el ácido nucleico de i. y el ácido nucleico de ii. son una sola y misma molécula, o bien dos moléculas distintas o separadas, - la primera secuencia nucleotídica comprende una secuencia de ADN que codifica la expresión de la proteína Gag de un retrotransposón Ty de levadura, - la segunda secuencia nucleotídica comprende una secuencia de ADN cuyo transcrito ARN es: a. la secuencia de dicho ARNm o ARNlnc, enlazada a b. una secuencia de direccionamiento que comprende un fragmento de la secuencia de ARN cuya traducción en aminoácidos es la secuencia de dicha proteína Gag de retrotransposón Ty de levadura, siendo este fragmento de por lo menos 150 nucleótidos y no comprende el codón de inicio de traducción de esta secuencia de ARN, y no presentando la secuencia de ADN de esta segunda secuencia nucleotídica ningún marco de lectura cuyo primer codón sería el codón ATG, - el ácido nucleico de ii. no comprende ninguna secuencia de ADN cuyo transcrito ARN sería la secuencia de ARN completa de dicha proteína Gag de retrotransposón Ty de levadura, - la proteína Gag de retrotransposón Ty de levadura es una proteína Gag de retrotransposón Ty1, Ty2 o Ty3 de levadura, y la secuencia de esta proteína Gag es la secuencia de SEC ID nº: 3 o una secuencia que es idéntica en por lo menos un 90% a la secuencia de SEC ID nº: 3, y - el ácido nucleico de i. y el ácido nucleico de ii. no comprenden ninguna secuencia que codifica la transcriptasa inversa de un retrotransposón Ty1 de levadura, codificando así el ácido nucleico de i. y el ácido nucleico de ii. la formación, en dichas células de levadura, de partículas pseudovirales que están formadas por la proteína Gag traducida a partir de la primera secuencia nucleotídica, y que encapsulan dicho ARNm o ARNlnc transcrito a partir de la segunda secuencia nucleotídica.