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    • 8. 发明专利
    • Métodos para purificar anticuerpos
    • ES2767135T3
    • 2020-06-16
    • ES12842689
    • 2012-10-19
    • NOVIMMUNE SA
    • ELSON GREGFOUQUE NICOLASDEPOISIER JEAN-FRANCOISFISCHER NICOLASMAGISTRELLI GIOVANNI
    • C07K16/24C07K16/00C07K16/28C07K16/46
    • Un método para purificar un anticuerpo biespecífico que consiste en dos copias de un polipéptido de cadena pesada simple y una primera cadena ligera que comprende una región constante kappa y una segunda cadena ligera que comprende una región constante lambda, el método comprende las etapas de: (a) proporcionar una composición de anticuerpos mixtos que comprende uno o más de los anticuerpos biespecíficos que consisten en dos copias de un polipéptido de cadena pesada simple y una primera cadena ligera que comprende una región constante kappa y una segunda cadena ligera que comprende una región constante lambda (Ac biespecífico); uno o más anticuerpos monoclonales monoespecíficos que tienen dos cadenas ligeras lambda o porciones de las mismas (λ-AcM); y uno o más anticuerpos monoclonales monoespecíficos que tienen dos cadenas ligeras kappa o porciones de las mismas (κ-AcM); (b) proporcionar un medio de separación que tiene una afinidad específica por una región constante de cadena ligera kappa o una región constante de cadena ligera lambda, en donde el medio de separación se acopla a un ligando que tiene una alta especificidad y afinidad por una región constante de cadena ligera kappa o una región constante de cadena ligera lambda, y en donde el ligando es un anticuerpo monoclonal anti-lambda o un anticuerpo monoclonal anti-kappa; (c) poner en contacto los medios de separación con la composición de anticuerpos mixtos en condiciones que permitan la unión diferencial al medio de separación por el Ac biespecífico en comparación con la unión al medio de separación por las regiones constantes de cadena ligera kappa del κ-AcM o por las regiones constantes de cadena ligera lambda del λ-AcM; y (d) eluir los anticuerpos del medio de separación en condiciones que permitan el desprendimiento preferencial del Ac biespecífico en comparación con el desprendimiento de las regiones constantes de cadena ligera kappa del κ-AcM o el desprendimiento de las regiones constantes de cadena ligera lambda del λ-AcM; en donde las condiciones de unión y/o elución se seleccionan entre uno de: una variación por etapas del nivel de pH, una variación por etapas de la concentración de sal inorgánica, una variación por etapas de la concentración de un aminoácido en la composición de anticuerpos mixtos, o la inclusión de uno o más agentes desnaturalizantes.