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    • 10. 发明专利
    • ARN pequeños en fase
    • ES2655700T3
    • 2018-02-21
    • ES07837683
    • 2007-08-31
    • MONSANTO TECHNOLOGY LLC
    • ALLEN EDWARDSGUO LIANGHEISEL SARA EIVASHUTA SERGEY IZHANG YUANJI I
    • C12N15/11A01H5/00C12N15/82
    • Una construcción de ADN recombinante para la supresión génica que comprende un promotor funcional en células vegetales, operativamente unido a ADN recombinante que codifica un transcrito precursor de ARN pequeño en fase sintético y que comprende una secuencia de nucleótidos de una secuencia molde de ARN pequeño en fase, en la que dicho promotor es heterólogo de dicho ADN recombinante y en la que dicha secuencia de molde de ARN pequeño en fase comprende una secuencia de nucleótidos seleccionada de la SEQ ID NO.8, SEQ ID NO.9, SEQ ID NO. 17, SEQ ID NO. 33, SEQ ID NO. 69, y la secuencia de ADN que codifica la SEQ ID NO. 34, en la que dicho transcrito precursor de ARN pequeño en fase sintético preserva la estructura secundaria del transcrito de dicha secuencia molde de ARN pequeño en fase, en la que dicha estructura secundaria comprende ARN hibridado que forma una estructura plegada que incluye dos brazos antiparalelos de cadena sencilla, en la que un brazo es sustancial, pero no perfectamente, complementario con el otro brazo, en la que el emparejamiento de bases entre los dos brazos de la estructura replegada da como resultado un ARN de doble cadena sustancialmente pero no perfectamente que incluye apareamientos erróneos, en el que dicho ARN hibridado comprende al menos tres ARN bicatenarios pequeños en fase contiguos, en la que cada ARN bicatenario pequeño en fase comprende dos segmentos de ARN antiparalelo de aproximadamente 20 a aproximadamente 27 nucleótidos, cada uno con al menos un apareamiento erróneo entre dichos segmentos por lo que dichos apareamientos erróneos se distribuyen a lo largo de dicho ARN hibridado, y en la que en dicho transcrito de precursor de ARN pequeño en fase sintético, al menos uno de los segmentos de ARN se modifica para suprimir al menos un gen diana reemplazando los nucleótidos de un segmento de ARN de al menos uno de dichos ARN de doble cadena pequeños en fase en dicha secuencia de molde de ARN pequeño en fase por nucleótidos correspondientes a dicho al menos un gen diana, en la que dicho al menos un gen diana se selecciona de entre múltiples segmentos no consecutivos de un gen diana, múltiples alelos de un gen diana o múltiples genes diana de una o más especies, en la que al menos una de dichas dos cadenas antiparalelas de dicho ARN bicatenario pequeño en fase es aproximadamente un 95 % complementaria de dicho al menos un gen diana, y en la que dicho promotor es heterólogo de dicho ADN recombinante.