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1. 发明申请

WO2009115495A1 METHODE ZUR STEIGERUNG DER REKLONIERUNGSEFFIZIENZ 审中-公开
标题翻译：法提高再克隆效率
公开(公告)号：WO2009115495A1
公开(公告)日：2009-09-24
申请号：PCT/EP2009/053091
申请日：2009-03-16
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , FIEDER, Jürgen , FLORIN, Lore , KAUFMANN, Hitto , KRIEG, Thomas , WULF, Melanie
发明人： FIEDER, Jürgen , FLORIN, Lore , KAUFMANN, Hitto , KRIEG, Thomas , WULF, Melanie
IPC分类号： C12N5/06
CPC分类号： C12N5/0037 , C12N2500/84 , C12N2501/105 , C12N2502/243 , C12N2510/02
摘要： Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf das Gebiet der Zellkulturtechnologie und betrifft Verfahren zur Vermehrung/Klonierung von Zeilen, vorzugsweise von Zeillinien, die für die Produktion von Biopharmazeutika von Bedeutung sind. Ferner betrifft die Erfindung Verfahren zur Herstellung von Proteinen unter Verwendung von Zellen, die mittels Einzelzeilablage gewonnen und vermehrt wurden sowie Zusammensetzungen, die eine Vermehrung von Einzelzellen ermöglichen. Durch die Verwendung von IGF insbesondere in Verbindung mit HSA im Kultivierungsmedium nach der Reklonierung kann die Reklonierungseffizienz und dadurch die Quantität der erhaltenen Klone signifikant gesteigert werden.
摘要翻译：本发明涉及细胞培养技术的领域，并且涉及用于复制的行/克隆，优选其是用于生物制药生产的重要细胞系。此外，本发明提供用于使用由Einzelzeilablage已恢复和传播，以及允许单个细胞的乘法是关心的组合物的细胞蛋白质的方法。在培养基中特别是在组合使用IGF与HSA再克隆再克隆效率，并且由此得到的克隆的数量后，可以显著增加。

2. 发明申请

WO2004050879A1 EXPRESSIONSVEKTOR, VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG VON HETEROLOGEN GENPRODUKTEN UND SELEKTIONSVERFAHREN FÜR HOCHPRODUZIERENDE REKOMBINANTE ZELLEN 审中-公开
标题翻译：表达载体中，用于生产基因产物和异源选择方法高产重组细胞
公开(公告)号：WO2004050879A1
公开(公告)日：2004-06-17
申请号：PCT/EP2003/013225
申请日：2003-11-25
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , ENENKEL, Barbara , FIEDER, Jürgen , OTTO, Ralf , GRAMMATIKOS, Stefanos
发明人： ENENKEL, Barbara , FIEDER, Jürgen , OTTO, Ralf , GRAMMATIKOS, Stefanos
IPC分类号： C12N15/79
CPC分类号： C12N15/65 , C12N15/69
摘要： Ein Expressionsvektor für eukaryontische Zellen umfassend ein Gen, das für ein Protein von Interesse kodiert, in funktioneller Verknüpfung mit einem Hamster-Ubiquitin/S27a-Promotor und einem Gen, das für ein fluoreszierendes Protein kodiert. Vorzugsweise enthält der Expressionsvektor noch ein amplifizierbares Selektionsmarkergen. Beschrieben werden ferner mit dem Expressionsvektor transfizierte Wirtszellen, vorzugsweise Säugerzellen, Verfahren zur Herstellung heterologer Genprodukte und ein Verfahren zur Selektion hochproduzierender Zellen.
摘要翻译：包含编码可操作地连接到仓鼠泛素/ S27A启动子和荧光蛋白的基因编码的目的蛋白的基因的真核细胞的表达载体。优选地，所述表达载体含有可扩增的选择标记。用表达载体转染的宿主细胞，优选哺乳动物细胞，产生异源基因产物和用于选择高产细胞的方法的方法进行进一步的描述。

3. 发明申请

WO2005019442A3 VERFAHREN ZUR REKLONIERUNG VON PRODUKTIONSZELLEN 审中-公开
公开(公告)号：WO2005019442A3
公开(公告)日：2005-03-03
申请号：PCT/EP2004/009204
申请日：2004-08-17
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , ENENKEL, Barbara , FIEDER, Jürgen , OTTO, Ralf , KRIEG, Thomas
发明人： ENENKEL, Barbara , FIEDER, Jürgen , OTTO, Ralf , KRIEG, Thomas
IPC分类号： C12N5/06
摘要： Neues Verfahren zur Klonselektion und Reklonierung von Säugerzellen, die für die Produktion von Biopharmazeutika von Bedeutung sind, vorzugsweise von Hamster- oder Maus-Myeloma-Zellen, mit hohem Automatisierungsgrad und Durchsatz. Die Erfindung betrifft Verfahren zur Ablage und Vermehrung von Einzellzellklonen der entsprechenden Zellen. Ferner betrifft die Erfindung Verfahren zur Herstellung von Proteinen unter Verwendung von Zellen, die mittels Einzelzellablage gewonnen und vermehrt wurden sowie Zusammensetzungen, die eine Vermehrung von Einzelzellen ermöglichen.

4. 发明申请

WO2004050884A3 NEUE NEOMYCIN-PHOSPHOTRANSFERASE-GENE UND VERFAHREN ZUR SELEKTION VON HOCHPRODUZIERENDEN REKOMBINANTEN ZELLEN 审中-公开
公开(公告)号：WO2004050884A3
公开(公告)日：2004-06-17
申请号：PCT/EP2003/013203
申请日：2003-11-25
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , ENENKEL, Barbara , SAUTTER, Kerstin , OTTO, Ralf , FIEDER, Jürgen , BERGEMANN, Klaus
发明人： ENENKEL, Barbara , SAUTTER, Kerstin , OTTO, Ralf , FIEDER, Jürgen , BERGEMANN, Klaus
IPC分类号： C12N15/85
摘要： Die Erfindung betrifft neue modifizierte Neomycin-Phosphotransferase-Gene, sowie deren Verwendung in einem Selektionsverfahren für hochproduzierende rekombinante Zellen. Ferner betrifft die vorliegende Erfindung Expressionsvektoren, die ein modifiziertes Neomycin-Phosphotransferase-Gen sowie ein Gen von Interesse in funktioneller Verknüpfung mit einem heterologen Promotor enthalten und ein Verfahren zur Herstellung von heterologen Genprodukten unter Verwendung dieser Expressionsvektoren.

5. 发明申请

WO2010029101A1 VERWENDUNG HSA-PRODUZIERENDER ZELLEN 审中-公开
标题翻译：使用HSA的细胞
公开(公告)号：WO2010029101A1
公开(公告)日：2010-03-18
申请号：PCT/EP2009/061679
申请日：2009-09-09
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , FLORIN, Lore , BISCHOFF, Rebecca , FIEDER, Jürgen , KAUFMANN, Hitto , KRIEG, Thomas
发明人： FLORIN, Lore , BISCHOFF, Rebecca , FIEDER, Jürgen , KAUFMANN, Hitto , KRIEG, Thomas
IPC分类号： C12N5/00
CPC分类号： C12N5/0037 , C12N2500/30 , C12N2502/99 , C12N2510/02
摘要： Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf das Gebiet der Zellkulturtechnologie und betrifft Verfahren zur Vermehrung/Klonierung von Zellen, vorzugsweise von Zelllinien, die für die Produktion von Biopharmazeutika von Bedeutung sind. Ferner betrifft die Erfindung Verfahren zur Herstellung von Proteinen unter Verwendung von Zellen, die mittels Einzelzellablage gewonnen und vermehrt wurden sowie Medien-Zusammensetzungen, die eine Vermehrung von Einzelzellen ermöglichen. Durch die Verwendung Albumin-bzw. bevorzugt HSA-produzierender Zellen zum Konditionieren von Medium, als Feederzellen oder als Wirtszellen kann die Reklonierungseffizienz und dadurch die Quantität der erhaltenen Klone signifikant gesteigert werden. Es ist auch eine Kombination dieser Ansätze möglich. Durch die Verwendung von Albumin-bzw. bevorzugt HSA-produzierenden Zellen kann auch in Serum- und/oder Insulin-freiem Medium und in unterschiedlichen Zelltypen eine Steigerung der Reklonierungseffizienz erzielt werden.
摘要翻译：本发明涉及细胞培养技术的领域，并且涉及优选的细胞系用于生产生物药物的重要到用于复制/克隆细胞的方法，。此外，本发明提供了使用其通过单细胞沉积获得并增殖以及允许单个细胞的乘法是有关培养基组合物的细胞蛋白质的方法。通过使用白蛋白或。优选HSA产生细胞用于调节介质作为饲养细胞或作为宿主细胞，再克隆效率，并且由此得到的克隆的数量可以显著增加。这也是这些方法可能的组合。或者通过使用白蛋白。优选HSA产生细胞，以增加再克隆效率，也可以在血清和/或无胰岛素的培养基，在不同的细胞类型来实现的。

6. 发明申请

WO2008031873A1 METHODS OF SELECTING CELL CLONES 审中-公开
标题翻译：选择细胞克隆的方法
公开(公告)号：WO2008031873A1
公开(公告)日：2008-03-20
申请号：PCT/EP2007/059663
申请日：2007-09-13
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , KAUFMANN, Hitto , FIEDER, Jürgen
发明人： KAUFMANN, Hitto , FIEDER, Jürgen
IPC分类号： G01N33/569
CPC分类号： G01N33/6854 , G01N2015/149
摘要： The invention describes novel methods for selecting cell clones which produce high amounts of protein of interest. In one method the amount of protein is measured before the cells are passaged for the first time. In another method a high throughput automated platform is used under sterile environment conditions with class A particle load of less than 100 particles per m3.
摘要翻译：本发明描述了选择产生大量感兴趣蛋白质的细胞克隆的新方法。在一种方法中，在细胞第一次传代之前测量蛋白质的量。在另一种方法中，在无菌环境条件下使用高通量自动化平台，A级颗粒负荷小于100个/ m3。

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