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    • 1. 发明申请
    • 우점종 제거 기술에 기반한 희소 미생물 또는 신규 미생물의 단일 세포 유래 게놈 라이브러리의 제조방법
    • 基于主要物种的稀有微生物或新型微生物的单细胞制备基因组图谱的方法移除技术
    • WO2011002237A2
    • 2011-01-06
    • PCT/KR2010/004273
    • 2010-07-01
    • 한국생명공학연구원송재준최종현한윤전김중수
    • 송재준최종현한윤전김중수
    • C12N15/10C12Q1/68C12Q1/02
    • C12N15/1086
    • .본 발명은 희소 미생물 또는 신규 미생물의 단일 세포 유래 게놈 라이브러리의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 수집한 시료의 미생물군에 대하여 커뮤니티 분석, 이에 근거한 우점종 미생물군 제거를 위한 FISH와 1차 FACS 공정의 수행 및 단일세포로 분리하기 위한 2차 FACS 공정을 수행한 다음, 다중분리증폭법을 수행하여, 환경에 소수 존재하는 난배양성 희소 미생물 또는 신규 미생물을 단일 세포 유래의 게놈으로 증폭하여 유전자 라이브러리로 제조하는 것을 특징으로 한다. 본 발명에 따른 라이브러리의 제조방법은 기존의 방법으로 검출이 어려웠던 실제 환경에 존재하는 난배양성 희소미생물 및 신규 미생물의 게놈 라이브러리를 획득, 제공하며, 희소 미생물 및 신규 미생물에 대한 대량의 유전자를 확보할 수 있게 한다. 또한, 기존의 메타게놈 라이브러리 제조방법과 달리 확보된 유전자의 유래를 확인할 수 있게 하며 환경에 존재하는 우점의 미생물을 제거함으로써 다양성에 기반을 둔 라이브러리의 제조가 가능하게 하므로 유용하다.
    • 本发明涉及一种制备源自罕见微生物或新型微生物的单细胞的基因组文库的方法。 更具体地,本发明的特征在于:从收集的样品中分析微生物群落的群落; 基于分析进行FISH和第一FACS处理以除去主要微生物群,并进行第二FACS处理以将微生物分类为单个细胞; 将不可培养的稀有微生物或在环境中很少存在的新型微生物从单个细胞衍生的基因组中扩增; 并构建基因文库。 本发明的方法可以获得和提供存在于真实环境中的非培养性微生物和新型微生物的基因组文库,难以通过常规方法检测并可获得大量稀有和新型微生物的基因。 此外,该方法是有用的,因为该方法能够识别所获得的基因的起点,不同于用于制备宏基因组文库的常规方法,并且可以通过除去存在于环境中的显性微生物来制备基于多样性的文库。