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    • 5. 发明专利
    • 軟骨細胞系統細胞及び/又は軟骨様組織を作製するための方法及び組成物
    • 方法和组合物用于制备软骨细胞谱系细胞和/或软骨样组织
    • JP2016515825A
    • 2016-06-02
    • JP2016505658
    • 2014-04-02
    • ユニバーシティー ヘルス ネットワークユニバーシティー ヘルス ネットワーク
    • ケラー、ゴードンエム. クラフト、エイプリルエム. クラフト、エイプリル
    • C12N5/077A61K35/32A61L27/00A61P19/02A61P19/08A61P19/10C12Q1/02G01N33/15G01N33/50
    • A61K35/32C12N5/0655C12N2501/115C12N2501/155C12N2501/16C12N2501/415C12N2501/999C12N2503/02C12N2506/02C12N2506/03G01N33/5044
    • 軟骨細胞及び/又は軟骨、任意選択で、関節様非肥大軟骨細胞及び/若しくは軟骨様組織並びに/又は肥大軟骨細胞様細胞及び/若しくは軟骨様組織を作製するための方法であって、a.原始線条様中胚葉細胞集団、任意選択で、CD56+及びPDGFRα+KDR−原始線条様中胚葉集団を、i.FGFアゴニストと、ii.BMP阻害剤、任意選択で、ノギン、LDN−193189、ドルソモルフィンと、iii.任意選択で、1種又は複数のTGFβ阻害剤、任意選択で、SB431542及びWnt阻害剤、任意選択で、DKK1、IWP2又はXAV939とを含む、沿軸中胚葉特定化カクテルとともに培養して、細胞表面CD73、CD105及び/又はPDGFR−βを発現する沿軸中胚葉集団を特定化するステップと、b.i.CD73、CD105及び/又はPDGFR−βを発現する沿軸中胚葉集団を、任意選択で、血清不含又は血清含有培地中、高細胞密度で培養するステップと、ii.高細胞密度CD73+、CD105+及び/又はPDGFRβ+沿軸中胚葉集団を、血清不含培地中でTGFβアゴニストとともに培養して、高細胞密度Sox9+、コラーゲン2+軟骨細胞前駆体集団を製造するステップとを含む軟骨細胞前駆体集団を作製するステップと、c.i.高細胞密度Sox9+、コラーゲン2+軟骨細胞前駆体集団を、TGFβ3アゴニストとともに長期間培養して、関節様非肥大軟骨細胞及び/又は軟骨様組織を製造するステップか、又はii.高細胞密度Sox9+コラーゲン2+軟骨細胞前駆体集団を、BMP4アゴニストとともに長期間培養して、肥大軟骨細胞様細胞及び/又は軟骨様組織を製造するステップのいずれかとを含む、方法。
    • 软骨细胞和/或软骨,可选地,用于制备联合状非肥大软骨细胞和/或软骨样组织和/或增生性软骨细胞样细胞和/或软骨样组织,一个的方法。原始 条纹状的中胚层细胞群,可选地,CD56 +和PDGFRα+ KDR-原条等中胚层人口,并i.FGF激动剂,抑制剂ii.BMP任选头蛋白,LDN-193189,奥尔索 吗啡,III。任选地,一种或多种TGFβ抑制剂,任选地,SB431542和Wnt抑制剂,任选地,DKK1,和一个或IWP2 XAV939,与近轴胚芽专门鸡尾酒孵育 于,识别所述中胚层人口近轴表达细胞表面CD73,CD105和/或PDGFR-β,所述BiCD73,CD105和/或表达PDGFR-β近轴中胚层的人群,任选 选择,或者是在含有血清的培养基中培养和无血清以高细胞密度的步骤 和随角异色,II。高细胞密度的CD73 +,CD105的+,和/或PDGFR-β+近轴中胚层人口,在无血清培养基中,并用TGFβ受体激动剂,高细胞密度的Sox9 +,胶原2+软骨细胞前体群体培养 制备软骨细胞前体群体,包括软骨细胞前体群体的制造,CI高细胞密度的Sox9 +,胶原2+的步骤与TGF-β3激动剂,关节状非肥大软骨细胞和/培养的步骤,和长期 或产生软骨样组织,或ii。具有高细胞密度的Sox9 +胶原2+软骨细胞前体群体,和长期用BMP4激动剂培养,产生肥大软骨细胞样细胞和/或软骨样组织的步骤 包括以及步骤方法。