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    • 2. 发明申请
    • VERFAHREN ZUR ENZYMATISCHEN HERSTELLUNG VON 2-HYDROXY-2-METHYLCARBONSÄUREN
    • METHOD FOR酶促制备2-羟基-2-甲基羧酸
    • WO2007110394A2
    • 2007-10-04
    • PCT/EP2007/052830
    • 2007-03-23
    • HELMHOLTZ-ZENTRUM FÜR UMWELTFORSCHUNG GMBH - UFZMÜLLER, Roland, H.ROHWERDER, Thore
    • MÜLLER, Roland, H.ROHWERDER, Thore
    • C12N9/90C12P7/42C12P7/52
    • Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur enzymatischen Herstellung von 2-Hydroxy-2-methylcarbonsäuren aus 3-Hyc!roxycarbonsäuren, wobei eine 3-Hydroxycarbonsäure in einer wässrigen Reaktionslösung produziert und/oder zu dieser Reaktionslösung gegeben und inkubiert wird. Die wässrige Reaktionslösung enthält eine 3-Hydroxycarbonsäure-CoA-Mutase-Aktivität aufweisende Einheit, welche sowohl 3-Hydroxycarbonyl-CoA-Ester produzierende als auch 3- Hydroxycarbonyl-CoA-Ester isomerisierende Aktivität besitzt und die Umwandlung der 3-Hydroxycarbonsäure in die entsprechende 2-Hydroxy-2-methylcarbonsäure bewirkt, welche als Säure oder in Form ihrer Salze gewonnen wird. In einer bevorzugten Ausführungsform ist die 3-Hydroxycarbonsäure-CoA-Mutase-Aktivität aufweisende Einheit eine Einheit, die eine isolierte cobalaminabhängige Mutase umfasst und ggf. ein 3-Hydroxycarbonyl-CoA-Ester produzierendes Enzym oder Enzymsystem oder ein sie umfassender Mikroorganismus. Vorzugsweise betrifft die Erfindung einen biotechnologischen Prozess zur Produktion von 2-Hydroxy-2-methylcarbonsäuren, wobei Mikroorganismen, die die gewünschten Aktivitäten besitzen, in einem wässrigen System mit Hilfe einfacher Naturstoffe kultiviert werden und intrazellulär entstehende 3-Hydroxycarbonyl-CoA-Ester zu den entsprechenden 2-Hydroxy-2-methylcarbonsäuren umwandeln. Die Erfindung umfasst ebenfalls die Produktion von ungesättigten 2-Methylcarbonsäuren, wobei die gewonnenen 2-Hydroxy-2-methylcarbonsäuren durch Dehydratisierung in die korrespondierenden ungesättigten 2-Methylcarbonsäuren (Methacrylsäure und höhere Homologe) umgewandelt werden.
    • 本发明涉及一种用于从3- HYC!Roxycarbonsäuren,其中3-羟基羧酸在含水反应溶液中产生和/或加入到该反应溶液中,温育的2-羟基-2-甲基羧酸的酶制剂的方法。 含有3-羟基酰基-CoA变位酶活性,包括单元,其具有与反应水溶液既3-羟基酰基-CoA酯生成和3-羟基酰基-CoA酯异构化3-羟基羧酸的活性和转化成相应的2 其被分离为酸或它们的盐,2-羟基-2-甲基羧酸的形式。 在一个优选的实施方案中,具有单元的3-羟基酰基-CoA变位酶活性是其包括分离的钴胺素依赖性变位酶的单元,并且,在适当情况下,3-羟基酰基-CoA酯生成酶或酶系统或全面他们微生物。 优选地,本发明涉及一种生产2-羟基-2-甲基羧酸的生物技术方法,所述具有所需活性的微生物,是在含水体系中培养用的简单的天然产品的助剂和胞内得到的3-羟基酰基-CoA酯到相应的 转换2-羟基-2-甲基羧酸。 本发明还包括生产不饱和羧酸,2-甲基,其中所获得的2-羟基-2-甲基羧酸通过脱水转化成相应的不饱和的2-亚甲基的羧酸(甲基丙烯酸和高级同系物)。