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1. 发明申请

WO2009080299A1 SM-PROTEIN BASED SECRETION ENGINEERING 审中-公开
标题翻译：基于SM蛋白的分泌工程
公开(公告)号：WO2009080299A1
公开(公告)日：2009-07-02
申请号：PCT/EP2008/010882
申请日：2008-12-19
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , KAUFMANN, Hitto , BECKER, Eric , FLORIN, Lore , FUSSENEGGER, Martin , PENG, Ren-Wang , STUDTS, Joey, M.
发明人： KAUFMANN, Hitto , BECKER, Eric , FLORIN, Lore , FUSSENEGGER, Martin , PENG, Ren-Wang , STUDTS, Joey, M.
IPC分类号： C12P21/02 , C12N15/11 , C12N15/12 , C12N15/63 , A61K38/00 , A61K39/00 , A61K48/00 , C12N1/15 , C12N1/21 , C12N5/10
CPC分类号： C07K14/705 , C12N15/113 , C12N2310/11 , C12N2310/14 , C12P21/02
摘要： The present invention concerns the field of cell culture technology. It describes a novel method for enhancing the secretory transport of proteins in eukaryotic cells by heterologous expression of Munc18c, Sly1 or other members of the SM protein family. This method is particularly useful for the generation of optimized host cell systems with enhanced production capacity for the expression and manufacture of recombinant protein products.
摘要翻译：本发明涉及细胞培养技术领域。它描述了一种用于通过异源表达Munc18c，Sly1或SM蛋白家族的其他成员来增强真核细胞中蛋白质的分泌转运的新方法。该方法对于产生具有增强的生产能力的优化的宿主细胞系统特别有用，用于表达和制造重组蛋白质产物。

2. 发明申请

WO2010010108A1 IMPROVED PRODUCTION HOST CELL LINES 审中-公开
标题翻译：改进生产主机线
公开(公告)号：WO2010010108A1
公开(公告)日：2010-01-28
申请号：PCT/EP2009/059400
申请日：2009-07-22
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , KAUFMANN, Hitto , FLORIN, Lore , BECKER, Eric , STUDTS, Joey M.
发明人： KAUFMANN, Hitto , FLORIN, Lore , BECKER, Eric , STUDTS, Joey M.
IPC分类号： C12N9/06 , C12N15/85 , C12N15/63
CPC分类号： C12P21/02 , C07K16/00 , C12N9/003
摘要： The invention concerns the field of cell culture technology. The invention describes production host cell lines comprising vector constructs comprising a DHFR expression cassette. Those cell lines have improved growth characteristics in comparison to DHFR-deficient or DHFR-reduced cell lines such as CHO DG44 and CHO DUKX-Bl 1. The invention especially concerns two cell lines, a representative of each cell line is deposited with the DSMZ under the number DSM ACC2909 (CHOpper® Discovery) and DSM ACC2910 (CHOpper® Standard). The invention further concerns a method of producing proteins using the cells generated by the described method.
摘要翻译：本发明涉及细胞培养技术领域。本发明描述了包含载体构建体的生产宿主细胞系，其包含DHFR表达盒。与DHFR缺陷型或DHFR-减少的细胞系如CHO DG44和CHO DUKX-B1 1相比，这些细胞系具有改善的生长特性。本发明特别涉及两种细胞系，每种细胞系的代表保藏在DSMZ下 DSM ACC2909（发现证明）和DSM ACC2910（标准品）。本发明还涉及使用由所述方法产生的细胞产生蛋白质的方法。

3. 发明申请

WO2008090148A2 IMPROVEMENT OF CELL GROWTH 审中-公开
标题翻译：细胞生长的改善
公开(公告)号：WO2008090148A2
公开(公告)日：2008-07-31
申请号：PCT/EP2008/050699
申请日：2008-01-22
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , KAUFMANN, Hitto , FLORIN, Lore , BECKER, Eric
发明人： KAUFMANN, Hitto , FLORIN, Lore , BECKER, Eric
IPC分类号： C12N9/06
CPC分类号： C12N5/0602 , C12N9/003 , C12N2501/70 , C12N2501/998 , C12N2510/02
摘要： The invention concerns the field of cell culture technology. It concerns a method of improving cell growth, especially the growth of biopharmaceutical producer host cells. The invention further concerns a method of producing proteins using the cells generated by the described method.
摘要翻译：本发明涉及细胞培养技术领域。它涉及改善细胞生长的方法，特别是生物制药生产者宿主细胞的生长。本发明还涉及使用由所述方法产生的细胞产生蛋白质的方法。

4. 发明申请

WO2008107388A1 IMPROVEMENT OF PROTEIN PRODUCTION 审中-公开
标题翻译：蛋白质生产的改进
公开(公告)号：WO2008107388A1
公开(公告)日：2008-09-12
申请号：PCT/EP2008/052493
申请日：2008-02-29
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , KAUFMANN, Hitto , FLORIN, Lore , BECKER, Eric , OLAYIOYE, Monilola , HAUSSER, Angelika , FUGMANN, Tim
发明人： KAUFMANN, Hitto , FLORIN, Lore , BECKER, Eric , OLAYIOYE, Monilola , HAUSSER, Angelika , FUGMANN, Tim
IPC分类号： C12N15/67
CPC分类号： C12N15/63 , C07K14/435 , C07K14/47 , C07K14/4702 , C07K16/00 , C07K2319/036 , C12N15/67 , C12N15/85 , C12P21/00 , C12Q1/68 , G01N33/68
摘要： The invention concerns the field of protein production and cell culture technology. CERT is identified as a novel in vivo PKD substrate. Phosphorylation on serine 132 by PKD decreases the affinity of CERT towards its lipid target phosphatidylinositol 4-phosphateat Golgi membranes and reduces ceramide transfer activity,identifying PKD as a regulator of lipid homeostasis. The present invention shows that CERT in turn is critical for PKD activation and PKDdependentprotein cargo transport to the plasma membrane. The interdependence of PKDand CERT is thus a key to the maintenance of Golgi membrane integrity and secretory transport.
摘要翻译：本发明涉及蛋白质生产和细胞培养技术领域。 CERT被确定为体内PKD底物的新颖。通过PKD对丝氨酸132的磷酸化降低了CERT对其脂质靶磷脂酰肌醇4-磷酸酯高尔基体膜的亲和力，降低了神经酰胺转移活性，鉴定了PKD作为脂质体内平衡的调节剂。本发明显示，CERT依次对PKD激活和PKD依赖性蛋白质货物运送至质膜是至关重要的。因此，PKD和CERT的相互依赖关系是保持高尔基体膜完整性和分泌转运的关键。

5. 发明申请

WO2009115495A1 METHODE ZUR STEIGERUNG DER REKLONIERUNGSEFFIZIENZ 审中-公开
标题翻译：法提高再克隆效率
公开(公告)号：WO2009115495A1
公开(公告)日：2009-09-24
申请号：PCT/EP2009/053091
申请日：2009-03-16
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , FIEDER, Jürgen , FLORIN, Lore , KAUFMANN, Hitto , KRIEG, Thomas , WULF, Melanie
发明人： FIEDER, Jürgen , FLORIN, Lore , KAUFMANN, Hitto , KRIEG, Thomas , WULF, Melanie
IPC分类号： C12N5/06
CPC分类号： C12N5/0037 , C12N2500/84 , C12N2501/105 , C12N2502/243 , C12N2510/02
摘要： Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf das Gebiet der Zellkulturtechnologie und betrifft Verfahren zur Vermehrung/Klonierung von Zeilen, vorzugsweise von Zeillinien, die für die Produktion von Biopharmazeutika von Bedeutung sind. Ferner betrifft die Erfindung Verfahren zur Herstellung von Proteinen unter Verwendung von Zellen, die mittels Einzelzeilablage gewonnen und vermehrt wurden sowie Zusammensetzungen, die eine Vermehrung von Einzelzellen ermöglichen. Durch die Verwendung von IGF insbesondere in Verbindung mit HSA im Kultivierungsmedium nach der Reklonierung kann die Reklonierungseffizienz und dadurch die Quantität der erhaltenen Klone signifikant gesteigert werden.
摘要翻译：本发明涉及细胞培养技术的领域，并且涉及用于复制的行/克隆，优选其是用于生物制药生产的重要细胞系。此外，本发明提供用于使用由Einzelzeilablage已恢复和传播，以及允许单个细胞的乘法是关心的组合物的细胞蛋白质的方法。在培养基中特别是在组合使用IGF与HSA再克隆再克隆效率，并且由此得到的克隆的数量后，可以显著增加。

6. 发明申请

WO2010029101A1 VERWENDUNG HSA-PRODUZIERENDER ZELLEN 审中-公开
标题翻译：使用HSA的细胞
公开(公告)号：WO2010029101A1
公开(公告)日：2010-03-18
申请号：PCT/EP2009/061679
申请日：2009-09-09
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , FLORIN, Lore , BISCHOFF, Rebecca , FIEDER, Jürgen , KAUFMANN, Hitto , KRIEG, Thomas
发明人： FLORIN, Lore , BISCHOFF, Rebecca , FIEDER, Jürgen , KAUFMANN, Hitto , KRIEG, Thomas
IPC分类号： C12N5/00
CPC分类号： C12N5/0037 , C12N2500/30 , C12N2502/99 , C12N2510/02
摘要： Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf das Gebiet der Zellkulturtechnologie und betrifft Verfahren zur Vermehrung/Klonierung von Zellen, vorzugsweise von Zelllinien, die für die Produktion von Biopharmazeutika von Bedeutung sind. Ferner betrifft die Erfindung Verfahren zur Herstellung von Proteinen unter Verwendung von Zellen, die mittels Einzelzellablage gewonnen und vermehrt wurden sowie Medien-Zusammensetzungen, die eine Vermehrung von Einzelzellen ermöglichen. Durch die Verwendung Albumin-bzw. bevorzugt HSA-produzierender Zellen zum Konditionieren von Medium, als Feederzellen oder als Wirtszellen kann die Reklonierungseffizienz und dadurch die Quantität der erhaltenen Klone signifikant gesteigert werden. Es ist auch eine Kombination dieser Ansätze möglich. Durch die Verwendung von Albumin-bzw. bevorzugt HSA-produzierenden Zellen kann auch in Serum- und/oder Insulin-freiem Medium und in unterschiedlichen Zelltypen eine Steigerung der Reklonierungseffizienz erzielt werden.
摘要翻译：本发明涉及细胞培养技术的领域，并且涉及优选的细胞系用于生产生物药物的重要到用于复制/克隆细胞的方法，。此外，本发明提供了使用其通过单细胞沉积获得并增殖以及允许单个细胞的乘法是有关培养基组合物的细胞蛋白质的方法。通过使用白蛋白或。优选HSA产生细胞用于调节介质作为饲养细胞或作为宿主细胞，再克隆效率，并且由此得到的克隆的数量可以显著增加。这也是这些方法可能的组合。或者通过使用白蛋白。优选HSA产生细胞，以增加再克隆效率，也可以在血清和/或无胰岛素的培养基，在不同的细胞类型来实现的。

7. 发明申请

WO2010128032A1 CHO / CERT CELL LINES 审中-公开
标题翻译： CHO / CERT细胞系
公开(公告)号：WO2010128032A1
公开(公告)日：2010-11-11
申请号：PCT/EP2010/056009
申请日：2010-05-04
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM INTERNATIONAL GMBH , FLORIN, Lore , BECKER, Eric , KAUFMANN, Hitto
发明人： FLORIN, Lore , BECKER, Eric , KAUFMANN, Hitto
IPC分类号： C12N15/67 , C07K14/47
CPC分类号： C07K14/47
摘要： The invention concerns the field of cell culture technology. The invention describes production host cell lines comprising vector constructs comprising a CERT S132 A expression cassette. Those cell lines have improved growth characteristics and high CERT S132A expression levels. The invention especially concerns two cell lines deposited with the DSMZ under the number DSM ACC2989 (CHO/CERT 2.20) and DSM ACC2990 (CHO/CERT 2.41). The invention further concerns a method of generating such preferred production host cells and a method of producing proteins using the two cell lines deposited with the DSMZ under the number DSM ACC2989 (CHO/CERT 2.20) and DSM ACC2990 (CHO/CERT 2.41).
摘要翻译：本发明涉及细胞培养技术领域。本发明描述了包含载体构建体的生产宿主细胞系，其包含CERT S132A表达盒。这些细胞系具有改善的生长特性和较高的CERT S132A表达水平。本发明特别涉及以DSM ACC2989（CHO / CERT 2.20）和DSM ACC2990（CHO / CERT 2.41）存放于DSMZ的两种细胞系。本发明还涉及产生这种优选的生产宿主细胞的方法，以及使用保藏在帝斯曼数据DSM ACC2989（CHO / CERT 2.20）和DSM ACC2990（CHO / CERT 2.41）上的DSMZ的两种细胞系产生蛋白质的方法。

8. 发明申请

WO2008031873A1 METHODS OF SELECTING CELL CLONES 审中-公开
标题翻译：选择细胞克隆的方法
公开(公告)号：WO2008031873A1
公开(公告)日：2008-03-20
申请号：PCT/EP2007/059663
申请日：2007-09-13
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , KAUFMANN, Hitto , FIEDER, Jürgen
发明人： KAUFMANN, Hitto , FIEDER, Jürgen
IPC分类号： G01N33/569
CPC分类号： G01N33/6854 , G01N2015/149
摘要： The invention describes novel methods for selecting cell clones which produce high amounts of protein of interest. In one method the amount of protein is measured before the cells are passaged for the first time. In another method a high throughput automated platform is used under sterile environment conditions with class A particle load of less than 100 particles per m3.
摘要翻译：本发明描述了选择产生大量感兴趣蛋白质的细胞克隆的新方法。在一种方法中，在细胞第一次传代之前测量蛋白质的量。在另一种方法中，在无菌环境条件下使用高通量自动化平台，A级颗粒负荷小于100个/ m3。

9. 发明申请

WO2012041768A1 PRODUCTION OF LOW FUCOSE ANTIBODIES IN H4-II-E RAT CELLS 审中-公开
标题翻译：在H4-II-E大鼠细胞中生产低FUCIOS抗体
公开(公告)号：WO2012041768A1
公开(公告)日：2012-04-05
申请号：PCT/EP2011/066554
申请日：2011-09-23
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM INTERNATIONAL GMBH , ELLWANGER, Kristina , FLORIN, Lore , KAUFMANN, Hitto
发明人： ELLWANGER, Kristina , FLORIN, Lore , KAUFMANN, Hitto
IPC分类号： C12N5/09 , C12N5/16 , A61K39/395
CPC分类号： C12P21/005 , C07K16/2887 , C07K16/32 , C07K2317/14 , C07K2317/41 , C07K2317/72 , C07K2317/732 , C07K2317/734 , C07K2319/30 , C12N5/067 , C12N2500/90 , C12N2510/02
摘要： The invention concerns the field of cell culture technology. It specifically concerns a rat hepatoma cell, preferably a H4-II-E rat hepatoma cell, carrying a DNA encoding an antibody or Fc-fusion protein and having low fucosylation activity for adding fucose to glycosidic structures such as biantennary glycans, e.g. N-acetylglucosamine. The invention furthermore concerns a method for producing low fucose glycoproteins especially antibodies or Fc-fusion proteins in rat hepatoma cells, preferably in H4-II-E rat hepatoma cells. It further concerns the identification and generation of new host cell lines which are capable of synthetizing glycoproteins with beneficial properties, improving the therapeutic efficacy and/or serum half-life of the product compared to products from commonly used host cell lines.
摘要翻译：本发明涉及细胞培养技术领域。它具体涉及一种大鼠肝癌细胞，优选H4-II-E大鼠肝癌细胞，其携带编码抗体或Fc-融合蛋白的DNA，并且具有低岩藻糖基化活性，以将岩藻糖加入糖苷结构如二元聚糖，例如双链聚糖。 N-乙酰氨基葡萄糖。本发明还涉及在大鼠肝癌细胞，优选H4-II-E大鼠肝癌细胞中生产低岩藻糖糖蛋白，特别是抗体或Fc-融合蛋白的方法。它还涉及鉴定和产生能够合成具有有益性质的糖蛋白的新宿主细胞系，与常用宿主细胞系的产物相比，提高了产品的治疗功效和/或血清半衰期。

10. 发明申请

WO2010130804A1 COMBINATORIAL ENGINEERING 审中-公开
标题翻译：组合工程
公开(公告)号：WO2010130804A1
公开(公告)日：2010-11-18
申请号：PCT/EP2010/056588
申请日：2010-05-12
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM INTERNATIONAL GMBH , FLORIN, Lore , ENENKEL, Barbara , FUSSENEGGER, Martin , KAUFMANN, Hitto , SANTORO, Raffaella
发明人： FLORIN, Lore , ENENKEL, Barbara , FUSSENEGGER, Martin , KAUFMANN, Hitto , SANTORO, Raffaella
IPC分类号： C12N15/67 , C12N15/63 , C12N15/113 , C12P21/02
CPC分类号： C12N15/63 , C12N15/113 , C12N15/67 , C12N2310/14 , C12N2310/141 , C12P21/02
摘要： The invention concerns the field of cell culture technology. It concerns production host cell lines with increased expression of ribosomal RNA (rRNA) achieved through introduction of nucleic acids encoding UBF or reducing expression of NoRC proteins, especially of TIP-5. Those cell lines have improved secretion and growth characteristics in comparison to control cell lines. The invention further concerns a method of producing proteins using the cells generated by the described method.
摘要翻译：本发明涉及细胞培养技术领域。它涉及通过引入编码UBF的核酸或减少NoRC蛋白，特别是TIP-5的表达而实现的核糖体RNA（rRNA）表达增加的生产宿主细胞系。与对照细胞系相比，这些细胞系具有改善的分泌和生长特性。本发明还涉及使用由所述方法产生的细胞产生蛋白质的方法。

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