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1. 发明申请

WO2008012142A1 REGULATORISCHE NUKLEINSÄUREELEMENTE 审中-公开
标题翻译：调控核酸ELEMENTS
公开(公告)号：WO2008012142A1
公开(公告)日：2008-01-31
申请号：PCT/EP2007/055954
申请日：2007-06-15
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , ENENKEL, Barbara , SAUTTER, Kerstin
发明人： ENENKEL, Barbara , SAUTTER, Kerstin
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/67
CPC分类号： C12N15/85 , C07K14/47 , C12N15/63 , C12N2800/107 , C12N2830/46 , C12N2830/85
摘要： Die Erfindung betrifft DNA-Sequenzen, speziell transkriptions- bzw. expressionssteigernde Elemente (TE-Elemente) sowie deren Einsatz auf eine m Expressionsvektor in Verbindung mit einem Enhancer, einem Promotor, einem Produktgen und einem Selektionsmarker. Die Erfindung beschreibt die Sequenz Nr. 1 sowie die TE-Elemente TE-01, -02, -03, -04, - 06, -07, -08, -10, -11 oder -12. Aufgrund ihrer geringen Größe besonders bevorzugt sind TE-06, TE-07 oder TE-08. Die Sequenz Nr. 1 stammt aus einer Sequenzregion, die stromaufwärts von der Kodierregion des Ub/S27a-Gens aus CHO-Zellen liegt. TE-Elemente bewirken eine Expressionssteigerung des Produktgens bei stabiler Integration in das eukaryontische Genom, bevorzugt das CHO-DG44-Genom. Chromosomale Positionseffekte werden dadurch überwältigt, abgeschirmt oder aufgehoben. Dadurch wird sowohl der Anteil an Hochproduzenten eines Transfektionsansatzes als auch der absolute Expressionslevel um bis zu fünfzehnfach gesteigert.
摘要翻译：本发明涉及一种DNA序列，特别是转录或表达增强元件（TE元件），以及它们在表达载体米结合增强子，启动子，基因产物和选择性标记的用途。本发明描述的序列号1和TE元件TE-01，-02，-03，-04， - 06，-07，-08，-10，-11或-12。由于它们的尺寸小，最优选TE-06，TE-07和TE-08是。该序列号1是来自位于从CHO细胞中的UB / S27A基因的编码区上游的序列区域。 TE元件引起的增加在稳定整合产物基因的表达到真核基因组中，优选CHO-DG44基因组中。染色体位置的影响因此被克服的，屏蔽或撤回。因此，转染和绝对表达水平较高的生产商都的比例增加了15倍。

2. 发明申请

WO2004050884A3 NEUE NEOMYCIN-PHOSPHOTRANSFERASE-GENE UND VERFAHREN ZUR SELEKTION VON HOCHPRODUZIERENDEN REKOMBINANTEN ZELLEN 审中-公开
公开(公告)号：WO2004050884A3
公开(公告)日：2004-06-17
申请号：PCT/EP2003/013203
申请日：2003-11-25
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , ENENKEL, Barbara , SAUTTER, Kerstin , OTTO, Ralf , FIEDER, Jürgen , BERGEMANN, Klaus
发明人： ENENKEL, Barbara , SAUTTER, Kerstin , OTTO, Ralf , FIEDER, Jürgen , BERGEMANN, Klaus
IPC分类号： C12N15/85
摘要： Die Erfindung betrifft neue modifizierte Neomycin-Phosphotransferase-Gene, sowie deren Verwendung in einem Selektionsverfahren für hochproduzierende rekombinante Zellen. Ferner betrifft die vorliegende Erfindung Expressionsvektoren, die ein modifiziertes Neomycin-Phosphotransferase-Gen sowie ein Gen von Interesse in funktioneller Verknüpfung mit einem heterologen Promotor enthalten und ein Verfahren zur Herstellung von heterologen Genprodukten unter Verwendung dieser Expressionsvektoren.

3. 发明申请

WO2003083093A1 HOST CELLS HAVING IMPROVED CELL SURVIVAL PROPERTIES AND METHODS TO GENERATE SUCH CELLS 审中-公开
标题翻译：具有改善细胞存活性质的宿主细胞和产生这种细胞的方法
公开(公告)号：WO2003083093A1
公开(公告)日：2003-10-09
申请号：PCT/EP2003/003063
申请日：2003-03-25
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , ENENKEL, Barbara , MEENTS, Heiko , FUSSENEGGER, Martin
发明人： ENENKEL, Barbara , MEENTS, Heiko , FUSSENEGGER, Martin
IPC分类号： C12N5/10
CPC分类号： C12N5/00 , C12N2500/90 , C12N2501/48 , C12N2510/02
摘要： The present invention relates to genetically engineered mammalian host cells comprising an enhanced level of active anti-apoptosis genes and methods to generate such host cells. More particularly, the invention pertains to methods which modulate the level of anti-apoptosis active genes within host cells and to host cells showing an enhanced cell viability by delaying/inhibiting programmed cell death naturally occurring in such cells. The present invention also provides new anti-apoptosis genes suitable fro the preparing host cells showing an enhanced cell viability by delaying/inhibiting programmed cell death naturally occurring in such cells.
摘要翻译：本发明涉及包含增强水平的活性抗凋亡基因的遗传工程哺乳动物宿主细胞和产生这种宿主细胞的方法。更具体地，本发明涉及通过延迟/抑制天然存在于这种细胞中的程序性细胞死亡来调节宿主细胞内抗凋亡活性基因水平和宿主细胞的方法，所述宿主细胞显示增强的细胞活力。本发明还提供适用于通过延迟/抑制在这种细胞中天然存在的程序性细胞死亡而显示增强的细胞活力的通过制备宿主细胞适合的新的抗凋亡基因。

4. 发明申请

WO2004048584A1 SEQUENCE SPECIFIC DNA RECOMBINATION IN EUKARYOTIC CELLS 审中-公开
标题翻译：原核细胞中的序列特异性DNA重组
公开(公告)号：WO2004048584A1
公开(公告)日：2004-06-10
申请号：PCT/EP2003/013414
申请日：2003-11-28
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , DRÖGE, Peter , ENENKEL, Barbara
发明人： DRÖGE, Peter , ENENKEL, Barbara
IPC分类号： C12N15/90
CPC分类号： C12N15/907
摘要： The present invention relates to a method of sequence-specific recombination of DNA in eukaryotic cells, comprising the introduction of a first DNA comprising a nucleotide sequence containing at least one recombination sequence into a cell, introducing a second DNA comprising a nucleotide sequence containing at least one further recombination sequence into a cell, and performing the sequence specific recombination by a bacteriophage lambda integrase Int.
摘要翻译：本发明涉及DNA在真核细胞中的序列特异性重组的方法，包括将包含至少一个重组序列的核苷酸序列的第一DNA引入细胞，引入包含至少包含至少一个重组序列的核苷酸序列的第二DNA 一个进一步的重组序列进入细胞，并通过噬菌体λ整合酶Int进行序列特异性重组。

5. 发明申请

WO2009068645A1 NOVEL RECOMBINATION SEQUENCES 审中-公开
标题翻译：新型重组序列
公开(公告)号：WO2009068645A1
公开(公告)日：2009-06-04
申请号：PCT/EP2008/066430
申请日：2008-11-28
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , ENENKEL, Barbara
发明人： ENENKEL, Barbara
IPC分类号： C12N15/90 , C12N15/85
CPC分类号： C12N15/902 , C12N15/8509 , C12N2800/30
摘要： The present invention relates to novel nucleotide sequences, which are variants of att recombination sequences, involved in sequence-specific recombination of DNA in eukaryotic cells, whereby sequence specific recombination is performed by a bacteriophage lambda integrase Int. Such novel att recombination sequences being e.g. att P.b, att P.a, att L.a, att R.a and att R.b. The present invention further relates to a method of sequence-specific recombination of DNA in eukaryotic cells, comprising the introduction of a first DNA comprising a nucleotide sequence containing at least one recombination sequence into a cell, introducing a second DNA comprising a nucleotide sequence containing at least one further recombination sequence into a cell, and performing the sequence specific recombination by a bacteriophage lambda integrase Int, whereby at least one of said first or second DNAs is a novel att recombination sequences being e.g. att P.b, att P.a, att L.a, att R.a and att R.b.
摘要翻译：本发明涉及新的核苷酸序列，其是att重组序列的变体，涉及DNA在真核细胞中的序列特异性重组，由此序列特异性重组通过噬菌体λ整合酶Int进行。这样的新颖的att重组序列是例如。 attP.b，attP.a，attL.a，attR.a和attR.b. 本发明还涉及DNA在真核细胞中的序列特异性重组的方法，包括将包含至少一个重组序列的核苷酸序列的第一DNA引入细胞，引入包含含有至少一个进一步的重组序列进入细胞，并通过噬菌体λ整合酶Int进行序列特异性重组，由此所述第一或第二DNA中的至少一个是新的att重组序列，例如 attP.b，attP.a，attL.a，attR.a和attR.b.

6. 发明申请

WO2005019442A3 VERFAHREN ZUR REKLONIERUNG VON PRODUKTIONSZELLEN 审中-公开
公开(公告)号：WO2005019442A3
公开(公告)日：2005-03-03
申请号：PCT/EP2004/009204
申请日：2004-08-17
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , ENENKEL, Barbara , FIEDER, Jürgen , OTTO, Ralf , KRIEG, Thomas
发明人： ENENKEL, Barbara , FIEDER, Jürgen , OTTO, Ralf , KRIEG, Thomas
IPC分类号： C12N5/06
摘要： Neues Verfahren zur Klonselektion und Reklonierung von Säugerzellen, die für die Produktion von Biopharmazeutika von Bedeutung sind, vorzugsweise von Hamster- oder Maus-Myeloma-Zellen, mit hohem Automatisierungsgrad und Durchsatz. Die Erfindung betrifft Verfahren zur Ablage und Vermehrung von Einzellzellklonen der entsprechenden Zellen. Ferner betrifft die Erfindung Verfahren zur Herstellung von Proteinen unter Verwendung von Zellen, die mittels Einzelzellablage gewonnen und vermehrt wurden sowie Zusammensetzungen, die eine Vermehrung von Einzelzellen ermöglichen.

7. 发明申请

WO2009027471A1 VERFAHREN ZUR STEIGERUNG VON PROTEINTITERN 审中-公开
标题翻译：法在PROTEINTITERN增加
公开(公告)号：WO2009027471A1
公开(公告)日：2009-03-05
申请号：PCT/EP2008/061310
申请日：2008-08-28
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , AMBROSIUS, Dorothee , ENENKEL, Barbara , ECKERMANN, Christian
发明人： AMBROSIUS, Dorothee , ENENKEL, Barbara , ECKERMANN, Christian
IPC分类号： C12N15/13 , C12N15/85 , C07K16/00 , C07K14/505 , C12N9/72
CPC分类号： C07K16/00 , C07K16/40 , C07K2317/24 , C07K2317/52
摘要： Die Erfindung betrifft Verfahren zur Steigerung des Titers eines Proteins von Interesse in einer Zelle sowie die verbesserte Produktion und Reinigung von optimierten Biomolekülen, deren Bestandteil u.a. die Domäne C H 3 ist. Ein oftmals beobachteter Effekt bei Biomolekülen ist die Abspaltung der C-terminalen Aminosäure(n), z.B. des C-terminalen Lysins. Die zumeist unvollständige Prozessierung beispielsweise der schweren Kette von Antikörpern führt zu Produktheterogenität. Zur Vermeidung dieser Produktheterogenität wurde mittels rekombinanter DNA-Technologie das entsprechende Codon des C-terminalen Lysins der schweren Antikörperkette deletiert. Diese optimierten Antikörper führen zu einem, im Vergleich zum Wildtyp, erhöhten Produkttiter. Zusätzlich erweisen sie sich als vorteilhaft in der Reinigung durch ein besseres Elutionsverhalten aufgrund der reduzierten Ladungsheterogenität.
摘要翻译：本发明涉及一种用于增加目的蛋白质的滴度在细胞以及改进的生产和优化生物分子的纯化，其包括I.A. 是域CH3。上生物分子的频繁观察到的效果是C末端氨基酸（一个或多个），例如消除 C-末端赖氨酸。该多为不完全的处理，例如，重链抗体，导致产品的异质性。为了避免这种产品异质抗体重链的C-末端赖氨酸的密码子对应的是通过重组DNA技术中删除。这些优化的抗体导致，相比野生型，增加了产品的效价。此外，它们被证明是在由更好洗脱纯化有利的，因为减小的电荷异质性。

8. 发明申请

WO2010010107A1 NOVEL REGULATORY ELEMENTS 审中-公开
标题翻译：新的法规要素
公开(公告)号：WO2010010107A1
公开(公告)日：2010-01-28
申请号：PCT/EP2009/059399
申请日：2009-07-22
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , ENENKEL, Barbara
发明人： ENENKEL, Barbara
IPC分类号： C12N15/09 , C12N15/11 , C12N15/67
CPC分类号： C12N15/67 , C12N15/63
摘要： The invention concerns novel regulatory elements as well as related vectors and cells. Furthermore, it relates to methods of improving expression of polypeptides from nucleic acids such as cloned genes and to the production of various polypeptides in host cells using said novel regulatory elements. Additionally, the invention relates to uses of said novel regulatory elements as insulators, in gene therapy or for improving host cell lines.
摘要翻译：本发明涉及新的调控元件以及相关的载体和细胞。此外，本发明涉及改善来自核酸如克隆基因的多肽表达以及使用所述新型调控元件在宿主细胞中产生各种多肽的方法。此外，本发明涉及所述新型调节元件在基因治疗或改善宿主细胞系中的绝缘体的用途。

9. 发明申请

WO2004050879A1 EXPRESSIONSVEKTOR, VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG VON HETEROLOGEN GENPRODUKTEN UND SELEKTIONSVERFAHREN FÜR HOCHPRODUZIERENDE REKOMBINANTE ZELLEN 审中-公开
标题翻译：表达载体中，用于生产基因产物和异源选择方法高产重组细胞
公开(公告)号：WO2004050879A1
公开(公告)日：2004-06-17
申请号：PCT/EP2003/013225
申请日：2003-11-25
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG , ENENKEL, Barbara , FIEDER, Jürgen , OTTO, Ralf , GRAMMATIKOS, Stefanos
发明人： ENENKEL, Barbara , FIEDER, Jürgen , OTTO, Ralf , GRAMMATIKOS, Stefanos
IPC分类号： C12N15/79
CPC分类号： C12N15/65 , C12N15/69
摘要： Ein Expressionsvektor für eukaryontische Zellen umfassend ein Gen, das für ein Protein von Interesse kodiert, in funktioneller Verknüpfung mit einem Hamster-Ubiquitin/S27a-Promotor und einem Gen, das für ein fluoreszierendes Protein kodiert. Vorzugsweise enthält der Expressionsvektor noch ein amplifizierbares Selektionsmarkergen. Beschrieben werden ferner mit dem Expressionsvektor transfizierte Wirtszellen, vorzugsweise Säugerzellen, Verfahren zur Herstellung heterologer Genprodukte und ein Verfahren zur Selektion hochproduzierender Zellen.
摘要翻译：包含编码可操作地连接到仓鼠泛素/ S27A启动子和荧光蛋白的基因编码的目的蛋白的基因的真核细胞的表达载体。优选地，所述表达载体含有可扩增的选择标记。用表达载体转染的宿主细胞，优选哺乳动物细胞，产生异源基因产物和用于选择高产细胞的方法的方法进行进一步的描述。

10. 发明申请

WO2009062789A1 IMPROVING THE SECRETORY CAPACITY IN HOST CELLS 审中-公开
标题翻译：改善宿主细胞中的秘密能力
公开(公告)号：WO2009062789A1
公开(公告)日：2009-05-22
申请号：PCT/EP2008/063308
申请日：2008-10-06
申请人： BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO KG , KAUFMANN, Hito , BECKER, Eric , FLORIN, Lore , ENENKEL, Barbara , SAUTTER, Kerstin , BISCHOFF, Rebecca
发明人： KAUFMANN, Hito , BECKER, Eric , FLORIN, Lore , ENENKEL, Barbara , SAUTTER, Kerstin , BISCHOFF, Rebecca
IPC分类号： C12N5/10 , C12N15/09
CPC分类号： C12N5/0018 , C07K16/00 , C12N2501/48 , C12N2501/60 , C12N2510/02
摘要： The invention concerns the field of protein production and cell culture technology. It describes a method of producing a heterologous protein of interest in a cell comprising a. Increasing the expression or activity of a secretion enhancing gene, and b. Increasing the expression or activity of an anti-apoptotic gene, and c. Effecting the expression of said protein of interest, whereby the secretion enhancing gene is a gene encoding a protein whose expression or activity is induced during one of the following cellular processes: plasma-cell differentiation, unfolded protein response (UPR), endoplasmic reticulum overload response (EOR).
摘要翻译：本发明涉及蛋白质生产和细胞培养技术领域。它描述了在包含a的细胞中产生感兴趣的异源蛋白质的方法。增加分泌增强基因的表达或活性，b。增加抗凋亡基因的表达或活性，c。影响所述目的蛋白质的表达，由此分泌增强基因是编码在以下细胞过程之一期间其表达或活性被诱导的蛋白质的基因：血浆细胞分化，展开的蛋白质应答（UPR），内质网过载反应（EOR）。

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