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1. 发明申请

WO2021020720A1 말과 동물 양수 유래 줄기세포 및 이를 함유하는 근골격계 재생용 세포 치료제 审中-公开
公开(公告)号：WO2021020720A1
公开(公告)日：2021-02-04
申请号：PCT/KR2020/007476
申请日：2020-06-10
申请人： 주식회사 엠케이바이오텍 , 충남대학교 산학협력단
发明人： 김민규 , 김은영 , 이은지 , 김동언 , 남윤석 , 길태영
IPC分类号： C12N5/0775 , A61K35/28 , A61P21/00
摘要： 본 발명은 말과 동물의 태아 조직 유래 줄기세포(Equine fetal tissue derived stem cells)및 이를 함유하는 근골격계 재생용 세포치료제에 관한 것으로, 보다 구체적으로는, 말과 동물의 양수 유래 줄기세포(Equine amniotic fluid stem cells)의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 양수 줄기세포의 특성 분석, 상기 줄기세포를 유효 성분으로 함유하는 말 양수 유래 줄기세포 및 이를 함유하는 근골격계 재생용 세포 치료제에 관한 것이다. 본 발명은 말과 동물 양수 유래의 줄기세포를 제공한다. 또한 본 발명은 임신한 말의 양수를 채취하는 과정(1과정), 상기의 채취한 양수에서 단핵 세포를 분리하는 과정(2과정), 상기의 분리된 양수 유래 단핵세포를 초기 배양하는 과정(3과정)을 포함하는 말과 동물 양수 유래의 중간엽 줄기세포를 제조하는 방법를 제공한다. 또한 본 발명은 임신한 말의 양수를 채취하는 과정(1과정), 상기의 채취한 양수에서 단핵 세포를 분리하는 과정(2과정), 상기의 분리된 양수 유래 단핵세포를 초기 배양하는 과정(3과정), 상기에서 초기 배양된 3~5계대 사이의 말 양수 유래 세포를 10~20 % FBS (Fetal Bovine Serum), 0.5~1.5 % Glutamax 및 0.5~1.5 % 페니실린/스트렙토마이신이 포함된 Dulbecco Modified Eagle Medium(DMEM) 배양 배지를 사용하여 배양하는 과정(4과정), 상기의 배양접시 내의 배지를 제거하고 PBS (Phosphate buffered saline, PH 7.2)으로 세척 후 0.01~0.1% Typsin-EDTA를 이용하여 세포를 기저면에서 분리시키는 과정(5과정)을 포함한 말과 동물 중간엽 줄기세포를 제조하는 방법을 제공한다. 또한 본 발명은 근골격계 치료 기능이 있는 것을 특징으로 하는 말과 동물 양수 유래의 줄기세포를 제공한다. 또한 본 발명은 상기한 말과 동물 양수 유래의 줄기세포를 포함하는 근골격계 재생용 세포 치료제를 제공한다.

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