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    • 4. 发明申请
    • 改変タンパク質の作製方法
    • 构建修饰蛋白的方法
    • WO2005108567A1
    • 2005-11-17
    • PCT/JP2005/008362
    • 2005-05-06
    • プレシジョン・システム・サイエンス株式会社田島 秀二高橋 正明宮下 雪子
    • 田島 秀二高橋 正明宮下 雪子
    • C12N15/00
    • C12N15/1034C12N15/10C12N15/102C12P21/02
    •  微生物を含有する試料から微生物に由来するDNAを調製し、同一種類の機能を有する第1~第nの既知タンパク質の間で保存されているアミノ酸配列に基づいて縮重プライマーを作製し、微生物に由来するDNAの存在下、縮重プライマーを用いてPCRを行い、PCRにより増幅されたDNA断片の塩基配列を決定し、DNA断片にコードされるアミノ酸配列を確定し、DNA断片にコードされるアミノ酸配列と既知タンパク質のアミノ酸配列との相同性を評価し、DNA断片にコードされるアミノ酸配列と相同性を示すアミノ酸配列を有する既知タンパク質を見出し、見出された既知タンパク質をコードするDNAのうち相同性を示すアミノ酸配列をコードする領域をDNA断片で置換して改変DNAを作製し、改変DNAを発現させて改変タンパク質を作製することにより、改変タンパク質のハイスループットかつ効率的な機能解析及びスクリーニングを実現する。
    • 可以通过从含有微生物的样品制备微生物来源的DNA来构建修饰蛋白质的高通量和高效功能分析和筛选,构建基于第一至第n已知蛋白质中保守的氨基酸序列的简并引物,其具有 相同类型的功能,通过在微生物来源DNA存在下使用简并引物进行PCR,确定通过PCR扩增的DNA片段的碱基序列,鉴定由DNA片段编码的氨基酸序列,评估DNA片段之间的同源性 由DNA片段编码的氨基酸序列和已知蛋白质的氨基酸序列,找出具有与DNA片段编码的氨基酸序列显示同源性的氨基酸序列的已知蛋白质,用编码同源氨基酸的区域 编码由DNA片段所发现的已知蛋白质的DNA中的序列,从而得到修饰的DNA 然后表达修饰的DNA以得到修饰的蛋白质。