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    • 13. 发明申请
    • CHAPERON-
    • 陪护的“工具箱”
    • WO2010012424A1
    • 2010-02-04
    • PCT/EP2009/005398
    • 2009-07-25
    • EVOCATAL GMBHJÄGER, Karl-ErichEGGERT, ThorstenHUMMEL, WernerSEIDEL, AndreaROSENAU, Frank
    • JÄGER, Karl-ErichEGGERT, ThorstenHUMMEL, WernerSEIDEL, AndreaROSENAU, Frank
    • C12P21/02C12N15/70
    • C12P21/02C12N15/67
    • Die Erfindung betrifft das Gebiet der Genexpression und die Herstellung von Proteinen unter Verwendung von transformierten Wirtszellen und rekombinanten DNA-Vektoren. Die Erfindung beschreibt ein Verfahren zur Expression von Zielproteinen, dadurch gekennzeichnet, dass Faltungshelferproteine, welche auch als Chaperone bezeichnet werden, coexprimiert werden. Die coexprimierten Chaperone werden dabei aus einer Liste von einzelnen Faltungshelferproteinen ausgewählt und eine Vielzahl von Kombinationen aus zwei, drei oder mehreren Proteinen gebildet (Chaperon-Toolbox), die eine Expression gruppierter Chaperone-Gene mit heterologen Genen für Zielproteine ermöglicht. Darüber hinaus betrifft die Erfindung die Verwendung von Plasmiden, die Polynucleotide, die für Faltungshelferproteine (Chaperone) codieren, umfassen, wobei das Plasmid zur Expression der Faltungshelferproteine (Chaperone) befähigt ist; und sie betrifft ein Verfahren, die Faltungshelferproteine-codierenden Polynucleotide auszuwählen und zwei, drei oder mehrere davon randomisiert zu kombinieren.
    • 本发明涉及基因表达的字段和生产中使用转化的宿主细胞和重组DNA载体蛋白。 本发明描述了一种用于靶蛋白,其特征在于,折叠辅助蛋白,其也被称为的表达的方法是分子伴侣共表达。 共表达的分子伴侣由此从各个折叠辅助蛋白的列表和各种形成(伴侣工具箱)两种,三种或更多种蛋白质的组合,其允许分组伴侣基因与靶蛋白的异源基因的表达来选择。 此外,本发明涉及使用包含多核苷酸的质粒编码用于折叠辅助蛋白(侣伴蛋白),以获得质粒为折叠辅助蛋白(侣伴蛋白)的表达能够; 并且,本发明涉及选择的折叠辅助蛋白和多核苷酸随机化了编码结合两个,三个或更多的人的方法。
    • 15. 发明申请
    • VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG VON OPTISCH AKTIVEN, PROPARGYLISCHEN, TERMINALEN EPOXIDEN
    • 用于生产光学活性的,丙炔,环氧化物终端
    • WO2002064579A1
    • 2002-08-22
    • PCT/DE2002/000386
    • 2002-02-02
    • FORSCHUNGSZENTRUM JÜLICH GMBHSCHUBERT, Thomas, A.HUMMEL, WernerMÜLLER, Michael
    • SCHUBERT, Thomas, A.HUMMEL, WernerMÜLLER, Michael
    • C07D301/24
    • C07D303/22C07B2200/07C07D303/04C07D303/08C07D303/40C07D409/06C07F7/083C12P7/02
    • Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur enantioselektiven Darstellung von optisch aktiven, propargylischen, terminalen Epoxiden. Erfindungsgemäss werden im ersten Schritt des Verfahrens Verbindungen der Formel 1 mit einer Alkoholdehydrogenase, die bevorzugt aus Pferdeleber oder thermophilen Mikroorganismen (wie z. B. Thermoanaerobium brockii oder Thermoanaerobacter ethanolicus ) oder aus Lactobacillus stammt und in Escherichia coli rekombinant überexpremiert wird, in Anwesenheit von NAD (P) H umgesetzt. Bei dieser Reaktion wird die Oxogruppe enantioselektiv reduziert. Da sowohl ( S ) - Als auch ( R ) -selektive Oxidoreduktasen eingesetzt werden können, ist die Synthese beider Enantiomere möglich. Die Darstellung beider Enantiomere unter Verwendung des selben Enzyms gelingt mit der Alkoholdehydrogenase aus Lactobacillus brevis , da diese Verbindungen mit R 1 = H und Verbindungen mit R 1 = H zu Alkoholen mit entgegengestezter Konfiguration umsetzen. Im zweiten Schritt des Verfahrens wird der α-halogenierte Alkohol mittels einer Base in das enantiomereine Epoxide überführt.
    • 本发明涉及一种用于光学活性的,丙炔,末端环氧化物的对映选择性制备方法。 根据在与醇脱氢酶,其从马肝或嗜热微生物优选是式1的第一步骤化合物的方法的发明(例如,作为厌氧杆菌的Thermoanaerobium或嗜热ethanolicus),或从乳杆菌导出,并且在大肠杆菌中过表达的重组表达,在 属性多个NAD(P)H的实现。 在该反应中,氧代基团对映选择性还原。 由于两个(S) - 和(R) - 选择性的氧化还原酶,可以使用两种对映体的合成是可能的。 使用相同的酶两种对映体的呈现与来自醇脱氢酶实现的短乳杆菌,因为这些化合物瓦特i个ř实施<1> = H和化合物,其中R <1> = H与entgegengestezter配置醇。 在α卤代醇的方法的第二步骤是通过碱进enantiomereine环氧化物而转化。