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1. 发明授权

KR101775682B1 보툴리눔 독소의 제조방법 有权
标题翻译：肉毒杆菌毒素的制造方法
公开(公告)号：KR101775682B1
公开(公告)日：2017-09-06
申请号：KR1020150168196
申请日：2015-11-30
申请人： 주식회사 대웅
发明人： 김경윤 , 김청세 , 김명섭 , 설혜영
IPC分类号： C07K14/33 , C07K1/16 , C07K1/18 , C07K1/30 , C07K1/34 , C07K1/36 , B01D15/36
CPC分类号： C07K14/33 , B01D15/363 , B01D61/145 , B01D61/147 , B01D61/58 , B01D2315/16
摘要： 본발명은동물유래성분을포함하지않는(Animal Product Free, APF) 공정을통한보툴리눔독소의제조방법에관한것으로, 더욱자세하게는보툴리눔독소생산균주배양액에산을처리하여산 침전시키는단계; 보툴리눔독소를포함하는침전물에완충용액을첨가한다음, 심층여과(depth filtration, DF), 정밀여과(microfiltration, MF), 한외여과(ultrafiltration, UF), 멸균여과(sterile filtration), 멤브레인크로마토그래피(membrane chromatography, MC) 및원심분리(centrifugation)로구성된군에서선택되는하나이상의방법을통해정화(clarification)하는단계; 정화된보툴리눔독소를포함하는용액을 UF 다이아필트레이션(UF diafiltration), 황산암모늄침전, 또는염산침전을수행한다음, 상기 UF 다이아필트레이션의투석유물(retentate)을완충용액에희석하거나, 황산암모늄침전또는염산침전의침전물을완충용액에용해시키는단계; 및희석된투석유물, 황산암모늄침전물의용해물, 또는염산침전물의용해물을음이온교환크로마토그래피(Anion exchange chromatography: AEX)를이용하여보툴리눔독소를정제하는단계; 를포함하는보툴리눔독소의제조방법에대한것이다. 본발명에따른보툴리눔독소의제조방법은동물유래성분의유입이원천적으로차단되어, 전염성해면상뇌증(Transmissible Spongiform Encephalopathy: TSE) 등과같은감염을예방할수 있다. 또한, 본발명의간단한공정으로고순도의보툴리눔독소를제조할수 있으므로매우경제적이고효율적이며, 기존의방법으로생산된보툴리눔독소에비해순도가높아국소작용력이증가하므로부작용으로나타날수 있는보툴리눔독소의전신순환성이낮아져안전성이증가하는장점이있어, 신경근육장애, 주름살제거제, 경직성편마비및 뇌성마비의치료등에다양하게이용될수 있다.
摘要翻译：本发明包括酸沉淀过程的步骤的酸是，更具体的肉毒毒素的菌株培养液涉及用于制备肉毒毒素与不含有动物来源的成分（不含动物产物，APF）处理的过程; 通过加入缓冲溶液中以沉淀包含肉毒杆菌毒素，然后，深度过滤（深度过滤，DF），微滤（微滤，MF），超滤（超滤，UF），无菌过滤（无菌过滤），膜色谱法（通过选自膜层析（MC）和离心的一种或多种方法进行澄清; 含有纯化的A型肉毒毒素UF隔膜过滤（UF渗滤），硫酸铵沉淀的溶液，或通过进行酸沉淀，然后，用缓冲溶液或硫酸铵稀释透析伪影的UF过滤金刚石（渗余物）将沉淀物沉淀物或盐酸沉淀物溶解在缓冲溶液中; 和稀释透析工件，硫酸铵沉淀生物医学海鲜，或盐酸，使用（阴离子交换层析AEX）纯化的肉毒杆菌毒素的沉淀生物医学海鲜阴离子交换层析; 生产肉毒杆菌毒素的方法。根据本发明的动物衍生的组分的入口肉毒毒素的制备方法是从根本上阻止，传染性海绵状脑病：它可以防止感染，如（传染性海绵状脑病TSE）。此外，由于它可以通过本发明的一个简单的过程制造高纯度肉毒毒素是非常经济和有效的，纯度高于由肉毒毒素局部作用的力常规方法生产的增加，因为肉毒毒素在natanalsu副作用城堡全身循环这是一个优点，即安全性增加越低，它可以进行各种用于神经肌肉障碍，去除皱纹，痉挛性偏瘫和脑瘫的治疗。

2. 发明授权

KR101723168B1 보툴리눔 독소의 제조를 위한 배지 조성물 有权
标题翻译：一种用于生产肉毒杆菌毒素的中等组合物
公开(公告)号：KR101723168B1
公开(公告)日：2017-04-05
申请号：KR1020150059656
申请日：2015-04-28
申请人： 주식회사 대웅
发明人： 김경윤 , 설혜영 , 민경민
IPC分类号： C12N5/00 , C07K14/33
CPC分类号： C12N9/52 , C07K14/33 , C12N1/20 , C12Y304/24069
摘要： 본발명은보툴리눔독소의제조를위한배지조성물에관한것으로, 더욱상세하게는보툴리눔독소를생산할수 있는클로스트리디움속 균주들의배양용배지조성물에관한것이다. 본발명의배지조성물은가든피가수분해물, 목화씨가수분해물및 밀글루텐가수분해물로구성된군에서선택되는하나이상의식물성펩톤과돼지유래펩톤을포함하는것을특징으로한다. 본발명에따른식물유래펩톤, 돼지유래펩톤및 미네랄성분이포함된배지를클로스트리디움보툴리눔균주의배양에이용할경우, 기존배지와식물유래펩톤만포함된배지보다높은균주성장률을보였고, 상기배지를이용하면안전하게균주를배양하여고농도의보툴리눔독소를제조할수 있다.
摘要翻译：本发明涉及用于生产肉毒杆菌毒素，更具体地涉及一种能够产生的肉毒杆菌毒素组合物中的梭菌属的培养的培养基的培养基组成。根据本发明介质组合物的特征在于它包括一个园被加数水解物，棉籽小麦面筋水解物和一种或多种植物来源的蛋白胨，和猪肉蛋白胨选自水解产物组成的组中。结果表明植物来源的蛋白胨，猪衍生的蛋白胨，以及使用该肉毒杆菌菌株的培养物所包含的介质的矿物组分时，较高的应变速率比仅包含现有的介质和植物来源的蛋白胨培养基中，根据本发明，该介质安全地培养菌株以产生高浓度的肉毒毒素是可能的。

3. 发明授权

KR101723167B1 보툴리눔 독소의 제조를 위한 배지 조성물 有权
标题翻译：一种用于生产肉毒杆菌毒素的中等组合物
公开(公告)号：KR101723167B1
公开(公告)日：2017-04-05
申请号：KR1020150059654
申请日：2015-04-28
申请人： 주식회사 대웅
发明人： 김경윤 , 설혜영 , 민경민
IPC分类号： C12N5/00 , C07K14/33 , C12R1/145
CPC分类号： C12N9/52 , C07K14/33 , C12N1/20 , C12N5/0025 , C12N2500/76 , C12Y304/24069
摘要： 본발명은보툴리눔독소의제조를위한배지조성물에관한것으로, 더욱상세하게는보툴리눔독소를생산할수 있는클로스트리디움속 균주들의배양용배지조성물에관한것이다. 본발명의배지조성물은가든피가수분해물, 목화씨가수분해물및 밀글루텐가수분해물로구성된군에서선택되는하나이상의식물성펩톤을포함하는것을특징으로한다. 본발명에따른식물유래펩톤과미네랄성분이포함된배지를클로스트리디움보툴리눔균주의배양에이용할경우, 기존배지보다약 1.5∼2배높은균주성장률을보였고, 상기배지를이용하여균주를배양하여보툴리눔독소를제조할경우동물유래성분의유입을차단시켜전염성해면상뇌증(Transmissible Spongiform Encephalopathy: TSE) 등과같은감염을예방할수 있다.
摘要翻译：本发明涉及用于生产肉毒杆菌毒素，更具体地涉及一种能够产生的肉毒杆菌毒素组合物中的梭菌属的培养的培养基的培养基组成。根据本发明介质组合物的特征在于它包括至少一种植物蛋白胨选自花园被加数水解物，棉籽水解产物和小麦麸质水解物的组中选择。当使用包含根据本发明的肉毒杆菌菌株的培养基中的植物来源的蛋白胨和矿物质，约1.5至2倍显示出高应变率，肉毒杆菌通过利用介质比常规培养基中培养菌株如果通过阻断动物来源成分的传染性海绵状脑病的流入生产毒素的：可以防止感染，如（传染性海绵状脑病TSE）。

4. 发明公开

KR1020160127999A 보툴리눔 독소의 제조를 위한 배지 조성물 有权
标题翻译：用于制备肉毒杆菌毒素的培养基组成
公开(公告)号：KR1020160127999A
公开(公告)日：2016-11-07
申请号：KR1020150059656
申请日：2015-04-28
申请人： 주식회사 대웅
发明人： 김경윤 , 설혜영 , 민경민
IPC分类号： C12N5/00 , C07K14/33
CPC分类号： C12N9/52 , C07K14/33 , C12N1/20 , C12Y304/24069
摘要： 본발명은보툴리눔독소의제조를위한배지조성물에관한것으로, 더욱상세하게는보툴리눔독소를생산할수 있는클로스트리디움속 균주들의배양용배지조성물에관한것이다. 본발명의배지조성물은가든피가수분해물, 목화씨가수분해물및 밀글루텐가수분해물로구성된군에서선택되는하나이상의식물성펩톤과돼지유래펩톤을포함하는것을특징으로한다. 본발명에따른식물유래펩톤, 돼지유래펩톤및 미네랄성분이포함된배지를클로스트리디움보툴리눔균주의배양에이용할경우, 기존배지와식물유래펩톤만포함된배지보다높은균주성장률을보였고, 상기배지를이용하면안전하게균주를배양하여고농도의보툴리눔독소를제조할수 있다.
摘要翻译：本发明涉及用于生产肉毒杆菌毒素的培养基组合物，更具体地说，涉及用于培养梭菌属的培养基组合物。能够产生肉毒杆菌毒素。本发明的培养基组合物包含猪蛋白胨和至少一种选自花生豌豆水解产物，棉花种子水解物和小麦麸质水解产物的植物来源的蛋白胨。当将含有植物来源的胨，猪胨和矿物质的本发明的培养基用于肉毒杆菌的培养时，培养基中细菌的生长速度高于培养基中培养的培养基目前的用途和包含单独植物来源的胨的培养基。此外，当使用本发明的培养基时，可以通过以安全的方式培养细菌来产生高浓度的肉毒杆菌毒素。

5. 发明公开

KR1020170062694A 보툴리눔 독소의 제조방법 有权
公开(公告)号：KR1020170062694A
公开(公告)日：2017-06-08
申请号：KR1020150168196
申请日：2015-11-30
申请人： 주식회사 대웅
发明人： 김경윤 , 김청세 , 김명섭 , 설혜영
IPC分类号： C07K14/33 , C07K1/16 , C07K1/18 , C07K1/30 , C07K1/34 , C07K1/36 , B01D15/36
CPC分类号： C07K14/33 , B01D15/363 , B01D61/145 , B01D61/147 , B01D61/58 , B01D2315/16
摘要： 본발명은동물유래성분을포함하지않는(Animal Product Free, APF) 공정을통한보툴리눔독소의제조방법에관한것으로, 더욱자세하게는보툴리눔독소생산균주배양액에산을처리하여산 침전시키는단계; 보툴리눔독소를포함하는침전물에완충용액을첨가한다음, 심층여과(depth filtration, DF), 정밀여과(microfiltration, MF), 한외여과(ultrafiltration, UF), 멸균여과(sterile filtration), 멤브레인크로마토그래피(membrane chromatography, MC) 및원심분리(centrifugation)로구성된군에서선택되는하나이상의방법을통해정화(clarification)하는단계; 정화된보툴리눔독소를포함하는용액을 UF 다이아필트레이션(UF diafiltration), 황산암모늄침전, 또는염산침전을수행한다음, 상기 UF 다이아필트레이션의투석유물(retentate)을완충용액에희석하거나, 황산암모늄침전또는염산침전의침전물을완충용액에용해시키는단계; 및희석된투석유물, 황산암모늄침전물의용해물, 또는염산침전물의용해물을음이온교환크로마토그래피(Anion exchange chromatography: AEX)를이용하여보툴리눔독소를정제하는단계; 를포함하는보툴리눔독소의제조방법에대한것이다. 본발명에따른보툴리눔독소의제조방법은동물유래성분의유입이원천적으로차단되어, 전염성해면상뇌증(Transmissible Spongiform Encephalopathy: TSE) 등과같은감염을예방할수 있다. 또한, 본발명의간단한공정으로고순도의보툴리눔독소를제조할수 있으므로매우경제적이고효율적이며, 기존의방법으로생산된보툴리눔독소에비해순도가높아국소작용력이증가하므로부작용으로나타날수 있는보툴리눔독소의전신순환성이낮아져안전성이증가하는장점이있어, 신경근육장애, 주름살제거제, 경직성편마비및 뇌성마비의치료등에다양하게이용될수 있다.

6. 发明授权

KR101729251B1 보툴리눔 독소의 제조를 위한 배지 조성물 有权
标题翻译：一种用于生产肉毒杆菌毒素的中等组合物
公开(公告)号：KR101729251B1
公开(公告)日：2017-04-21
申请号：KR1020150059655
申请日：2015-04-28
申请人： 주식회사 대웅
发明人： 김경윤 , 설혜영 , 민경민
IPC分类号： C12N5/00 , C07K14/33
CPC分类号： A61K39/385 , A61K39/39 , C07K14/33 , C12N1/20
摘要： 본발명은보툴리눔독소의제조를위한배지조성물에관한것으로, 더욱상세하게는보툴리눔독소를생산할수 있는클로스트리디움속 균주들의배양용배지조성물에관한것이다. 본발명의배지조성물은가든피가수분해물, 목화씨가수분해물및 밀글루텐가수분해물로구성된군에서선택되는하나이상의식물성펩톤과카세인가수분해물을포함하는것을특징으로한다. 본발명에따른식물유래펩톤, 카세인가수분해물및 미네랄성분이포함된배지를클로스트리디움보툴리눔균주의배양에이용할경우, 기존배지와식물유래펩톤만포함된배지보다높은균주성장률을보였고, 상기배지를이용하면안전하게균주를배양하여고농도의보툴리눔독소를제조할수 있다.
摘要翻译：本发明涉及用于生产肉毒杆菌毒素，更具体地涉及一种能够产生的肉毒杆菌毒素组合物中的梭菌属的培养的培养基的培养基组成。根据本发明介质组合物的特征在于它包括一个园被加数水解物，棉籽小麦面筋水解产物和一种或多种蔬菜蛋白胨和酪蛋白水解物从由水解产物组成的组中。结果表明植物来源的蛋白胨，酪蛋白水解物，以及使用所述肉毒梭菌菌株的培养物所包含的介质的矿物组分时，较高的应变速率比仅包含现有的介质和植物来源的蛋白胨培养基中，根据本发明，该介质安全地培养菌株以产生高浓度的肉毒毒素是可能的。

7. 发明公开

KR1020160127998A 보툴리눔 독소의 제조를 위한 배지 조성물 有权
标题翻译：用于制备肉毒杆菌毒素的培养基组成
公开(公告)号：KR1020160127998A
公开(公告)日：2016-11-07
申请号：KR1020150059655
申请日：2015-04-28
申请人： 주식회사 대웅
发明人： 김경윤 , 설혜영 , 민경민
IPC分类号： C12N5/00 , C07K14/33
CPC分类号： A61K39/385 , A61K39/39 , C07K14/33 , C12N1/20
摘要： 본발명은보툴리눔독소의제조를위한배지조성물에관한것으로, 더욱상세하게는보툴리눔독소를생산할수 있는클로스트리디움속 균주들의배양용배지조성물에관한것이다. 본발명의배지조성물은가든피가수분해물, 목화씨가수분해물및 밀글루텐가수분해물로구성된군에서선택되는하나이상의식물성펩톤과카세인가수분해물을포함하는것을특징으로한다. 본발명에따른식물유래펩톤, 카세인가수분해물및 미네랄성분이포함된배지를클로스트리디움보툴리눔균주의배양에이용할경우, 기존배지와식물유래펩톤만포함된배지보다높은균주성장률을보였고, 상기배지를이용하면안전하게균주를배양하여고농도의보툴리눔독소를제조할수 있다.
摘要翻译：本发明涉及用于生产肉毒杆菌毒素的培养基组合物，更具体地说，涉及用于培养梭菌属的培养基组合物。能够产生肉毒杆菌毒素。本发明的培养基组合物包含酪蛋白水解物和至少一种选自花生豌豆水解产物，棉籽水解产物和小麦谷蛋白水解产物的植物来源的蛋白胨。当将含有植物来源的胨，酪蛋白水解物和矿物质的本发明的培养基用于肉毒杆菌的培养时，培养基中细菌的生长速率高于培养基中培养的培养基目前的用途和包含单独植物来源的胨的培养基。此外，当使用本发明的培养基时，可以通过以安全的方式培养细菌来产生高浓度的肉毒杆菌毒素。

8. 发明公开

KR1020160127997A 보툴리눔 독소의 제조를 위한 배지 조성물 有权
标题翻译：用于制备肉毒杆菌毒素的培养基组成
公开(公告)号：KR1020160127997A
公开(公告)日：2016-11-07
申请号：KR1020150059654
申请日：2015-04-28
申请人： 주식회사 대웅
发明人： 김경윤 , 설혜영 , 민경민
IPC分类号： C12N5/00 , C07K14/33 , C12R1/145
CPC分类号： C12N9/52 , C07K14/33 , C12N1/20 , C12N5/0025 , C12N2500/76 , C12Y304/24069
摘要： 본발명은보툴리눔독소의제조를위한배지조성물에관한것으로, 더욱상세하게는보툴리눔독소를생산할수 있는클로스트리디움속 균주들의배양용배지조성물에관한것이다. 본발명의배지조성물은가든피가수분해물, 목화씨가수분해물및 밀글루텐가수분해물로구성된군에서선택되는하나이상의식물성펩톤을포함하는것을특징으로한다. 본발명에따른식물유래펩톤과미네랄성분이포함된배지를클로스트리디움보툴리눔균주의배양에이용할경우, 기존배지보다약 1.5∼2배높은균주성장률을보였고, 상기배지를이용하여균주를배양하여보툴리눔독소를제조할경우동물유래성분의유입을차단시켜전염성해면상뇌증(Transmissible Spongiform Encephalopathy: TSE) 등과같은감염을예방할수 있다.
摘要翻译：本发明涉及用于生产肉毒杆菌毒素的培养基组合物，更具体地说，涉及用于培养梭菌属的培养基组合物。能够产生肉毒杆菌毒素。本发明的培养基组合物包含至少一种选自花生豌豆水解物，棉籽粒子水解物和小麦谷蛋白水解物的植物来源的蛋白胨。当将含有植物来源的胨和矿物质的本发明的培养基用于肉毒杆菌的培养时，培养基中细菌的生长速度比培养基中培养基的生长速度高约1.5-2倍目前使用。此外，通过在培养基中培养细菌产生肉毒杆菌毒素时，可以通过阻止动物来源成分的引入来防止传染性海绵状脑病（TSE）等的感染。

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