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1. 发明公开

KR1020080099400A 펩타이드 라이브러리를 이용한 단백질 인산화 효소의기질특이성 분석 방법 有权
标题翻译：通过使用肽库来识别激酶底物特异性的方法
公开(公告)号：KR1020080099400A
公开(公告)日：2008-11-13
申请号：KR1020070044890
申请日：2007-05-09
申请人： 재단법인서울대학교산학협력재단
发明人： 이윤식 , 김병기 , 김은미 , 신동식 , 김윤곤 , 김미라
IPC分类号： C12Q1/00
CPC分类号： C12Q1/485 , C07K1/047 , G01N2333/9121
摘要： An analytical method of analyzing a substrate specificity of a protein phosphatase is provided to determine rapidly the substrate specificity of the protein phosphatase using a peptide library and to apply an analytical method to tyrosine kinase, serine and threonine phosphorylase. An analytical method of analyzing a substrate specificity of a protein phosphatase comprises steps of: i) creating a plurality of peptides at one surface of the supporter resin and manufacturing the peptide library; ii) forming a hybrid of randomizing peptide libraries; iii) reacting phosphorylase in the hybrid of peptide libraries and manufacturing the peptide library which becomes phosphorylation by making specific amino acid of the peptide having the fixed amino acid sequence selectively into a phosphoric acid; iv) reacting an antibody which selectively combines the amino acid becoming the phosphorylation in the peptide library which becoming the phosphorylation and adding a substrate which selectively acts on the reacted mixture; v) selecting only a solid support resin in which the peptide library causing the change of the property exists; and vi) separating the peptide from the separated solid support resin and analyzing an amino acid sequence of the separated peptide.
摘要翻译：提供分析蛋白质磷酸酶底物特异性的分析方法，以便使用肽文库快速测定蛋白质磷酸酶的底物特异性，并对酪氨酸激酶，丝氨酸和苏氨酸磷酸化酶应用分析方法。分析蛋白质磷酸酶的底物特异性的分析方法包括以下步骤：i）在载体树脂的一个表面上产生多个肽并制备肽文库; ii）形成随机多肽文库的杂交体; iii）使肽文库的杂交体中的磷酸化酶反应，并通过使具有固定氨基酸序列的肽的特异性氨基酸选择性地制成磷酸形成磷酸化的肽文库; iv）使成为磷酸化的肽文库中选择性结合成为磷酸化的氨基酸的抗体反应，并加入选择性地作用在反应混合物上的底物; v）仅选择导致该性质改变的肽文库的固体支持树脂; 和vi）从分离的固体支持树脂中分离肽并分析分离的肽的氨基酸序列。

2. 发明授权

KR101440153B1 펩타이드 라이브러리를 이용한 단백질 인산화 효소의기질특이성 분석 방법 有权
标题翻译：使用肽库鉴定激酶底物特异性的方法
公开(公告)号：KR101440153B1
公开(公告)日：2014-09-15
申请号：KR1020070044890
申请日：2007-05-09
申请人： 재단법인서울대학교산학협력재단
发明人： 이윤식 , 김병기 , 김은미 , 신동식 , 김윤곤 , 김미라
IPC分类号： C12Q1/00
CPC分类号： C12Q1/485 , C07K1/047 , G01N2333/9121
摘要： 본 발명은 인산화 효소의 기질특이성 분석 방법에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명은 ⅰ) 하나의 지지체 수지 표면에 아미노산 서열이 서로 동일한 펩타이드들을 다수 개 생성시켜 펩타이드 라이브러리를 제조하는 단계; ⅱ) 아미노산 서열을 달리하면서 ⅰ)단계를 수차례 반복하여 각각의 지지체 수지별로는 아미노산 서열이 서로 상이한, 무작위 펩타이드 라이브러리들의 혼성체를 형성하는 단계; ⅲ) 상기 펩타이드 라이브러리들의 혼성체에 인산화 효소를 반응시켜 인산화된 펩타이드 라이브러리를 제조하는 단계; ⅳ) 포스파타아제 및 퍼옥시다아제 중의 어느 하나가 결합되어 있고 인산화된 아미노산에만 선택적으로 결합하는 항체를 상기 인산화된 펩타이드 라이브러리에 반응시키고, 이 반응 혼합물에 선택적으로 작용하는 기질을 가하는 단계; ⅴ) 상기 포스파타아제 및 퍼옥시다아제 중의 어느 하나와 상기 기질의 반응에 의하여 나타나는 물성의 변화를 감지하여 물성의 변화를 일으킨 펩타이드 라이브러리가 존재하는 고체상 지지체 수지만을 선별해 내는 단계; ⅵ) 상기 분리된 고체상 지지체 수지에서 펩타이드를 분리시키고, 이렇게 분리된 펩타이드의 아미노산 서열을 분석하는 단계를 포함하는, 인산화 효소의 기질특이성 분석 방법에 대한 것이다.
인산화 효소

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