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1. 发明公开

KR1020070085922A 니트릴히드라타제를 발현하는 형질 전환체 无效
标题翻译：变压表达式氮水化合物
公开(公告)号：KR1020070085922A
公开(公告)日：2007-08-27
申请号：KR1020077012947
申请日：2005-12-09
申请人： 아사히 가세이 가부시키가이샤 , 동서석유화학주식회사
发明人： 후루야,가오루 , 다마끼,아끼라 , 나가사와,신이찌로 , 스즈끼,아야노
IPC分类号： C12N15/09 , C12N9/88 , C12N1/21 , C12P13/02
CPC分类号： C12P13/02 , C12N1/20 , C12N9/88
摘要： A novel microorganism is provided to express nitrile hydratase showing high stability on heat or highly concentrated nitrile and amide compounds, thereby capable of efficiently converting the nitrile compound into the corresponding compound. The Rhodococcus microorganism is transformed by DNA described by either (A) or (B), wherein the Rhodococcus microorganism is Rhodococcus rhodochrous M33 strain(VKM Ac-1515D or KCCM-10635) and/ or a mutant thereof. The DNA (A) comprises an amino acid sequence described at a SEQ ID : NO. 1 of a sequence list corresponding to an alpha sub-unit of nitrile hydratase or a sequence coding an amino acid sequence having at least one substitution, deletion or addition of amino acid in the amino acid sequence described at the SEQ ID : NO. 1 of the sequence list, and an amino acid sequence described at a SEQ ID : NO. 2 of the sequence list corresponding to a beta sub-unit of the nitrile hydratase or a sequence coding an amino acid sequence having at least one substitution, deletion or addition of amino acid in the amino acid sequence described at the SEQ ID : NO. 2 of the sequence list; and codes a protein having the nitrile hydratase activity. The DNA (B) comprises a sequence from 695th to 1312th of a SEQ ID : NO. 3 of the sequence list corresponding to a sequence coding the alpha sub-unit of the nitrile hydratase or a sequence hybridizing the corresponding sequence under strict condition, a sequence from 1st to 681st of the SEQ ID : NO. 3 of the sequence list corresponding to a sequence coding the beta sub-unit of the nitrile hydratase or a sequence hybridizing the corresponding sequence under strict condition; and codes a protein having the nitrile hydratase activity.
摘要翻译：提供了一种新型微生物来表达在热或高浓度腈和酰胺化合物上表现出高稳定性的腈水合酶，从而能够有效地将腈化合物转化成相应的化合物。红球菌微生物由（A）或（B）所述的DNA转化，其中红球菌属微生物是玫瑰色红球菌M33菌株（VKM Ac-1515D或KCCM-10635）和/或其突变体。 DNA（A）包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。 1是对应于腈水合酶的α亚单位的序列表或编码在SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列中具有至少一个氨基酸取代，缺失或添加的氨基酸序列的序列。 1，以及SEQ ID NO：1所述的氨基酸序列。 2对应于腈水合酶的β亚单位的序列表或编码在SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列中具有至少一个氨基酸取代，缺失或添加的氨基酸序列的序列。序列表2; 并编码具有腈水合酶活性的蛋白质。 DNA（B）包含SEQ ID NO：6的第695位至第1312位的序列。 3是与编码腈水合酶的α亚单位的序列相对应的序列表，或在严格条件下与相应序列杂交的序列，SEQ ID NO：1〜681的序列。 3对应于编码腈水合酶的β亚单位的序列或在严格条件下杂交相应序列的序列; 并编码具有腈水合酶活性的蛋白质。

2. 发明授权

KR100806991B1 신규 니트릴 히드라타아제 有权
标题翻译：新的腈水合酶
公开(公告)号：KR100806991B1
公开(公告)日：2008-02-25
申请号：KR1020057023755
申请日：2004-06-10
申请人： 아사히 가세이 가부시키가이샤
发明人： 후루야,가오루 , 다마끼,아끼라 , 나가사와,신이찌로 , 스즈끼,아야노
IPC分类号： C12N15/09 , C12P13/02
CPC分类号： C12Y402/01084 , C12N9/88
摘要： 본 발명의 목적은 열 안정성에 부가해서, 또한 기질인 니트릴 화합물이나 생성물인 아미드 화합물의 고농도 존재하에서도 높은 활성을 유지하는 니트릴 히드라타아제를 이용한 아미드 화합물의 제조 방법을 제공하는 것이다. 본 발명에서는 자연계에서 목적하는 니트릴 히드라타아제를 발현하는 신규 미생물을 탐색하여, 상기 미생물 균체 및 그 균체 처리물을 제조에 이용하는 동시에, 상기 유전자를 클로닝하여 이종 미생물로 발현하는 재조합 미생물을 제작했다. 본 발명에 의하면 고온 조건 하, 및 고농도의 니트릴 화합물 또는 고농도의 아미드 화합물의 존재하의 반응에서도 니트릴 화합물을 대응하는 아미드 화합물로 효율적으로 변환시키는 것이 가능해진다.
열 안정성, 미생물 균체, 균체 처리물, 재조합 미생물, 염기 서열, 형질전환, 니트릴 히드라타아제, 니트릴 화합물, 아미드 화합물
摘要翻译：除了本发明的热稳定性的目的，也能下的基板，腈化合物或酰胺化合物产物的存在的高浓度也提供了一种通过使用腈其他氮杂维持高活性生产酰胺化合物的方法。在本发明中，要搜索的新的微生物，其表达腈另一种感兴趣的激酶在自然界中，微生物细胞，并将细胞在用于生产的同时进行处理，以制备重组微生物中克隆和表达以两种微生物基因的。根据本发明，它能够有效地转换成高温度条件下，与对应于高浓度的腈化合物或腈的酰胺化合物的反应化合物下在存在高浓度的酰胺化合物。

3. 发明公开

KR1020060016115A 신규 니트릴 히드라타아제 有权
标题翻译：新型NITRILE HYDRATASE
公开(公告)号：KR1020060016115A
公开(公告)日：2006-02-21
申请号：KR1020057023755
申请日：2004-06-10
申请人： 아사히 가세이 가부시키가이샤
发明人： 후루야,가오루 , 다마끼,아끼라 , 나가사와,신이찌로 , 스즈끼,아야노
IPC分类号： C12N15/09 , C12P13/02
CPC分类号： C12Y402/01084 , C12N9/88
摘要： A process for producing an amide compound with the use of a nitrile hydratase of high thermal stability capable of maintaining high activity even in the presence of high-concentration nitrile compound as a substrate and amide compound as a product. A recombinant microbe was produced by searching for a novel microbe capable of expression of the desired nitrile hydratase in nature, obtaining relevant gene from cells of the microbe or treatment product thereof, performing cloning of the gene and introducing the same in a different type of microbe for expression. With the use thereof, nitrile compounds can be efficiently converted to corresponding amide compounds even by the reaction conducted at high temperature and in the presence of high-concentration nitrile compounds and high-concentration amide compounds.
摘要翻译：使用具有高热稳定性的腈水合酶的酰胺化合物的制备方法，即使在高浓度腈化合物作为底物和酰胺化合物作为产品的存在下也能保持高活性。通过寻找能够表达所需腈水合酶本身的新型微生物，从微生物细胞或其处理产物获得相关基因，进行基因克隆并将其引入不同类型的微生物中来产生重组微生物为表达。通过使用，腈化合物即使通过在高温下进行的反应和高浓度腈化合物和高浓度酰胺化合物的存在下也可有效地转化为相应的酰胺化合物。

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