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    • 21. 发明公开
    • 니트릴히드라타제를 발현하는 형질 전환체
    • 变压表达式氮水化合物
    • KR1020070085922A
    • 2007-08-27
    • KR1020077012947
    • 2005-12-09
    • 아사히 가세이 가부시키가이샤동서석유화학주식회사
    • 후루야,가오루다마끼,아끼라나가사와,신이찌로스즈끼,아야노
    • C12N15/09C12N9/88C12N1/21C12P13/02
    • C12P13/02C12N1/20C12N9/88
    • A novel microorganism is provided to express nitrile hydratase showing high stability on heat or highly concentrated nitrile and amide compounds, thereby capable of efficiently converting the nitrile compound into the corresponding compound. The Rhodococcus microorganism is transformed by DNA described by either (A) or (B), wherein the Rhodococcus microorganism is Rhodococcus rhodochrous M33 strain(VKM Ac-1515D or KCCM-10635) and/ or a mutant thereof. The DNA (A) comprises an amino acid sequence described at a SEQ ID : NO. 1 of a sequence list corresponding to an alpha sub-unit of nitrile hydratase or a sequence coding an amino acid sequence having at least one substitution, deletion or addition of amino acid in the amino acid sequence described at the SEQ ID : NO. 1 of the sequence list, and an amino acid sequence described at a SEQ ID : NO. 2 of the sequence list corresponding to a beta sub-unit of the nitrile hydratase or a sequence coding an amino acid sequence having at least one substitution, deletion or addition of amino acid in the amino acid sequence described at the SEQ ID : NO. 2 of the sequence list; and codes a protein having the nitrile hydratase activity. The DNA (B) comprises a sequence from 695th to 1312th of a SEQ ID : NO. 3 of the sequence list corresponding to a sequence coding the alpha sub-unit of the nitrile hydratase or a sequence hybridizing the corresponding sequence under strict condition, a sequence from 1st to 681st of the SEQ ID : NO. 3 of the sequence list corresponding to a sequence coding the beta sub-unit of the nitrile hydratase or a sequence hybridizing the corresponding sequence under strict condition; and codes a protein having the nitrile hydratase activity.
    • 提供了一种新型微生物来表达在热或高浓度腈和酰胺化合物上表现出高稳定性的腈水合酶,从而能够有效地将腈化合物转化成相应的化合物。 红球菌微生物由(A)或(B)所述的DNA转化,其中红球菌属微生物是玫瑰色红球菌M33菌株(VKM Ac-1515D或KCCM-10635)和/或其突变体。 DNA(A)包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。 1是对应于腈水合酶的α亚单位的序列表或编码在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中具有至少一个氨基酸取代,缺失或添加的氨基酸序列的序列。 1,以及SEQ ID NO:1所述的氨基酸序列。 2对应于腈水合酶的β亚单位的序列表或编码在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中具有至少一个氨基酸取代,缺失或添加的氨基酸序列的序列。 序列表2; 并编码具有腈水合酶活性的蛋白质。 DNA(B)包含SEQ ID NO:6的第695位至第1312位的序列。 3是与编码腈水合酶的α亚单位的序列相对应的序列表,或在严格条件下与相应序列杂交的序列,SEQ ID NO:1〜681的序列。 3对应于编码腈水合酶的β亚单位的序列或在严格条件下杂交相应序列的序列; 并编码具有腈水合酶活性的蛋白质。
    • 23. 发明公开
    • 로도코커스 로도크로스(Rhodococcusrhodochrous) M33 VKM Ac-1515D로부터유래된 니트릴 히드라타제를 코딩하는 유전자 및 이유전자를 함유한 형질전환체
    • 从RHODOCOCCUS RHODOCHROUS M33 VKMAC-1515D衍生的NITRILE HYDRATASE基因,含有它的转化体和使用转化体生产氨基酸的方法
    • KR1020010047310A
    • 2001-06-15
    • KR1019990051474
    • 1999-11-19
    • 동서석유화학주식회사
    • 이현환현형환
    • C12N15/31C12N15/62
    • C12N15/70C07K14/24C12N15/62
    • PURPOSE: A nitrile hydratase gene derived from Rhodococcus rhodochrous M33 VKMAc-1515D, transformants containing the same and a method for producing amides using the transformants are provided, thereby amides can be mass produced from nitrile. CONSTITUTION: The nitrile hydratase gene represented by sequence ID No. 13 described as in the description is separated by the following steps of: incubating Rhodococcus rhodochrous M33, collecting the cells, crushing the cells, and developing the cell crushed solution on SDS-electrophoresis to isolate beta-subunit of nitrile hydratase. The transformants containing the nitrile hydratase gene is prepared by the steps of: preparing primers for amplifying the nitrile hydratase gene; amplifying the nitrile hydratase gene isolated from Rhodococcus rhodochrous M33 by PCR using the primers; cleaving the amplified nitrile hydratase gene; preparing plasmids pSH1, pSH4, pGEX-1, pREX-1 and p8-47; transforming E. coli with the plasmids to produce Rhodococcus rhodochrous pEK-5.8. The amides is produced by incubating the transformant Rhodococcus rhodochrous pEK-5.8 in an appropriate medium.
    • 目的:提供从Rhodococcus rhodochrous M33 VKMAc-1515D得到的腈水合酶基因,使用该转化体的转化体和使用该转化体的酰胺的制造方法,由此酰胺可以由腈大量生产。 构成:通过以下步骤分离由描述中描述的序列号13表示的腈水合酶基因:在SDS-电泳上孵育玫瑰色红球菌M33,收集细胞,破碎细胞,培养细胞破碎溶液 分离腈水合酶的β-亚基。 通过以下步骤制备含有腈水合酶基因的转化体:制备用于扩增腈水合酶基因的引物; 使用引物通过PCR扩增从Rhodococcus rhodochrous M33分离的腈水合酶基因; 切割扩增的腈水合酶基因; 制备质粒pSH1,pSH4,pGEX-1,pREX-1和p8-47; 用质粒转化大肠杆菌以产生玫瑰色红球菌pEK-5.8。 酰胺通过将转化体玫瑰色红球菌红霉素pEK-5.8在合适的培养基中孵育来制备。
    • 25. 发明公开
    • 에틸렌디아민4아세트산2나트륨염의 제조방법
    • 乙二胺四乙酸二钠的制备方法
    • KR1019990084382A
    • 1999-12-06
    • KR1019980016101
    • 1998-05-06
    • 동서석유화학주식회사
    • 진호환허종필
    • C07F1/04
    • 본 발명은 40wt%의 조-에틸렌디아민4아세트산4나트륨염 수용액으로부터 에틸렌디아민4아세트산2나트륨염을 고수율로 얻는 방법에 관한 것이다.
      일반적으로 EDTA·2Na는 조-EDTA·4Na 수용액에 염산 등의 산을 가하여 pH 3.0∼5.0으로 조정하여 얻는 방법과 조-EDTA·4Na에 염산 등의 산을 가하여 pH 2.0 이하로 조정하여 물에 불용인 에틸렌디아민4아세트산(EDTA)을 얻은 후 여기에 2당량의 가성소오다를 가하여 얻는 방법이 있다.
      그러나 pH를 조정하여 얻는 방법에서는 EDTA·2Na의 물에 대한 높은 용해성으로 수세시 제품손실이 커서 수율이 약 60wt%로 매우 낮으며 또한 여액중에 용해된 EDTA·2Na는 다시 회수하기 위하여 부가의 공정이 필요하고 후자의 방법은 EDTA 제조시 많은 량의 NaCl 함유 폐수가 발생함은 물론 가성소오다를 추가로 첨가함으로서 제조 비용이 과다하게 되는 단점이 있다.
      본 발명 방법에서는 조-EDTA·4Na 수용액에 염산 등의 산을 가하여 pH를 3.0∼5.0으로 조정한 후 메탄올, 에탄올 혹은 이들 혼합용액과 같은 알콜류를 가하여 EDTA·2Na의 용해도를 낮추어 조-EDTA·4Na 기준 EDTA·2Na 회수율을 90∼99wt%로 향상시킬 수 있었다.
    • 30. 发明公开
    • 아크릴로니트릴 제조공정의 공정 폐액에 함유된 유안의 회수방법
    • 回收丙烯腈生产过程废液中所含油脂的方法
    • KR1019980037265A
    • 1998-08-05
    • KR1019960055990
    • 1996-11-21
    • 동서석유화학주식회사
    • 이상현박근수
    • C07C253/32C07C255/08
    • 본 발명은 아크릴로니트릴 제조 공정에서 발생되는 공정폐액중에 용해되어 있는 유안을 고온에서 증발, 농축, 결정화시켜 회수하는 방법에 관한 것이다.
      본 발명의 유안 회수방법은 급냉탑 하부에서 배출된 공정폐액을 예비증발기에서 온도 105℃∼110℃로 가열하여 저비점물질을 증발시키고, 농축된 유안 함유 원액을 혼합조에서 유기 중합물 분리기 및 원심분리기에서 회송된 모약과 혼합하고, 혼합용액을 결정기 상부 증발기에서 온도 105℃∼110℃ 및 상압하에서 농축하고, 농축용액을 결정기에서 동일한 온도와 압력을 유지하면서 유안을 결정화시키고, 결정기 상부에서 분리된 유기 중합물을 분리한 다음 유기 중합물 분리기 상부에서 재분리하고, 결정기 하부에 남아 있는 유안 슬러리를 원심분리게에서 모액과 분리하고, 분리된 유안 결정을 콘베이어에서 운송하며 건조시키는 단계로 이루어진다.
      본 발명의 방법은 복잡한 설비가 필요없이 간단한 공정으로 공정폐액을 처리할 수 있어서 부대 시설이나 동력비의 절감에 큰 효과가 있고, 유안을 고순도로 얻을 수 있어서 자원의 재활용 측면에서도 바람직하다.