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    • 20. 发明授权
    • 보툴리눔 독소의 제조방법
    • 肉毒杆菌毒素的制造方法
    • KR101775682B1
    • 2017-09-06
    • KR1020150168196
    • 2015-11-30
    • 주식회사 대웅
    • 김경윤김청세김명섭설혜영
    • C07K14/33C07K1/16C07K1/18C07K1/30C07K1/34C07K1/36B01D15/36
    • C07K14/33B01D15/363B01D61/145B01D61/147B01D61/58B01D2315/16
    • 본발명은동물유래성분을포함하지않는(Animal Product Free, APF) 공정을통한보툴리눔독소의제조방법에관한것으로, 더욱자세하게는보툴리눔독소생산균주배양액에산을처리하여산 침전시키는단계; 보툴리눔독소를포함하는침전물에완충용액을첨가한다음, 심층여과(depth filtration, DF), 정밀여과(microfiltration, MF), 한외여과(ultrafiltration, UF), 멸균여과(sterile filtration), 멤브레인크로마토그래피(membrane chromatography, MC) 및원심분리(centrifugation)로구성된군에서선택되는하나이상의방법을통해정화(clarification)하는단계; 정화된보툴리눔독소를포함하는용액을 UF 다이아필트레이션(UF diafiltration), 황산암모늄침전, 또는염산침전을수행한다음, 상기 UF 다이아필트레이션의투석유물(retentate)을완충용액에희석하거나, 황산암모늄침전또는염산침전의침전물을완충용액에용해시키는단계; 및희석된투석유물, 황산암모늄침전물의용해물, 또는염산침전물의용해물을음이온교환크로마토그래피(Anion exchange chromatography: AEX)를이용하여보툴리눔독소를정제하는단계; 를포함하는보툴리눔독소의제조방법에대한것이다. 본발명에따른보툴리눔독소의제조방법은동물유래성분의유입이원천적으로차단되어, 전염성해면상뇌증(Transmissible Spongiform Encephalopathy: TSE) 등과같은감염을예방할수 있다. 또한, 본발명의간단한공정으로고순도의보툴리눔독소를제조할수 있으므로매우경제적이고효율적이며, 기존의방법으로생산된보툴리눔독소에비해순도가높아국소작용력이증가하므로부작용으로나타날수 있는보툴리눔독소의전신순환성이낮아져안전성이증가하는장점이있어, 신경근육장애, 주름살제거제, 경직성편마비및 뇌성마비의치료등에다양하게이용될수 있다.
    • 本发明包括酸沉淀过程的步骤的酸是,更具体的肉毒毒素的菌株培养液涉及用于制备肉毒毒素与不含有动物来源的成分(不含动物产物,APF)处理的过程; 通过加入缓冲溶液中以沉淀包含肉毒杆菌毒素,然后,深度过滤(深度过滤,DF),微滤(微滤,MF),超滤(超滤,UF),无菌过滤(无菌过滤),膜色谱法( 通过选自膜层析(MC)和离心的一种或多种方法进行澄清; 含有纯化的A型肉毒毒素UF隔膜过滤(UF渗滤),硫酸铵沉淀的溶液,或通过进行酸沉淀,然后,用缓冲溶液或硫酸铵稀释透析伪影的UF过滤金刚石(渗余物) 将沉淀物沉淀物或盐酸沉淀物溶解在缓冲溶液中; 和稀释透析工件,硫酸铵沉淀生物医学海鲜,或盐酸,使用(阴离子交换层析AEX)纯化的肉毒杆菌毒素的沉淀生物医学海鲜阴离子交换层析; 生产肉毒杆菌毒素的方法。 根据本发明的动物衍生的组分的入口肉毒毒素的制备方法是从根本上阻止,传染性海绵状脑病:它可以防止感染,如(传染性海绵状脑病TSE)。 此外,由于它可以通过本发明的一个简单的过程制造高纯度肉毒毒素是非常经济和有效的,纯度高于由肉毒毒素局部作用的力常规方法生产的增加,因为肉毒毒素在natanalsu副作用城堡全身循环 这是一个优点,即安全性增加越低,它可以进行各种用于神经肌肉障碍,去除皱纹,痉挛性偏瘫和脑瘫的治疗。