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    • 7. 发明公开
    • 一组重组单纯疱疹病毒的构建及其用途
    • CN1461805A
    • 2003-12-17
    • CN02117965.4
    • 2002-05-27
    • 本元正阳基因技术股份有限公司
    • 吴小兵曹晖董小岩
    • C12N7/01C12N15/09
    • 腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)载体因其安全、稳定性好、表达时间长、感染细胞谱广且可以感染非分裂的细胞等特点,已经成为发展最快和最有希望的基因治疗的病毒载体。以往AAV载体都是以AAV血清型2型(AAV2)为基础构建的。近几年的研究发现,在一些组织中的感染效率较低;另外,人体对AAV的感染会产生中和抗体,在正常人群中有85%存在针对各种AAV、主要是针对AAV2的抗体。这些大大影响了AAV载体在基因治疗中的应用。AAV病毒在自然界目前发现有6种血清型,分别命名为AAV1、2、3、4、5、6。它们在表达与复制有关蛋白的基因rep中的同源性较高,而在表达外壳蛋白的cap基因存在或大或小的差异,从而造成了这六种血清型AAV的感染特性和抗原性有许多不同。因此,使用不同血清型的AAV病毒外壳,可以赋予AAV载体针对不同人体组织细胞都有相对较高的感染效率,并且在人体已经产生针对某一血清型AAV载体的中和抗体时,可以使用另一种血清型AAV载体,从而进一步提高AAV载体的感染效率。本发明的目的是提出用于生产AAV1、3、4、5、6等5种血清型AAV载体的辅助病毒。本发明提出的5株重组1型单纯疱疹病毒(rHSV),(分别为HSV-r2c1、HSV-r2c3、HSV-r2c4、HSV-r2c5、HSV-r2c6),它们基因组中分别插入了腺相关病毒(AAV)血清型2(AAV2)的rep基因和血清型1(AAV1)、3(AAV3)、4(AAV4)、5(AAV5)6(AAV6)的cap基因。将这些重组单纯疱疹病毒感染细胞,可以分别生产出具有1、3、4、5、6血清型的重组AAV病毒载体(rAAVs)。本发明的特点是:第一,高效生产AAV1、3、4、5、6载体;第二,使用AAV2载体的包装细胞,免去了重新构建包装细胞的麻烦。