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1. 发明公开

CN1672049A BT－CRY毒素的迅速检测失效
公开(公告)号：CN1672049A
公开(公告)日：2005-09-21
申请号：CN03817641.6
申请日：2003-05-29
申请人：印度农业研究委员会
发明人： K·R·克兰西
IPC分类号： G01N33/53 , G01N33/538 , G01N33/566 , G01N33/68
CPC分类号： G01N33/68 , G01N2333/325
摘要：本发明基于使用1)抗两种Cry毒素的2个多克隆IgG，2)从鳞翅目幼虫分离的Cry毒素受体以及3)制造免疫层析带的手工剥离方法，该层析带用于检测多种分析物。免疫层析带促进迅速检测分析物，如果用单克隆抗体产生带则费用贵且印度农民和推广人员不能承受。本发明的主要目的是简化检测Cry(Bt)毒素的免疫层析检测方法，使用特异于分析物的亲和纯化多克隆抗体，也提供一种在印度社会中适用于制造“Cry1Ac/Cry1Ab/Cry2Aa/Cry2Ab毒素”检测带的费用可接受且有力而简便的方法。抗Bt(抗Cry1Ac或抗Cry2Aa/Ab或两者)抗体或Cry受体蛋白通过手工剥离固定于硝酸纤维素膜。用酪蛋白或BSA和防腐剂封闭膜。抗Bt(抗Cry1Ac或抗Cry2Aa/Ab或两者)抗体用金标记并吸收在玻璃纤维膜上，此膜置于硝酸纤维素膜底部以重叠2mm。由于使用两种不同动物(山羊和兔)中培养的抗原亲和和蛋白A亲和纯化多克隆IgG，测定的特异性和精确性大为提高。Cry毒素检测侧向流动带的原理图示于所附图。因而产生的带代表迅速、敏感的装置和方法，用于检测Cry1Ac/Cry1Ab/Cry2Aa/Cry2Ab和结晶毒素的存在，它们来自转基因植物或在Bt－发酵产物中。方法和装置有高敏感性用于同时检测单一带上的一种或两种Cry毒素。使用本发明提供测定系统，系统含最少数量的步骤，即使由未经训练的人使用也产生可靠结果。

2. 发明授权

CN100403028C BT－CRY毒素的迅速检测失效
公开(公告)号：CN100403028C
公开(公告)日：2008-07-16
申请号：CN03817641.6
申请日：2003-05-29
申请人：印度农业研究委员会
发明人： K·R·克兰西
IPC分类号： G01N33/53 , G01N33/538 , G01N33/566 , G01N33/68
CPC分类号： G01N33/68 , G01N2333/325
摘要：本发明基于使用1)抗两种Cry毒素的2个多克隆IgG，2)从鳞翅目幼虫分离的Cry毒素受体以及3)制造免疫层析带的手工剥离方法，该层析带用于检测多种分析物。免疫层析带促进迅速检测分析物，如果用单克隆抗体产生带则费用贵且印度农民和推广人员不能承受。本发明的主要目的是简化检测Cry(Bt)毒素的免疫层析检测方法，使用特异于分析物的亲和纯化多克隆抗体，也提供一种在印度社会中适用于制造“Cry1 Ac/Cry 1Ab/Cry2 Aa/Cry2 Ab毒素”检测带的费用可接受且有力而简便的方法。抗Bt(抗Cry1 Ac或抗Cry2 Aa/Ab或两者)抗体或Cry受体蛋白通过手工剥离固定于硝酸纤维素膜。用酪蛋白或BSA和防腐剂封闭膜。抗Bt(抗Cry1 Ac或抗Cry2 Aa/Ab或两者)抗体用金标记并吸收在玻璃纤维膜上，此膜置于硝酸纤维素膜底部以重叠2mm。由于使用两种不同动物(山羊和兔)中培养的抗原亲和和蛋白A亲和纯化多克隆IgG，测定的特异性和精确性大为提高。Cry毒素检测侧向流动带的原理图示于所附图。因而产生的带代表迅速、敏感的装置和方法，用于检测Cry1 Ac/Cry 1Ab/Cry2 Aa/Cry2 Ab和结晶毒素的存在，它们来自转基因植物或在Bt-发酵产物中。方法和装置有高敏感性用于同时检测单一带上的一种或两种Cry毒素。使用本发明提供测定系统，系统含最少数量的步骤，即使由未经训练的人使用也产生可靠结果。

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