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    • 2. 发明申请
    • METHOD AND SYSTEM OF PRODUCING A LIBRARY OF MICROORGANISMS
    • WO2021254958A1
    • 2021-12-23
    • PCT/EP2021/065961
    • 2021-06-14
    • BIOMILLENIA SAS
    • DU, GuanshengTHOMAS, LaurineDAJKOVIC, AleksanderLOEFFERT, Dirk
    • B01L3/00C12M1/34C40B50/08C40B60/14C12Q1/02C12M1/12C12M1/00G01N15/14C12M3/06C40B40/02C40B60/08G01N15/00B01L2200/0652B01L2200/12B01L3/502784C12M23/16C12M25/01C12M41/46G01N15/1459G01N2015/003G01N2015/149
    • In a first aspect, the present invention relates to a method of producing a library of microorganisms, the method comprising the steps of: a. providing a first fluid comprising at least one single cell, b. dispersing said first fluid comprising at least one single cell in a second fluid, thereby obtaining a plurality of single-layer microfluidic droplets, wherein at least one single- layer microfluidic droplet comprises at least one single cell, wherein the second fluid is immiscible with the first fluid, c. optionally, adding to said at least one single-layer microfluidic droplet a third fluid comprising a sensing compound, wherein the third fluid is miscible with said first fluid, and wherein the third fluid is immiscible with said second fluid, d. injecting said at least one single-layer microfluidic droplet optionally comprising the sensing compound into a fourth fluid, wherein said fourth fluid is immiscible with said second fluid, thereby obtaining at least one double-layer microfluidic droplet, e. dispensing said at least one double-layer microfluidic droplet into a culture medium based on the viability of the cell, f. incubating said culture medium, thereby obtaining said library. In a second aspect, the present invention relates to a system comprising: a. a first microfluidic chip for producing a plurality of single-layer microfluidic droplets wherein at least one single-layer microfluidic droplet comprisesat least one single cell, b. a first microfluidic device for collecting said plurality of single-layer microfluidic droplets, c. a second device for adding a sensing compound into said at least one single-layer microfluidic droplet comprising at least one single cell, d. a second microfluidic chip for producing a double-layer microfluidic droplet, and e. a dispensing unit. In a third aspect, the present invention relates to the use of the method according to the first aspect of the present invention in a system according to the second aspect of the present invention.
    • 5. 发明申请
    • 인간 줄기세포 유래 심근세포를 이용한 약물의 심장 안전성 평가 방법
    • WO2022239960A1
    • 2022-11-17
    • PCT/KR2022/004331
    • 2022-03-28
    • (주)넥셀
    • 우동훈안지은김수빈윤슬기연승희장진혁
    • G01N33/50C12M1/34G01N27/327C12M41/46G01N33/5061
    • 본 발명은 인간 전분화능 줄기세포 유래 심근세포를 이용한 약물의 심장 안전성 평가 방법에 관한 것으로, 인간 줄기세포를 배양하여 심근세포로 분화시켜 준비하는 A단계; 피브로넥틴(Fibronectin)을 DPBS(Dulbecco's phosphate buffered saline)를 이용해 50μg/ml의 농도로 희석시키는 B단계; 상기 B단계를 통해 50μg/ml의 농도로 희석된 피브로넥틴 희석액을 MEA(Multielectrode arrays) 플레이트(Plate)에 다수개로 배열된 각 웰(Well) 중앙에 구비된 전극(Electrode)의 모든 도트(Dots)들을 덮도록 첨가하고, 상기 MEA 플레이트의 웰 사이 공간에 DPBS를 첨가하여 채우는 C단계; 상기 C단계를 통해 웰과 웰 사이 공간에 각각 피브로넥틴 희석액과 DPBS가 첨가된 상기 MEA 플레이트를 37℃의 온도 환경 및 5%의 CO2 환경을 갖춘 세포 배양기에 넣어 50분 내지 60분간 코팅 진행하는 D단계; A단계를 통해 준비된 인간 줄기세포 유래 심근세포를 상기 D단계를 통해 코팅 진행이 완료된 상기 MEA 플레이트의 특정 웰에서 피브로넥틴 희석액을 제거 후 전극의 모든 도트(Dots)들을 덮도록 파종(Seeding)하는 E단계; 상기 E단계를 통해 인간 줄기세포 유래 심근세포가 파종된 상기 MEA 플레이트의 웰의 특정 웰에 소정의 배지(Medium)를 추가적으로 첨가한 뒤 상기 MEA 플레이트를 세포배양기 내에서 배양하는 F단계; 및 상기 F단계를 통해 소정의 기간 동안 배양을 거친 상기 MEA 플레이트의 인간 줄기세포 유래 심근세포가 파종된 웰들 각각에 평가 대상 약물의 첨가유무 및 첨가농도에 따른 Beat Rate, Spike Amplitude 및 Field Potential Duration에 관한 정보값의 변화를 상기 MEA 플레이트의 각각의 웰 내에 구비된 전극(Electrode)과 전기적으로 연결된 MEA(Multielectrode arrays) 측정기기를 이용해 측정하고, 측정된 정보값들을 기반으로 상기 평가 대상 약물의 심장 안전성을 평가하는 G단계;를 포함한다.