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    • 2. 发明专利
    • Detección de dianas usando marcas de masa y espectrometría de masas
    • ES2676183T3
    • 2018-07-17
    • ES11731604
    • 2011-07-01
    • VENTANA MED SYST INC
    • HONG RUIWANG HONGLEFEVER MARKFROEHLICH JANBIENIARZ CHRISTOPHERKELLY BRIAN DANIELMILLER PHILLIP
    • A61K49/00C12Q1/28G01N33/532G01N33/543G01N33/58G01N33/68
    • Un procedimiento que comprende: (a) proporcionar una muestra de tejido fijado con formol e incluido en parafina que comprende una pluralidad de dianas; (b) poner en contacto la muestra de tejido con un primer resto de unión específica que puede reconocer y unirse a una primera diana en la muestra de tejido y un segundo resto de unión específica que puede reconocer y unirse a una segunda diana en la muestra de tejido; (c) poner en contacto la muestra de tejido con un primer conjugado que comprende una primera enzima y un primer anticuerpo que puede reconocer y unirse al primer resto de unión específica; (d) poner en contacto la muestra de tejido con un primer resto de sustrato enzimático y un primer precursor de marca de masa, en el que el primer resto de sustrato enzimático reacciona con la primera enzima y el primer precursor de marca de masa para producir y depositar una primera marca de masa en la primera diana; (e) desactivar la primera enzima; (f) poner en contacto la muestra de tejido con un segundo conjugado que comprende una segunda enzima y un segundo anticuerpo que puede reconocer y unirse al segundo resto de unión específica; (g) poner en contacto la muestra de tejido con un segundo resto de sustrato enzimático y un segundo precursor de marca de masa, en el que el segundo resto de sustrato enzimático reacciona con la segunda enzima y el segundo precursor de marca de masa para producir y depositar una segunda marca de masa en la segunda diana, en el que el primer y segundo restos de sustrato enzimático tienen la misma estructura química, el primer y segundo precursores de marcas de masa tienen la misma estructura química y al menos uno del primer precursor de marca de masa o segundo precursor de marca de masa está radiomarcado de modo que la primera marca de masa y la segunda la marca de masa difieren en masa; (h) ionizar la primera marca de masa y la segunda marca de masa para producir un primer código de masa y un segundo código de masa, en el que cada código de masa tiene la misma estructura química pero difiere en masa de cualquier otro código de masa producido a partir de cualquier otra marca de masa; (i) detectar cada código de masa usando un espectrómetro de masas; y (j) cuantificar relativamente cada diana cuantificando una cantidad de cada código de masa midiendo un pico de espectrometría de masas que tiene una proporción m/z correspondiente a una proporción m/z esperada de ese código de masa.