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1. 发明申请

WO2010103010A1 QUANTIFIZIERUNG VON NUKLEINSÄUREN 审中-公开
标题翻译：核酸定量
公开(公告)号：WO2010103010A1
公开(公告)日：2010-09-16
申请号：PCT/EP2010/052989
申请日：2010-03-09
申请人： QIAGEN GMBH , FANG, Nan , MISSEL, Andreas , LÖFFERT, Dirk
发明人： FANG, Nan , MISSEL, Andreas , LÖFFERT, Dirk
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/6806 , C12Q2521/325
摘要： Beschrieben wird ein Verfahren zur Quantifizierung von einer oder mehrerer Nukleinsäuren in einer Probe. Das Verfahren umfasst dabei die Schritte Bereitstellung einer Probe enthaltend mindestens eine zu quantifizierende Nukleinsäure, Zugabe einer Oligonukleotidsonde zur Probe, wobei die Oligonukleotidsonde eine Sequenz umfasst, die spezifisch an die zu quantifizierende Nukleinsäure bzw. an eine gemeinsame Sequenz der zu quantifizierenden Nukleinsäuren hybridisieren kann, Inkubation unter Bedingungen, die das Hybridisieren der Oligonukleotidsonde an die zu quantifizierende Nukleinsäure(n) erlauben, Inkubation der Probe unter Bedingungen, die die Verlängerung von hybridisierten Sonden erlauben, wobei jeweils die zu quantifizierende(n) Nukleinsäure(n) als Template dienen, Entfernung der nicht-hybridisierten Sonden aus der Probe und Quantifizierung der hybridisierten Oligonukleotidsonden als Maß für die Menge der zu quantifizierenden Nukleinsäure(n). Die Erfindung betrifft auch einen Kit zur Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens.
摘要翻译：公开了一种用于一个或多个核酸的样品中的量化的方法。该方法包括提供含有至少一种核酸的样品的步骤，以进行量化，另外的寡核苷酸探针与所述样品，其中所述寡核苷酸探针包括可特异性杂交的核酸进行定量或核酸的共同序列的序列来进行定量，孵育允许所述寡核苷酸探针杂交到量化核酸（S）的条件下，在允许杂交的探针的延伸条件，其中的每一个下孵育所述样品进行定量（n）的核酸（或多个）被用作模板，去除从样品和杂交的寡核苷酸探针核酸的量的量度的量化非杂交探针进行定量（n）的。本发明还涉及试剂盒，用于执行该方法。

2. 发明申请

WO2009083424A2 MODIFIED ENZYMES AND THEIR USES 审中-公开
标题翻译：修饰酶及其用途
公开(公告)号：WO2009083424A2
公开(公告)日：2009-07-09
申请号：PCT/EP2008/067440
申请日：2008-12-12
申请人： QIAGEN GMBH , PETERS, Lars-Erik , FANG, Nan , CRAMER, Janina
发明人： PETERS, Lars-Erik , FANG, Nan , CRAMER, Janina
IPC分类号： C12N9/96 , C12N9/12 , C12Q1/68
CPC分类号： C12N9/2497 , C12N9/1252
摘要： The invention relates to an active enzyme of bacterial, fungal, viral, or archae origin, wherein the enzyme is coupled, preferably covaiently coupled with at least one polymer having a molecular weight between about 500 to about 20,000 daltons selected from the group consisting of polyethylene glycol and polypropylene glycol. The invention relates in particular to uses thereof of such as in molecular biology as well as kits comprising such enzymes. In preferred embodiments the enzymes of the invention are nucleic acid modifying or replicating enzymes.
摘要翻译：本发明涉及细菌，真菌，病毒或古细菌来源的活性酶，其中所述酶与至少一种分子量为约500至约20,000的聚合物偶联，优选共价偶联选自聚乙二醇和聚丙二醇的道尔顿。本发明特别涉及例如在分子生物学中的用途以及包含这种酶的试剂盒。在优选的实施方案中，本发明的酶是核酸修饰或复制酶。

3. 发明申请

WO2008043765A1 THERMUS EGGERTSSONII DNA POLYMERASES 审中-公开
公开(公告)号：WO2008043765A1
公开(公告)日：2008-04-17
申请号：PCT/EP2007/060724
申请日：2007-10-09
申请人： QIAGEN GMBH , PETERS, Lars-Erik , FANG, Nan
发明人： PETERS, Lars-Erik , FANG, Nan
IPC分类号： C12N9/12 , C12N15/00
CPC分类号： C12N9/1252 , Y10S435/975
摘要： The present invention relates to a thermophilic polym erase, wherein the DNA polymerase has an in- vitro primer extension rate that is > 35 bases/second and faster relative to the primer extension rate of a DNA polymerase comprising amino acid sequences SEQ ID NO: 2 or 4, when measured under identical conditions in a DNA replication assay using primed single strand M13mp18 DNA and an incubation temperature of 60°C. The invention also relates to a vector comprising the polymerase, a host cell comprising the vector. The invention relates to a nucleic acid replication kit comprising the polymerase according to the invention.
摘要翻译：本发明涉及嗜热多聚体擦除，其中DNA聚合酶具有相对于包含氨基酸序列SEQ ID NO：2的DNA聚合酶的引物延伸速率> 35碱基/秒的体外引物延伸速率或4，当在DNA复制测定中在相同条件下测量时，使用引发的单链M13mp18 DNA和孵育温度为60℃。本发明还涉及包含聚合酶的载体，包含载体的宿主细胞。本发明涉及包含根据本发明的聚合酶的核酸复制试剂盒。

4. 发明申请

WO2013024064A1 COMPOSITION AND METHODS FOR RT-PCR COMPRISING AN ANIONIC POLYMER 审中-公开
标题翻译：用于包含阴离子聚合物的RT-PCR的组合物和方法
公开(公告)号：WO2013024064A1
公开(公告)日：2013-02-21
申请号：PCT/EP2012/065793
申请日：2012-08-13
申请人： QIAGEN GMBH , FANG, Nan , MISSEL, Andreas
发明人： FANG, Nan , MISSEL, Andreas
IPC分类号： C12N15/10 , C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/6806 , C12N15/1096 , C12Q1/686 , C12Q2521/107 , C12Q2527/125
摘要： The present invention is in the fields of molecular biology. The present invention is directed to novel compositions, methods and kits useful for the generation of nucleic acids from an RNA template and further nucleic acid replication. Specifically, the invention is directed to the generation and amplification of nucleic acids by reverse transcriptase-polymerase chain reaction.
摘要翻译：本发明涉及分子生物学领域。本发明涉及用于从RNA模板产生核酸和进一步核酸复制的新型组合物，方法和试剂盒。具体地，本发明涉及通过逆转录酶 - 聚合酶链反应产生和扩增核酸。

5. 发明申请

WO2011067299A1 VERFAHREN ZUM NACHWEIS UND ZUR QUANTIFIZIERUNG VON POLY(A)RNA UND mRNA 审中-公开
标题翻译：方法检测和定量的poly（A）RNA和mRNA
公开(公告)号：WO2011067299A1
公开(公告)日：2011-06-09
申请号：PCT/EP2010/068663
申请日：2010-12-01
申请人： QIAGEN GMBH , FANG, Nan
发明人： FANG, Nan
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/6818 , C12Q1/6823 , C12Q2565/1015 , C12Q2525/173 , C12Q2521/325 , C12Q2545/101 , C12Q2521/307
摘要： Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zum Nachweis und/oder zur Quantifizierung von PoIy(A)RNA und/oder mRNA, wobei ein Poly(dT)-Oligonukleotid, welches einen Fluoreszenzfarbstoff sowie einen Quencher aufweist, an die nachzuweisende Nukleinsäure hybridisiert wird. Nicht hybridisiertes Poly(dT)-Oligonukleotid wird durch eine hinzugefügte Nuklease abgebaut, wodurch Fluoreszenz markierte Nukleotide freigesetzt werden und das entstandene Fluoreszenzsignal gemessen wird.
摘要翻译：本发明涉及一种用于检测和/或聚（A）+ RNA和/或使用具有荧光染料和淬灭聚（dT）的寡核苷酸的mRNA的定量的方法，被杂交到核酸。未杂交的聚（dT）的寡核苷酸是由一个额外的核酸酶，从而荧光标记的核苷酸被释放降解和所产生的荧光信号来测量。

6. 发明申请

WO2008107473A1 POLYMERASE STABILIZATION BY IONIC DETERGENTS 审中-公开
标题翻译：聚合酶稳定性由离子洗涤剂
公开(公告)号：WO2008107473A1
公开(公告)日：2008-09-12
申请号：PCT/EP2008/052718
申请日：2008-03-06
申请人： QIAGEN GMBH , FANG, Nan , LÖFFERT, Dirk , ERBACH, Christoph , PETERS, Lars-Erik
发明人： FANG, Nan , LÖFFERT, Dirk , ERBACH, Christoph , PETERS, Lars-Erik
IPC分类号： C12N9/10
CPC分类号： C12N9/96 , C07K14/765 , C12N9/1241 , C12N9/1247 , C12N9/1252 , C12N9/1276 , C12P19/34
摘要： The invention relates to a composition comprising (i) an enzyme with nucleic acid polymerase activity, (ii) an inert protein and, (ii) a zwitterionic detergent. The invention also relates to a composition comprising (i) an enzyme with nucleic acid polymerase activity, (ii) an inert protein and, (ii) a zwitterionic detergent. The invention further relates to a method for enzymatic nucleic acid synthesis comprising the steps of, (a) providing in a reaction mixture, a polymerase activity, a nucleic acid template, a zwitterionic detergent, a buffer, a salt, nucleotides and an inert protein and, (b) incubating the reaction mixture at a temperature which enables nucleic acid synthesis.
摘要翻译：本发明涉及包含（i）具有核酸聚合酶活性的酶，（ii）惰性蛋白质和（ii）两性离子洗涤剂的组合物。本发明还涉及包含（i）具有核酸聚合酶活性的酶，（ii）惰性蛋白质和（ii）两性离子洗涤剂的组合物。本发明还涉及一种用于酶促核酸合成的方法，包括以下步骤：（a）在反应混合物中提供聚合酶活性，核酸模板，两性离子洗涤剂，缓冲液，盐，核苷酸和惰性蛋白质和（b）在使核酸合成的温度下温育反应混合物。

7. 发明申请

WO2016156529A1 EFFICIENCY IMPROVING LIGATION METHODS 审中-公开
标题翻译：高效改进方法
公开(公告)号：WO2016156529A1
公开(公告)日：2016-10-06
申请号：PCT/EP2016/057134
申请日：2016-03-31
申请人： QIAGEN GMBH
发明人： HEITZ, Katja , FANG, Nan
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12N15/1093 , C12N15/64 , C12N15/66 , C12Q1/6855 , C12Q1/6869 , C12Q1/6874 , C12Q2522/10 , C12Q2522/101
摘要： The present invention provides new methods and kits to improve the efficiency of ligation reactions, in particular in molecular biology applications, such as the next generation sequencing (NGS) library construction methods. In next-generation sequencing methods, the ligation step is critical in adding sequencing platform- specific adapters to the DNA fragments that are to be sequenced. Said improvement is achieved by the addition of single- or double-stranded DNA-binding proteins in the ligation step.
摘要翻译：本发明提供了用于提高连接反应效率的新方法和试剂盒，特别是在分子生物学应用中，例如下一代测序（NGS）文库构建方法。在下一代测序方法中，连接步骤对于将待测序的DNA片段添加测序平台特异性衔接子至关重要。所述改进通过在连接步骤中加入单链或双链DNA结合蛋白来实现。

8. 发明申请

WO2015106890A1 GENERATION OF TAGGED DNA FRAGMENTS 审中-公开
标题翻译：标记DNA片段的产生
公开(公告)号：WO2015106890A1
公开(公告)日：2015-07-23
申请号：PCT/EP2014/077306
申请日：2014-12-11
申请人： QIAGEN GMBH
发明人： ANDREOU, Ioanna , FANG, Nan , LOEFFERT, Dirk , PIOTROWSKI, Annika
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/6806 , C12Q2525/155 , C12Q2525/191 , C12Q2535/122
摘要： The present invention is directed to novel methods, kits and uses to be employed for the generation of tagged DNA fragments of a target DNA and nucleic acid molecules associated therewith.
摘要翻译：本发明涉及用于产生靶DNA的标记DNA片段和与其相关联的核酸分子的新方法，试剂盒和用途。

9. 发明申请

WO2015043982A1 QUANTIFICATION OF RNA 审中-公开
标题翻译： RNA的定量
公开(公告)号：WO2015043982A1
公开(公告)日：2015-04-02
申请号：PCT/EP2014/069488
申请日：2014-09-12
申请人： QIAGEN GMBH
发明人： FANG, Nan
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/6851 , C12Q2521/107 , C12Q2537/101 , C12Q2561/113 , C12Q2563/173
摘要： The present invention relates to a method for real-time monitoring and/or quantification of newly-synthesized complementary deoxyribonucleic acid (cDNA) during a reverse transcription reaction of an ribonucleic acid (RNA) template in a sample, the method using a fluorogenic dye binding to RNA:cDNA hybrids. The present invention also relates to the use of this method as well as to kits employing the fluorogenic dye.
摘要翻译：本发明涉及在样品中的核糖核酸（RNA）模板的逆转录反应期间实时监测和/或定量新合成的互补脱氧核糖核酸（cDNA）的方法，该方法使用荧光染料结合到RNA：cDNA杂交体。本发明还涉及使用该方法以及使用荧光染料的试剂盒。

10. 发明申请

WO2017182578A1 METHOD FOR GENERATING A STRANDED RNA LIBRARY 审中-公开
标题翻译：产生经编码的RNA文库的方法
公开(公告)号：WO2017182578A1
公开(公告)日：2017-10-26
申请号：PCT/EP2017/059412
申请日：2017-04-20
申请人： QIAGEN GMBH
发明人： FANG, Nan , KREBS, Wolfgang , HAUPT, Isabell
IPC分类号： C12N15/10
摘要： The invention relates to a method for preparing a strand-specific library from an nucleic acid or preferably RNA sample, for RNA comprising the steps of: (i) optionally fragmenting said RNA sample, (ii) generating a plurality of first cDNA strands by subjecting said fragmented RNA to reverse transcription by using a reverse transcriptase and first oligonucleotide primers, (iii) generating a plurality of second cDNA strands by using a DNA polymerase, second oligonucleotide primers, and the plurality of first cDNA strands, and (iv) ligating adapters to the 3' and 5' termini of the of double- stranded cDNA, (v) wherein the first cDNA strand allows no adapter ligation at its 5' terminus and said second cDNA strand allows adapter ligation at its 5' terminus, or vice versa, and, (v) optionally cloning, sequencing or otherwise using the strand-specific library. The invention also relates to a kit for preparing a strand-specific library from an RNA sample, wherein said kit comprises, (i) random oligonucleotide primers comprising a 5' terminus nucleotide which allows no adaptor ligation, (ii) random oligonucleotide primers comprising a 5' terminus nucleotide which allows adaptor ligation, (iii) optionally a reverse transcriptase for synthesizing a first cDNA strand complementary to the template RNA, (iv) optionally dNTPs, and (v) optionally a DNA polymerase
摘要翻译：本发明涉及用于从核酸或优选RNA样品制备用于RNA的链特异性文库的方法，其包括以下步骤：（i）任选地使所述RNA样品片段化，（ii）产生通过使用逆转录酶和第一寡核苷酸引物对所述片段化的RNA进行逆转录，（iii）通过使用DNA聚合酶，第二寡核苷酸引物和所述多个第一cDNA产生多条第二cDNA链（iv）将衔接子连接到双链cDNA的3'和5'末端，（v）其中第一个cDNA链在其5'末端不允许衔接子连接，并且所述第二个cDNA链允许衔接子连接其5'末端或反之亦然，和（v）任选地克隆，测序或以其他方式使用链特异性文库。本发明还涉及用于从RNA样品制备链特异性文库的试剂盒，其中所述试剂盒包含（i）包含不允许接头连接的5'末端核苷酸的随机寡核苷酸引物，（ii）随机寡核苷酸引物，其包含（iii）任选地用于合成与模板RNA互补的第一cDNA链的逆转录酶，（iv）任选的dNTPs，和（v）任选的DNA聚合酶

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