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    • 8. 发明专利
    • Método de cromatografía
    • ES2855182T3
    • 2021-09-23
    • ES13713084
    • 2013-03-26
    • MERCK PATENT GMBH
    • SKUDAS ROMAS
    • B01D15/18B01D15/38G01N30/46
    • Método de purificación de moléculas diana de una o más impurezas en una muestra clarificada, mediante lo cual la molécula diana es una proteína o una mezcla de dos o más proteínas, comprendiendo el método las etapas de a) proporcionar al menos tres unidades de separación que tienen la misma matriz de cromatografía que están conectadas de modo que puede fluir líquido al menos desde una unidad de separación hasta la siguiente y desde la última hasta la primera unidad de separación b) alimentar la muestra en una primera unidad de separación de modo que, mientras la muestra se carga en esta unidad de separación en la que la muestra está a un primer pH y conductividad que permiten que las moléculas diana se unan a esta unidad de separación, dicha unidad de separación está al menos parte del tiempo de carga en comunicación de fluido con la siguiente unidad de separación, de modo que las moléculas diana no unidas a dicha primera unidad de separación pueden unirse a la siguiente unidad de separación, al mismo tiempo al menos lavar, eluir y reequilibrar una unidad de separación diferente de la unidad de separación que está cargándose y de la que está en comunicación de fluido con la unidad de separación que está cargándose c) cambiar la alimentación a la siguiente unidad de separación d) alimentar la muestra en la siguiente unidad de separación de modo que, mientras la muestra está cargándose en dicha siguiente unidad de separación en la que la muestra está a un primer pH y conductividad que permiten que las moléculas diana se unan a dicha siguiente unidad de separación, dicha siguiente unidad de separación está al menos parte del tiempo de carga en comunicación de fluido con la unidad de separación después de la siguiente, de modo que las moléculas diana no unidas a dicha siguiente unidad de separación pueden unirse a la unidad de separación después de la siguiente, al mismo tiempo al menos lavar, eluir y/o reequilibrar una unidad de separación diferente de la unidad de separación que está cargándose y de la que está en comunicación de fluido con la unidad de separación que está cargándose- e) repetir las etapas c) y d) una o más veces, caracterizado porque la alimentación nunca se detiene y tiene una velocidad por encima de 800 cm/h y porque la matriz de cromatografía de las unidades de separación comprende partículas con un diámetro de tamaño de partícula promedio de entre 30 y 200 μm y con diámetros de poro promedio en el intervalo entre 50 nm y 200 nm y porta ligandos de afinidad o ligandos de intercambio iónico.