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    • 5. 发明申请
    • CASSETTES D'EXPRESSION ET LEURS UTILISATIONS
    • 表达证据及其用途
    • WO2016042242A1
    • 2016-03-24
    • PCT/FR2015/052451
    • 2015-09-14
    • IFP ENERGIES NOUVELLES
    • COLLAS, FlorentLOPES FERREIRA, NicolasCLEMENT, BenjaminBISSON, Angélique
    • C12N15/74
    • C12N15/74
    • La présente demande est relative à une cassette de gènes comprenant au moins un gène procaryote flanquant l'extrémité 5' et un gène procaryote flanquant l'extrémité 3', lesdits gènes étant choisis parmi deux gènes présents de façon adjacente dans un génome de Clostridium , et entre lesquels sont insérés au moins : - un gène de résistance à un antibiotique, dépourvu de son promoteur, - le gène xylR de Clostridium difficile ssp. 630 placé sous le contrôle d'un promoteur, et - le gène ydcE de la souche Bacillus licheniformis DSM 13 , ou un variant de celui-ci, ledit gène ou variant étant placé sous le contrôle du promoteur du gène xylB de Clostridium difficile ssp. 630 , - le gène de résistance à l'antibiotique étant adjacent audit gène procaryote flanquant l'extrémité 5' ou audit gène procaryote flanquant l'extrémité 3'. Une fois intégrée, cette cassette permet après transformation ultérieure avec un vecteur adapté, une souche « fille » intégrant in fine des modifications génétiques (délétion, insertion ou délétion et insertion) mais aucun marqueur de sélection (par ex : de gène de résistance à un antibiotique) ni autre élément génétique ne correspondant pas aux modifications génétiques réalisées.
    • 本申请涉及包含至少一个侧翼于5'末端的原核基因和3'端侧翼的原核基因的基因盒,所述基因选自在梭菌属的基因组中彼此相邻存在的两个基因, 插入以下内容: - 不含相同启动子的抗生素抗性基因 - 艰难梭菌ssp的基因xylR。 630位于启动子控制下,以及 - 地衣芽孢杆菌DSM13菌株的基因ydcE或其变体,所述基因或变体置于艰难梭菌ssp基因xylB启动子的控制之下。 630, - 抗生素抗性基因与所述5'末端侧翼的所述原核基因相邻,或者位于3'末端侧翼的原核基因。 一旦整合,所述盒在随后用合适的载体转化后,允许最终掺入遗传修饰(缺失,插入或缺失和插入)但没有选择标记(例如:抗生素抗性基因)或其他遗传元件的“女儿”菌株 对应于遗传修饰。