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    • 9. 发明专利
    • Producción de proteínas heteromultiméricas
    • ES2617777T3
    • 2017-06-19
    • ES11718831
    • 2011-04-22
    • HOFFMANN LA ROCHE
    • SCHEER JUSTINSPIESS CHRISTOPHYANSURA DANIEL G
    • A61K39/395A61P35/00C07K16/24C07K16/28C07K16/30C07K16/46
    • Un método para preparar una proteína heteromultimérica que comprende un primer polipéptido que contiene bisagra que tiene un primer dominio de heterodimerización y un segundo polipéptido que contiene bisagra que tiene un segundo dominio de heterodimerización, en el que el segundo dominio de heterodimerización interacciona con el primer dominio de heterodimerización, y en el que el primer y el segundo polipéptidos que contienen bisagras se unen por al menos un enlace disulfuro intercatenario, y en el que cada uno del primer y el segundo polipéptidos que contienen bisagra es una cadena pesada de anticuerpo y se empareja con una cadena ligera de anticuerpo para formar un primer par y un segundo par, y en el que las cadenas ligeras del primer par y del segundo par comprenden diferentes secuencias de dominio variable, comprendiendo el método las etapas de: (a) cultivar una primera célula hospedadora, que comprende un primer ácido nucleico que codifica el primer polipéptido que contiene bisagra, en condiciones en las que el polipéptido que contiene bisagra se expresa y se empareja con una cadena ligera de anticuerpo para formar el primer par; (b) cultivar una segunda célula hospedadora, que comprende un primer ácido nucleico que codifica el segundo polipéptido que contiene bisagra, en condiciones en las que el polipéptido que contiene bisagra se expresa y se empareja con una cadena ligera de anticuerpo para formar el segundo par; (c) romper las membranas celulares de la primera y la segunda células hospedadoras, para liberar el primer y el segundo polipéptidos que contienen bisagra de las células hospedadoras para formar una proteína heteromultimérica, en el que la primera y la segunda células hospedadoras se han combinado entre sí en una única suspensión; y (d) recuperar la proteína heteromultimérica, en el que dicho método no requiere la adición de un reductor.