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    • 4. 发明专利
    • Procedimientos y aparato para reacciones de amplificación secuenciales
    • ES2402155T3
    • 2013-04-29
    • ES07782999
    • 2007-05-01
    • CEPHEID
    • SMITH JOSEPH HPERSING DAVID HWORTMAN ALANCHANG RONALDSWENSON DAVID
    • C12Q1/68C12P19/34
    • Un procedimiento de determinación de la presencia o ausencia de una pluralidad de diferentespolinucleótidos diana en una muestra realizando amplificaciones sucesivas de diferentes polinucleótidos dediferentes partes de la muestra, comprendiendo el procedimiento las etapas de: (i) suministro de una cámara de reacción selectivamente en comunicación fluida con un depósito de residuos, undepósito de muestras que contiene una muestra, un primer depósito de reactivos que contiene primeros reactivos deamplificación y un segundo depósito de reactivos que contiene segundos reactivos de amplificación; (ii) combinación de una primera parte de la muestra y los primeros reactivos de amplificación para formar unaprimera mezcla de reacción; (iii) sometimiento de la primera mezcla de reacción a condiciones de reacción de amplificación en la cámara dereacción para producir un primer amplicón de uno o más polinucleótidos diana siempre que dichos polinucleótidosestén presentes en la muestra; (iv) transferencia fluida de la primera mezcla de reacción al depósito de residuos; (v) combinación de una segunda parte de la muestra y los segundos reactivos de amplificación para formar unasegunda mezcla de reacción; y (vi) sometimiento de la segunda mezcla de reacción a condiciones de reacción de amplificación en la cámara dereacción para producir un segundo amplicón de uno o más polinucleótidos diana siempre que dichos polinucleótidosestén presentes en la muestra, en el que la detección de los amplicones primero y segundo determina la presencia oausencia de la pluralidad de diferentes polinucleótidos diana en la muestra.