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    • 10. 发明专利
    • PROCEDIMIENTO DE IDENTIFICACION DE EFECTORES ALOSTERICOS DE UN RECEPTOR.
    • ES2273026T3
    • 2007-05-01
    • ES03748170
    • 2003-06-16
    • CENTRE NAT RECH SCIENTUNIV PASTEUR
    • GALZI JEAN-LUCHIBERT MARCELBOURGUIGNON JEAN-JACQUESMAILLET EMELINE
    • G01N33/557C07C229/14C07K5/068G01N33/15G01N33/50G01N33/542G01N33/566G01N33/58
    • Procedimiento de detección de un efector alostérico de un receptor, mediante determinación de la variación: - de la cinética de disociación y/o de asociación del complejo formado entre dicho receptor y uno de sus ligandos en presencia de dicho efector alostérico, con respecto a la cinética de disociación y/o de asociación del complejo formado entre dicho receptor y dicho ligando, en ausencia de dicho efector, - y/o de la amplitud de la unión formada entre dicho receptor y uno de sus ligandos en presencia de dicho efector alostérico, con respecto a la amplitud de la unión formada entre dicho receptor y dicho ligando, en ausencia de dicho efector, con la condición de que cuando la variación de dicha amplitud es negativa, se detecta igualmente la existencia de la variación de dicha cinética, estando dicho receptor y dicho ligando implicados en por lo menos una respuesta biológica en condiciones fisiológicas apropiadas, y siendo el efector alostérico capaz de modular por lo menos una de las respuestas, siendo dicho receptor marcado mediante una proteína fluorescente seleccionada de entre las proteínas fluorescentes que proceden o derivan de proteínas autofluorescentes de nematocistos, cuyo coeficiente de extinción molecular es superior a aproximadamente 14000M-1.cm-1, y el rendimiento cuántico de fluorescencia es superior a aproximadamente 0, 38, estando el ligando marcado mediante un marcador constituido: - o bien por una molécula susceptible de absorber la luz emitida por la proteína fluorescente, - o bien por una sustancia fluorescente, llevándose a cabo dichas determinaciones de la variación de la cinética de disociación y/o de asociación y de la variación de la amplitud, mediante transferencia de energía de fluorescencia: * entra la proteína fluorescente mencionada anteriormente y dicha sustancia fluorescente, siendo la sustancia fluorescente de tal manera que, o bien es excitable a la longitud de onda de emisión de la proteína fluorescente mencionada anteriormente, o bien emite a la longitud de estimulación de la proteína fluorescente mencionada anteriormente, o * entre la proteína fluorescente mencionada anteriormente y dicha molécula susceptible de absorber la luz emitida por la proteína fluorescente.