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1. 发明授权

KR101062316B1 탄소나노튜브를 이용한 표면 플라즈몬 공명 센서의 신호증폭 방법 有权
公开(公告)号：KR101062316B1
公开(公告)日：2011-09-05
申请号：KR1020080064439
申请日：2008-07-03
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 정봉현 , 이은교 , 박경미 , 정준기 , 정진영 , 이승희 , 백정은
IPC分类号： G01N33/53 , G01N33/48 , C01B31/02 , G01N33/544
摘要： 본 발명은 탄소나노튜브를 이용한 표면 플라즈몬 공명 센서의 신호 증폭 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 탄소나노튜브를 항체와 같은 표적 단백질 감지용 생체분자와 결합시켜 표면 플라즈몬 공명 센서의 신호를 증폭시킴으로써 미량의 표적 단백질을 신속하고 정확하게 분석하는 탄소나노튜브를 이용한 표면 플라즈몬 공명 센서의 신호 증폭 방법에 관한 것이다.
표면 플라즈몬 공명법, 탄소나노튜브, 단백질 칩, SPR 신호 증폭

2. 发明授权

KR100961528B1 대장균에서 활성형 인간 상피세포 성장인자의 대량제조방법 失效
标题翻译：在大肠杆菌中过表达人表皮生长因子作为生物活性形式的方法。大肠杆菌
公开(公告)号：KR100961528B1
公开(公告)日：2010-06-07
申请号：KR1020070104748
申请日：2007-10-17
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 정준기 , 이홍원 , 이은교 , 안정오 , 김천석 , 이혁원 , 김병립 , 백정은
IPC分类号： C12N15/66 , C12N15/64 , C12N15/09
摘要： 본 발명은 대장균에서 활성형 인간 상피세포 성장인자를 대량 생산하기 위하여 인간 상피세포 성장인자와 이의 N-말단 또는 C-말단에 시뉴클레인의 단편, 말토오스 결합 단백질, 디설파이드 결합 A 단백질, 디설파이드 결합 C 단백질 및 펙테이트 라이아제 B의 신호서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 펩타이드 또는 단백질이 융합된 융합 단백질을 코딩하는 핵산분자가 조절서열에 작동가능하게 연결되도록 포함된 재조합 발현벡터, 상기 재조합 발현벡터로 형질전환된 대장균 숙주세포, 상기 대장균 숙주세포를 배양하여 상기 융합 단백질을 발현시키고 분리함으로써 활성형 인간 상피세포 성장인자를 대량 제조하는 방법에 관한 것이다.
인간 상피세포 성장인자, 시뉴클레인, 말토오스 결합 단백질, 디설파이드 결합 A 단백질, 디설파이드 결합 C 단백질 및 펙테이트 라이아제 B의 신호서열

3. 发明公开

KR1020100001632A 대장균에서 활성형 인간 인터루킨-6의 생산 및 정제방법 有权
标题翻译：生产和净化生物活性人白介素-6的方法
公开(公告)号：KR1020100001632A
公开(公告)日：2010-01-06
申请号：KR1020080061624
申请日：2008-06-27
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 이은교 , 이혁원 , 백정은 , 정준기 , 이홍원 , 안정오 , 김천석 , 이승희 , 이주환
IPC分类号： C07K14/54
摘要： PURPOSE: A method and purifying human interleukin-6 which is active in E.coli is provided to overexpress human interleukin-6 fusion protein in a soluble form. CONSTITUTION: A human interleukin-6 fusion protein contains a human interleukin-6; a fusion partner comprising maltose binding protein, disulfide binding A protein and disulfide binding C protein; and a peptide linker. The fusion partner and peptide linker are connected to N-terminal of human interleukin-6. A method for preparing the human interleukin-6 in E.coli comprises: a step of preparing a recombinant vector comprising the human interleukin-6 coding sequence, fusion partner connected to N-terminal and coding sequence of peptide linker; a step of introducing the recombinant vector to E.coli to express human interleukin-6 fusion protein; a step of isolating fusion protein and removing fusion partner using protease; and a step of performing reversed-phase chromatography to purify the human interleukin-6 recombinant protein.
摘要翻译：目的：提供一种在大肠杆菌中有活性的人白细胞介素-6的方法，其以可溶形式过表达人白细胞介素-6融合蛋白。构成：人白介素-6融合蛋白含有人白介素-6; 包含麦芽糖结合蛋白，二硫键结合蛋白质和二硫键结合蛋白质的融合配偶体; 和肽接头。融合配偶体和肽接头连接到人白介素-6的N末端。一种在大肠杆菌中制备人白介素-6的方法，包括：制备包含人白细胞介素-6编码序列，与N末端连接的融合配偶体和肽接头的编码序列的重组载体的步骤; 将重组载体导入大肠杆菌以表达人白细胞介素-6融合蛋白的步骤; 使用蛋白酶分离融合蛋白并去除融合伴侣的步骤; 以及进行反相色谱以纯化人白细胞介素-6重组蛋白的步骤。

4. 发明授权

KR100900033B1 인간 에리스로포이에틴의 정제방법 有权
标题翻译：人红细胞生成素的纯化方法
公开(公告)号：KR100900033B1
公开(公告)日：2009-06-01
申请号：KR1020070119105
申请日：2007-11-21
申请人： 한국생명공학연구원 , 대한민국(농촌진흥청장)
发明人： 정봉현 , 이은교 , 정준기 , 박경미 , 이승희 , 백정은 , 장원경 , 박진기
IPC分类号： C07K14/505
CPC分类号： C07K14/505
摘要： 본 발명은 (1) 세포 배양액 또는 전처리한 형질전환 동물의 유즙을 헤파린 크로마토그래피로 정제하는 단계; (2) 단계 (1)로부터 얻은 인간 에리스로포이에틴을 함유하는 분획물을 역상 크로마토그래피로 정제하는 단계 및 (3) 단계 (2)로부터 얻은 인간 에리스로포이에틴을 함유하는 분획물을 젤 여과 크로마토그래피로 정제하는 단계를 포함한 인간 에리스로포이에틴의 정제방법에 관한 것이다. 본 발명은 형질전환 동물의 유즙으로부터 인간 에리스로포이에틴을 정제할 경우에는 상기 단계 (1) 전에 (a) 형질전환 동물의 유즙을 원심분리하여 상등액을 회수하는 단계; (b) 상기 상등액에 1차 침전제를 첨가하여 불순물을 1차 침전시키는 단계; (c) 전이금속이온을 첨가하여 불순물을 2차 침전시키는 단계 및 (d) 상기 단계로부터 회수한 상등액을 한외 여과하는 단계를 포함한 전처리 방법을 수행하는 것을 특징으로 한다.
인간 에리스로포이에틴, 1차 침전제, 전이금속이온, 헤파린 크로마토그래피, 역상 크로마토그래피, 젤 여과 크로마토그래피

5. 发明公开

KR1020090039239A 대장균에서 활성형 인간 상피세포 성장인자의 대량제조방법 失效
标题翻译：用于过度表达人类生殖生长因子作为生物形式的方法。 COLI
公开(公告)号：KR1020090039239A
公开(公告)日：2009-04-22
申请号：KR1020070104748
申请日：2007-10-17
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 정준기 , 이홍원 , 이은교 , 안정오 , 김천석 , 이혁원 , 김병립 , 백정은
IPC分类号： C12N15/66 , C12N15/64 , C12N15/09
摘要： A mass producing method of active human epidermal growth factor from E.coli is provided to over-express human epidermal growth factor protein in active form by fusing with fusion peptide or protein. A producing method of active human epidermal growth factor(EGF) comprises: a step of culturing E.coli host cell transformed with recombinant vector to express fusion protein which peptide or protein selected from a group of signal sequence which consists of human EGF and synuclein fragment of N-terminal or C-terminal of human EGF, maltose binding protein(MBP), disulfide bond A(DsbA), disulfide bond C(DsbC), pectate lyase B(PelB); and a step of separating the fusion protein from culture media.
摘要翻译：提供大肠杆菌活性人表皮生长因子的大规模生产方法，通过与融合肽或蛋白融合来过度表达活性形式的人表皮生长因子蛋白。活性人表皮生长因子（EGF）的制备方法包括：培养用重组载体转化的大肠杆菌宿主细胞以表达融合蛋白的步骤，所述融合蛋白选自由人EGF和突触核蛋白片段组成的信号序列组人EGF的N-末端或C-末端，麦芽糖结合蛋白（MBP），二硫键A（DsbA），二硫键C（DsbC），果胶酸裂合酶B（PelB）; 以及从培养基中分离融合蛋白的步骤。

6. 发明公开

KR1020080047104A 형질전환 동물의 유즙으로부터 재조합 단백질을 정제하기위한 전처리 방법 失效
标题翻译：用于从转基因动物乳清除重组蛋白的预处理方法
公开(公告)号：KR1020080047104A
公开(公告)日：2008-05-28
申请号：KR1020060117027
申请日：2006-11-24
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 정봉현 , 이은교 , 정준기 , 이승희 , 박경미 , 백정은
IPC分类号： C07K1/14 , C07K1/30
摘要： A method for pre-treating milk of a transgenic animal is provided to improve the purification efficiency of recombinant proteins from the transgenic animal milk by shortening the purification time into about 4 hours and showing the recovery rate of at least 80%, thereby being used for mass-producing the recombinant proteins. A method for pre-treating milk of a transgenic animal before purification of recombinant proteins from the milk of the transgenic animal in case of precipitation of the recombinant protein not being easy comprises the steps of: (a) centrifuging the transgenic animal milk at a temperature of 4-37 deg.C with 4,000-12,000 rpm for 10-40 minutes to recover supernatant therefrom; (b) adding a first precipitating agent to the supernatant to precipitate impurities firstly; (c) adding a transition metal salt to the product obtained from the step(b) to precipitate impurities secondly; and (d) recovering the supernatant obtained from the step(c) and subjecting it to a precise filtration to remove impurities therefrom, wherein the steps(b) and (c) may reverse the order or performed at the same time. A method for pre-treating milk of a transgenic animal before purification of recombinant proteins from the milk of the transgenic animal in case of precipitation of the recombinant protein being easy comprises the steps of: (a) centrifuging the transgenic animal milk at a temperature of 4-37 deg.C with 4,000-12,000 rpm for 10-40 minutes to remove fat therefrom and recovering supernatant therefrom; (b) adding a first precipitating agent to the supernatant to precipitate recombinant proteins firstly; (c) adding a transition metal salt to the product obtained from the step(b) to precipitate the recombinant proteins secondly; and (d) after dissolving the precipitated recombinant protein in a buffer solution, subjecting the solution to a precise filtration to remove impurities therefrom, wherein the steps(b) and (c) may reverse the order or performed at the same time. Further, the transition metal salt is salt comprising a transition metal selected from a group consisting of Mn, Fe, Co, Ni, Cu and Zn.
摘要翻译：提供了一种用于转基因动物的牛奶预处理的方法，以通过将纯化时间缩短至约4小时并显示至少80％的回收率来改善来自转基因动物奶的重组蛋白的纯化效率，从而用于大量生产重组蛋白。在沉淀重组蛋白质不容易的情况下，从转基因动物的乳中纯化重组蛋白质之前对转基因动物的牛奶进行预处理的方法包括以下步骤：（a）在温度下离心转基因动物奶 4-40℃，4,000-12,000rpm，10-40分钟，回收上清液; （b）首先向上清液中加入第一沉淀剂以沉淀杂质; （c）向步骤（b）得到的产物中加入过渡金属盐，以沉淀杂质二次; 和（d）回收由步骤（c）获得的上清液并对其进行精确过滤以除去杂质，其中步骤（b）和（c）可以颠倒或同时进行。在重组蛋白质沉淀容易的情况下从转基因动物的乳中纯化重组蛋白质之前对转基因动物的牛奶进行预处理的方法包括以下步骤：（a）在转基因动物奶的温度 4-7℃，4,000-12,000rpm 10-40分钟，以除去脂肪，并从中回收上清液; （b）首先向上清液中加入第一沉淀剂沉淀重组蛋白质; （c）向由步骤（b）获得的产物中加入过渡金属盐以沉淀重组蛋白质; 和（d）将沉淀的重组蛋白质溶解在缓冲溶液中后，对溶液进行精确过滤以除去杂质，其中步骤（b）和（c）可以颠倒或同时进行。此外，过渡金属盐是包含选自Mn，Fe，Co，Ni，Cu和Zn中的过渡金属的盐。

7. 发明授权

KR100980457B1 대장균에서 활성형 인간 인터루킨-6의 생산 및 정제방법 有权
标题翻译：在大肠杆菌中生产和纯化生物活性人白介素-6的方法
公开(公告)号：KR100980457B1
公开(公告)日：2010-09-07
申请号：KR1020080061624
申请日：2008-06-27
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 이은교 , 이혁원 , 백정은 , 정준기 , 이홍원 , 안정오 , 김천석 , 이승희 , 이주환
IPC分类号： C07K14/54
摘要： 본 발명은 대장균에서 활성형 인간 인터루킨-6의 생산 및 정제방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는, 인간 인터루킨-6와 이의 N-말단에 프로테아제 인식 서열과, 융합파트너로 말토오스 결합단백질, 디설파이드 결합 A 단백질 및 디설파이드 결합 C 단백질을 연결하여 융합단백질을 제작하고, 크로마토그래피법을 통해 융합파트너를 제거하고 활성형 인간 인터루킨-6 만을 분리정제하여 대량생산할 수 있는 대장균에서 활성형 인간 인터루킨-6의 생산 및 정제방법에 관한 것이다.
인간 인터루킨-6, 활성형 단백질, 분리정제, 펩타이드 링커, 융합파트너

8. 发明公开

KR1020100004330A 탄소나노튜브를 이용한 표면 플라즈몬 공명 센서의 신호증폭 방법 有权
标题翻译：使用碳纳米管结合的表面等离子体共振信号增强方法
公开(公告)号：KR1020100004330A
公开(公告)日：2010-01-13
申请号：KR1020080064439
申请日：2008-07-03
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 정봉현 , 이은교 , 박경미 , 정준기 , 정진영 , 이승희 , 백정은
IPC分类号： G01N33/53 , G01N33/48 , C01B31/02 , G01N33/544
CPC分类号： G01N33/5306 , C01B32/158 , G01N33/48 , G01N33/5302 , G01N33/544
摘要： PURPOSE: A method for amplifying signal of surface plasmon resonance sensor using carbon nanotube is provided to quickly and effectively qualify small amount of protein and analyze protein having various concentrations. CONSTITUTION: A method for amplifying signal of surface Plasmon resonance sensor chip comprises: a step of producing complex comprising a biomolecule which is specific to carbon nanotube and target protein; and a step of reacting a sample and complex. The biomolecule is antibody, enzyme, protein, peptide, nucleotide, nucleic acid, carbonhydrate, fatty acid or lipid. The surface of the carbon nanotube is modified with carboxyl group(-COOH), hydroxyl group(-OH), amine group(-NH2), aldehyde group(-CHO), thiol group(-SH) or carbonyl group(-CO).
摘要翻译：目的：提供一种使用碳纳米管放大表面等离子体共振传感器信号的方法，快速有效地鉴定少量蛋白质并分析各种浓度的蛋白质。构成：用于放大表面等离子体共振传感器芯片的信号的方法包括：制备包含对碳纳米管和靶蛋白特异性的生物分子的复合物的步骤; 以及使样品和复合物反应的步骤。生物分子是抗体，酶，蛋白质，肽，核苷酸，核酸，碳水化合物，脂肪酸或脂质。羰基（-COOH），羟基（-OH），胺基（-NH2），醛基（-CHO），硫醇基（-SH）或羰基（-CO）。

9. 发明公开

KR1020090052549A 인간 에리스로포이에틴의 정제방법 有权
标题翻译：人类精神病药物的纯化方法
公开(公告)号：KR1020090052549A
公开(公告)日：2009-05-26
申请号：KR1020070119105
申请日：2007-11-21
申请人： 한국생명공학연구원 , 대한민국(농촌진흥청장)
发明人： 정봉현 , 이은교 , 정준기 , 박경미 , 이승희 , 백정은 , 장원경 , 박진기
IPC分类号： C07K14/505
CPC分类号： C07K14/505
摘要： 본 발명은 (1) 세포 배양액 또는 전처리한 형질전환 동물의 유즙을 헤파린 크로마토그래피로 정제하는 단계; (2) 단계 (1)로부터 얻은 인간 에리스로포이에틴을 함유하는 분획물을 역상 크로마토그래피로 정제하는 단계 및 (3) 단계 (2)로부터 얻은 인간 에리스로포이에틴을 함유하는 분획물을 젤 여과 크로마토그래피로 정제하는 단계를 포함한 인간 에리스로포이에틴의 정제방법에 관한 것이다. 본 발명은 형질전환 동물의 유즙으로부터 인간 에리스로포이에틴을 정제할 경우에는 상기 단계 (1) 전에 (a) 형질전환 동물의 유즙을 원심분리하여 상등액을 회수하는 단계; (b) 상기 상등액에 1차 침전제를 첨가하여 불순물을 1차 침전시키는 단계; (c) 전이금속이온을 첨가하여 불순물을 2차 침전시키는 단계 및 (d) 상기 단계로부터 회수한 상등액을 한외 여과하는 단계를 포함한 전처리 방법을 수행하는 것을 특징으로 한다.
인간 에리스로포이에틴, 1차 침전제, 전이금속이온, 헤파린 크로마토그래피, 역상 크로마토그래피, 젤 여과 크로마토그래피

10. 发明授权

KR100834732B1 형질전환 동물의 유즙으로부터 재조합 단백질을 정제하기위한 전처리 방법 失效
标题翻译：从转基因动物牛奶中纯化重组蛋白的预处理方法
公开(公告)号：KR100834732B1
公开(公告)日：2008-06-09
申请号：KR1020060117027
申请日：2006-11-24
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 정봉현 , 이은교 , 정준기 , 이승희 , 박경미 , 백정은
IPC分类号： C07K1/14 , C07K1/30
摘要： 본 발명은 형질전환 동물의 유즙으로부터 재조합 단백질을 정제하기 전에,
재조합 단백질의 침전이 용이하지 않은 경우에 형질전환 동물로부터 수득한 유즙을 원심분리하여 상등액을 회수한 후 1차 침전제를 첨가하여 불순물을 1차 침전시키고 전이금속염을 첨가하여 불순물을 2차 침전시킨 후 상등액을 정밀 여과하여 불순물을 제거함으로써 형질전환 동물의 유즙을 전처리하는 방법에 관한 것이다.
또한, 재조합 단백질의 침전이 용이한 경우에 형질전환 동물로부터 수득한 유즙을 원심분리하여 상등액을 회수한 후 1차 침전제를 첨가하여 재조합 단백질을 1차 침전시키고 전이금속염을 첨가하여 재조합 단백질을 2차 침전시킨 후 침전물을 완충 용액에 재용해하고 정밀 여과하여 불순물을 제거함으로써 형질전환 동물의 유즙을 전처리하는 방법에 관한 것이다.
형질전환 동물의 유즙, 재조합 단백질, 황산암모늄, 전이금속염, 전처리 방법

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