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    • 4. 发明申请
    • 시험관 전사법으로 준비된 tRNA로부터 제조된 표지자를 이용한 시험관 번역법으로 생산되는 단백질의 선택적 표지방법
    • 使用通过体外转染制备的tRNA制备的标记物通过体外翻译产生的蛋白质的选择性标记
    • WO2009088209A2
    • 2009-07-16
    • PCT/KR2009/000057
    • 2009-01-07
    • 주식회사 인트론바이오테크놀로지윤성준전수연강상현
    • 윤성준전수연강상현
    • G01N33/532G01N33/53G01N33/48
    • G01N33/533G01N33/532
    • 본 발명은 시험관 번역법으로 생산되는 단백질을 방사성동위원소를 사용하지 않고 표지하는 비방사성 단백질 표지 방법에 있어서, 시험관 번역법에서 생산되는 단백질을 형광물질이나 바이오틴으로 선택적으로 표지하는데 이용될 수 있는 표지자의 제조 방법, 이에 의해 제조된 표지자를 이용한 단백질 표지 방법에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은, 시험관 번역법의 반응액 안에 이미 존재하는 단백질은 표지하지 않으면서 실험자가 반응액에 첨가해 준 유전자로부터 생산되는 목적단백질만을 선택적으로 표지하는데 이용될 수 있는 단백질 표지자를 “전체 tRNA 혼합체” 대신 시험관 전사법을 통하여 제조된 한 종류의 tRNA만을 사용하여 제조하는 방법을 제공하고, 또한 상기 공정에 의해 제조된 단백질 표지자를 이용하여 시험관 번역법을 통하여 생산되는 단백질을 표지하는 방법을 제공한다. 본 발명을 따르면, “전체 tRNA 혼합체”를 tRNA 재료로 사용하여 단백질 표지자를 제조하고 이를 단백질 표지에 이용하던 종래방법에 비해 단백질 표지자의 제조도 훨씬 용이해지고 또한 이를 이용하여 표지된 단백질이 훨씬 개선된 시그널을 갖는다.
    • 本发明涉及一种非放射性蛋白标记法,以覆盖在不使用体外翻译产生的蛋白质的放射性同位素的,所述蛋白质在体外翻译产生用荧光材料或生物素任选 以及使用由该方法产生的标记物的蛋白质标记方法。 具体而言,本发明是一种蛋白质标记物目的,可以仅选择从现有的蛋白质产生的标记的蛋白质赋予它没有遮挡实验者添加到体外翻译反应混合物中的反应混合物基因所用的“。 通过使用由体外转移方法制造仅由一种类型的tRNA提供代替制造方法的一个全tRNA的混合物”,以及如何使用覆盖通过该方法产生的蛋白质标志物通过体外翻译方法产生的蛋白质 Lt。 按照本发明,所产生的蛋白质的标记,使用“总的tRNA混合物”为tRNA的材料和与传统方法相比,该生产蛋白标记物用于蛋白质标记是也可以通过使用该蛋白显著改善更容易也成为一个盖 信号。