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2. 发明申请

US20050019334A1 Process for correction of a disulfide misfold in Fc molecules 有权
标题翻译：在Fc分子中校正二硫键错误的方法
公开(公告)号：US20050019334A1
公开(公告)日：2005-01-27
申请号：US10925183
申请日：2004-08-24
申请人： Michael Treuheit , Sheila O'Conner , Andrew Kosky
发明人： Michael Treuheit , Sheila O'Conner , Andrew Kosky
IPC分类号： C12N15/09 , A61K38/00 , A61K39/395 , A61P3/04 , A61P3/10 , A61P19/10 , A61P43/00 , C07K1/113 , C07K14/52 , C07K14/705 , C07K16/00 , C07K19/00 , C12P21/02
CPC分类号： C07K1/1133 , C07K14/70578 , C07K2319/00 , C07K2319/30 , Y10S530/825 , Y10S530/866 , Y10S530/867
摘要： The present invention concerns a process by which a misfold in an Fc fusion molecule can be prevented or corrected. In one embodiment, the process comprises (a) preparing a pharmacologically active compound comprising an Fc domain; (b) treating the fusion molecule with a copper (II) halide; and (c) isolating the treated fusion molecule. The pharmacologically active compound can be an antibody or a fusion molecule comprising a pharmacologically active domain and an Fc domain. The preferred copper (II) halide is CuCl2. The preferred concentration thereof is at least about 10 mM for fusion molecules prepared in E. coli; at least about 30 mM for fusion molecules prepared in CHO cells. The process can be employed with any number of pharmacologically active domains. Preferred pharmacologically active domains include OPG proteins, leptin proteins, soluble portions of TNF receptors (e.g., wherein the fusion molecule is etanercept), IL-1ra proteins, and TPO-mimetic peptides. The Fc domain preferably has a human sequence, with an Fc sequence derived from IgG1 most preferred. An exemplary Fc sequence is shown in FIG. 5 hereinafter.
摘要翻译：本发明涉及可以防止或校正Fc融合分子中的错误折叠的方法。在一个实施方案中，该方法包括（a）制备包含Fc结构域的药理活性化合物; （b）用卤化铜（II）处理融合分子; 和（c）分离经处理的融合分子。药理活性化合物可以是包含药理活性结构域和Fc结构域的抗体或融合分子。优选的卤化铜（II）是CuCl 2。对于在大肠杆菌中制备的融合分子，其优选的浓度为至少约10mM; 对CHO细胞中制备的融合分子至少约30mM。该方法可以与任何数量的药理活性结构域一起使用。优选的药理活性结构域包括OPG蛋白，瘦素蛋白，TNF受体的可溶性部分（例如，其中融合分子是依那西普），IL-1ra蛋白和TPO-模拟肽。 Fc结构域优选具有人序列，最优选来源于IgG1的Fc序列。示例性Fc序列示于图1。 5。

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