肿瘤是一种常见病、多发病，其中恶性肿瘤是目前危害人类健康最严重的 一类疾病。目前业内对恶性肿瘤的治疗主要还是以手术、放疗、化疗为主，但许 多化学抗癌药物在作用于靶细胞时往往累及正常细胞，造成严重的副反应。植物 药的遗传毒性不明显，中草药在抗癌抗突变方面有独特的优势和广阔的应用前 景，而且中药在对肿瘤的辅助治疗中也起到不容忽视的作用。紫杉醇即是典型的 从植物中获得的具有良好抗癌活性的天然化合物，现已开发为抗肿瘤药物。目前 我国危害性最为严重的肿瘤为肺癌、鼻咽癌、食管癌、胃癌、大肠癌、肝癌、乳 腺癌、宫颈癌、白血病及淋巴瘤等。特别是肝癌的发生率近年来有所增加。值得 重视，这些肿瘤的病因学、发病学及其防治，均为我国肿瘤研究的重点。寻找高 效低毒的抗癌药物以及抗癌辅助药物是当前肿瘤研究的重要内容。
我国药用生物资源十分丰富，其生理活性物质是研究和发现新药先导化学 物，开发新药的天然宝库。目前，我国从天然产物中提取活性物质，用于开发成 治疗肿瘤疾病、安全性好、毒性低的新药还很少，从天然产物中提取活性物质， 开发成具有抗肿瘤疗效的新药，具有重要应用价值和广阔发展前景。
白茅根为多年生草本植物。其含有的化学成分有，多量蔗糖、葡萄糖，少量 果糖、木糖及柠檬酸、草酸、苹果酸等，又含21％的淀粉。其性味：甘，寒。入 肺、胃经。其功能主治为：凉血止血，清热利尿。用于血热吐血，衄血，尿血， 热病烦渴，黄疸，水肿，热淋涩痛；急性肾炎水肿。
发明内容：
本发明的目的在于提供白茅根的有效组分。
本发明的另一目的在于提供上述白茅根有效组分的制备方法。
本发明还提供含有上述白茅根有效组分的制剂及该组分的用途。
本发明的白茅根有效组分，其制备过程包括以下步骤：
步骤1：用乙酸乙酯和乙醇混合物作为溶剂对白茅根进行提取，
步骤2：药渣用乙醇提取，得到提取液，
步骤3：提取液经过色谱柱层析得洗脱液。
步骤4：用制备液相色谱梯度洗脱得到的洗脱液，流动相为水和乙腈，收集4.0-8.0 分钟、8.0-12.0分钟、20.0-24.0分钟、24.0-28.0分钟、28.0-32.0分钟、32.0-36.0 分钟、36.0-40.0分钟、40.0-44.0分钟、44.0-48.0分钟、48.0-52.0分钟、52.0-56.0 分钟、56.0-60.0分钟或60.0-64.0分钟洗脱液，得到有效组分1(或称为B01)、 有效组分2(或称为B02)、有效组分3(或称为B05)、有效组分4(或称为B06)、 有效组分5(或称为B07)、有效组分6(或称为B08)、有效组分7(或称为B09)、 有效组分8(或称为B10)、有效组分9(或称为B11)、有效组分10(或称为B12)、 有效组分11(或称为B13)、有效组分12(或称为B14)、有效组分13(或称为 B15)。
其中步骤1中所述乙酸乙酯和乙醇的混合物，两者的比例为乙酸乙酯∶乙醇 ＝1-5∶1-5，优选为乙酸乙酯∶乙醇＝1-2∶1-2，最优选为乙酸乙酯∶乙醇＝1∶1。
所述步骤中，步骤1具体为：取白茅根药材，以乙酸乙酯∶乙醇＝1-5∶1-5 为溶剂，回流提取，将提取液与药渣分离，
步骤2具体为：药渣用50-90％的乙醇提取，得到提取液，
步骤3具体为：以上提取液用5％乙醇溶解上样，过ODS-C18柱，首先， 采用5％乙醇作为流动相，然后改换50％乙醇作为流动相，得洗脱液，
步骤4具体为：用制备液相色谱继续分离得到的洗脱液，流动相为水-A和 乙腈-B，进行梯度洗脱，所述梯度洗脱程序如下：
表1：梯度洗脱表


流速为10ml/min，柱温为室温；样品用100％乙醇溶解，经制备液相色谱分离， 在时间段收集4.0-8.0分钟、8.0-12.0分钟、20.0-24.0分钟、24.0-28.0分钟、28.0-32.0 分钟、32.0-36.0分钟、36.0-40.0分钟、40.0-44.0分钟、44.0-48.0分钟、48.0-52.0 分钟、52.0-56.0分钟、56.0-60.0分钟或60.0-64.0分钟溶液，溶液经浓缩干燥后 得到有效组分。
本发明优选的白茅根有效组分制备方法，包括下列步骤：白茅根粉碎，加入 6-10倍量乙酸乙酯∶乙醇＝1∶1，加热回流1-2小时，提取1-3次，药渣加入6-10倍 量50-90％乙醇，加热回流，滤液合并得提取液，将提取液浓缩后，用5％乙醇溶 解上样，过ODS-C18柱，首先，采用5％乙醇作为流动相，然后改换50％乙醇 作为流动相，得洗脱液，用制备液相色谱继续分离洗脱液，分离条件为：色谱柱 为Agilent制备柱(Zorbax SB-C18；21.2mm×250mm)，流动相为水A和乙腈B， 梯度洗脱程序如下：

流速为10ml/min，柱温为室温；样品用100％乙醇溶解，经制备液相色谱分 离，在时间段4.0-8.0分钟、8.0-12.0分钟、20.0-24.0分钟、24.0-28.0分钟、28.0-32.0 分钟、32.0-36.0分钟、36.0-40.0分钟、40.0-44.0分钟、44.0-48.0分钟、48.0-52.0 分钟、52.0-56.0分钟、56.0-60.0分钟或60.0-64.0分钟收集溶液，溶液经浓缩干 燥后得到有效组分。
本发明最优选的白茅根有效组分制备方法，包括下列步骤：
白茅根粉碎，加入8倍量乙酸乙酯∶乙醇＝1∶1，加热回流1小时，提取2次，药渣 加入8倍量70％乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提取液，将提取液 浓缩后，用5％乙醇溶解上样，过ODS-C18柱，首先，采用1250ml5％乙醇作为 流动相，然后改换1250ml50％乙醇作为流动相，得洗脱液，用制备液相色谱继 续分离洗脱液，分离条件：色谱柱为Agilent制备柱(Zorbax SB-C18； 21.2mm×250mm)，流动相为水A和乙腈B，梯度洗脱程序如下

流速为10ml/min，柱温为室温；样品用100％乙醇溶解，经制备液相色谱分离， 在时间段4.0-8.0分钟、8.0-12.0分钟、20.0-24.0分钟、24.0-28.0分钟、28.0-32.0 分钟、32.0-36.0分钟、36.0-40.0分钟、40.0-44.0分钟、44.0-48.0分钟、48.0-52.0 分钟、52.0-56.0分钟、56.0-60.0分钟或60.0-64.0分钟收集溶液，溶液经浓缩干 燥后得到有效组分。
本发明20.0-24.0分钟、44.0-48.0分钟、56.0-60.0分钟、56.0-60.0分钟、 60.0-64.0分钟收集的有效组分成分如下表
表2  成分表
白茅根B05质谱解析结果

白茅根B11质谱解析结果

白茅根B14质谱解析结果

白茅根B15质谱解析结果

有关结构鉴定参考《联合化学词典CD-ROM》(The Combined Chemical Dictionary on CD-ROM)及所属相关文献。
本发明还提供用本发明的中药有效组分作为药物活性成分制备成的药物组 合物，本发明的药物组合物，包括有效组分，根据需要该组合物还可以加入药物 可接受的载体。
本发明的组合物，是单位剂量的药物制剂形式，所述单位剂量形式是指制剂 的单位，如片剂的每片，胶囊的每粒胶囊，口服液的每瓶，颗粒剂每袋等。
本发明的组合物其中的有效组分，其在制剂中所占重量百分比可以是 0.1-99.9％，其余为药物可接受的载体。
本发明的组合物，通过将上述有效组分和药物可接受的载体混合制备得到。
本发明的组合物，其药物制剂形式可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括： 片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口 服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液 剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。本发明的制 剂，优选的是口服剂型，如：胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹 剂、膏剂等。
本发明的组合物，其口服给药的制剂可含有常用的赋形剂，诸如粘合剂、填 充剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂和湿润剂，必要时可 对片剂进行包衣。
适用的填充剂包括纤维素、甘露糖醇、乳糖和其它类似的填充剂。适宜的崩 解剂包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羟基乙酸淀粉钠。适宜的润 滑剂包括，例如硬脂酸镁。适宜的药物可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠。
可通过混合，填充，压片等常用的方法制备固体口服组合物。进行反复混合 可使活性物质分布在整个使用大量填充剂的那些组合物中。
口服液体制剂的形式例如可以是水性或油性悬浮液、溶液、乳剂、糖浆剂或 酏剂，或者可以是一种在使用前可用水或其它适宜的载体复配的干燥产品。这种 液体制剂可含有常规的添加剂，诸如悬浮剂，例如山梨醇、糖浆、甲基纤维素、 明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化食用脂肪，乳化剂， 例如卵磷脂、脱水山梨醇一油酸酯或阿拉伯胶；非水性载体(它们可以包括食用 油)，例如杏仁油、分馏椰子油、诸如甘油的酯的油性酯、丙二醇或乙醇；防腐 剂，例如对羟基苯甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸，并且如果需要，可含有常 规的香味剂或着色剂。
对于注射剂，制备的液体单位剂型含有本发明的活性物质和无菌载体。根据 载体和浓度，可以将此化合物悬浮或者溶解。溶液的制备通常是通过将活性物质 溶解在一种载体中，在将其装入一种适宜的小瓶或安瓿前过滤消毒，然后密封。 辅料例如一种局部麻醉剂、防腐剂和缓冲剂也可以溶解在这种载体中。为了提高 其稳定性，可在装入小瓶以后将这种组合物冰冻，并在真空下将水除去。
本发明的组合物，在制备成药剂时可选择性的加入适合的药物可接受的载 体，所述药物可接受的载体选自：甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、 硫代硫酸钠、盐酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素C、EDTA二钠、EDTA 钙钠，一价碱金属的碳酸盐、醋酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、 磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右 旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、 藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、 表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、β-环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、 硬脂酸钙、硬脂酸镁等。
本发明的组合物在使用时根据病人的情况确定用法用量，可每日服三次，每 次1-20剂，如：1-20袋或粒或片。
本发明还提供本发明的中药有效组分和药物组合物在抗肿瘤方面的应用。
以下为药理实验的数据：
活性筛选
细胞株：HL-60肿瘤细胞
细胞培养与种板细胞培养：使用RPMI 1640(Gibco)[添加2g/L碳酸氢 钠]90％，胎牛血清(四季青)10％混合培养HL 60细胞，密度需低于106个/mL。 计算需要细胞总量NT＝ρcell·mL-1×VT(ρ＝2×104个/mL)，其中VT＝0.1mL× 孔数+细胞槽剩余量。吹打培养瓶壁上的悬浮细胞，加入离心管中。取10μL， 加10μL胎盘蓝稀释，计算计数板上活细胞数总数NL，则离心管中的细胞数N 为：NL/4×104×2×V个，其中V为离心前离心管中的溶液体积。离心 (900rad/min，10min)，吸去上清液，加入培养液V1mL，吹打，使细胞混匀， 吸取V2mL加入到细胞槽中，使V2＝NT/N×V1。在细胞槽中再加入VT-V2mL 的培养液，用排枪吹打、混匀，取该液，每孔加入150μL。种板后选取4孔加 入200μL培养液作为空白对照，剩余孔加入200μL PBS，以减少培养液的蒸发。
给药方案白茅根有效组分加入相应体积的DMSO溶解，浓度为约50mg/mL。 震荡溶解，若有大量液滴粘壁，可适当离心。可储存-20℃。在新的96孔板中加 入220μL/孔的培养液，将吸取0.88μL药液加入混匀，稀释250倍，将上述稀 释好的药物向种有细胞的孔每孔加入50μL，此时药物稀释1000倍，即终浓度 为50ng/mL。孵育48h。每个浓度设4个平行复孔，每板设阴性对照组(细胞中 加入空白溶液，空白溶液配法——加入200μL的培养液，将吸取0.88μLDMSO 加入混匀)，及阳性对照组(顺铂终浓度4μg/mL)。SRB染色：细胞培养结束后， 取出培养板，每孔加入40％(质量/体积)的三氯乙酸(TCA)100μL固定细胞， 室温放置5min，4℃冰箱中放置1h。培养板各孔用去离子水洗涤5遍，以去除 TCA。在空气中干燥后，每孔加0.4％的SRB100μL(1％色谱纯乙酸溶解)，室温下 放置20min，弃去各孔内液体后用1％乙酸洗涤5遍，去除未结合的染料，空气中 干燥后用10mmol/L Tris150μL/孔溶解，振荡5min，使用酶标仪(ELx 800) 测定，所用波长为490nm。
抑制率的计算抑制率按如下公式计算：

药效结果见表3。
表3
 白茅根B01组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.09   0.36   0.06   0.08   抑制率(％)   89.67   0.00   100.0   92.08   RSD(％)   4.66   5.29   5.71   2.65
 白茅根B02组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.10   0.36   0.06   0.08   抑制率(％)   86.17   0.00   100.00   92.08   RSD(％)   6.27   5.29   5.71   2.65
 白茅根B05组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.07   0.36   0.06   0.08   抑制率(％)   95.50   0.00   100.00   92.08   RSD(％)   0.96   5.29   5.71   2.65
 白茅根B06组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.08   0.36   0.06   0.08   抑制率(％)   92.67   0.00   100.00   92.08   RSD(％)   2.00   5.29   5.71   2.65
 白茅根B07组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.09   0.36   0.06   0.08   抑制率(％)   91.33   0.00   100.00   92.08   RSD(％)   1.64   5.29   5.71   2.65
 白茅根B08组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.09   0.36   0.06   0.08   抑制率(％)   88.83   0.00   100.00   92.08   RSD(％)   2.27   5.29   5.71   2.65
 白茅根B09组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.10   0.36   0.06   0.08   抑制率(％)   86.50   0.00   100.00   92.08   RSD(％)   3.52   5.29   5.71   2.65
 白茅根B10组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.09   0.36   0.06   0.08   抑制率(％)   89.17   0.00   100.00   92.08   RSD(％)   3.82   5.29   5.71   2.65
 白茅根B11组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.10   0.36   0.06   0.08   抑制率(％)   88.17   0.00   100.00   92.08   RSD(％)   0.74   5.29   5.71   2.65
 白茅根B12组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.08   0.36   0.06   0.08   抑制率(％)   93.33   0.00   100.00   92.08   RSD(％)   1.77   5.29   5.71   2.65
 白茅根B13组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.07   0.36   0.06   0.08   抑制率(％)   96.83   0.00   100.00   92.08   RSD(％)   1.02   5.29   5.71   2.65
 白茅根B14组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.09   0.36   0.06   0.08   抑制率(％)   90.83   0.00   100.00   92.08   RSD(％)   7.27   5.29   5.71   2.65
  白茅根B15组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.11   0.36   0.06   0.08   抑制率(％)   85.00   0.00   100.00   92.08   RSD(％)   4.04   5.29   5.71   2.65
细胞株：Hep G2肿瘤细胞
细胞培养与种板细胞培养：使用DMEM高糖型(Gibco)[添加3.7g/L碳酸 氢钠]90％，胎牛血清(四季青)10％，非必需氨基酸(Gibco)1％混合培养Hep G2 细胞。计算需要细胞总量NT＝ρcell·mL-1×VT(ρ＝2×103个/mL)，其中VT＝0.1 mL×孔数+细胞槽剩余量。吹打培养瓶壁上的悬浮细胞，加入离心管中。取10μL， 加10μL胎盘蓝稀释，计算计数板上活细胞数总数NL，则离心管中的细胞数N 为：NL/4×104×2×V个，其中V为离心前离心管中的溶液体积。离心 (900rad/min，10min)，吸去上清液，加入培养液V1mL，吹打，使细胞混匀， 吸取V2mL加入到细胞槽中，使V2＝NT/N×V1。在细胞槽中再加入VT-V2mL 的培养液，用排枪吹打、混匀，取该液，每孔加入100μL，孵育24h。种板后选 取4孔加入培养液作为空白对照，剩余孔加入100μL PBS，以减少培养液的蒸 发。
给药方案白茅根有效组分根据所称量的药品的重量，根据所称量的药品的 重量，加入相应体积的DMSO溶解，浓度为约50mg/mL。震荡溶解，若有大量液 滴粘壁，可适当离心。可储存-20℃。96孔板换液，每孔加入新鲜培养液150μL。 在新的96孔板中加入220μL/孔的培养液，将吸取0.88μL药液加入混匀，稀 释250倍，将上述稀释好的药物向种有细胞的孔每孔加入50μL，此时药物稀释 1000倍，即终浓度为50μg/mL。孵育48h。每个浓度设4(2)个平行复孔，每 板设阴性对照组(细胞中加入空白溶液，空白溶液配法——加入200μL的培养 液，将吸取0.88μLDMSO加入混匀)，阳性对照组(阿霉素终浓度4μg/mL)。MTT 比色法测定：取出培养板，去处每孔上清，加入培养液-MTT混合溶液(培养液∶ MTT溶液＝10∶1)100μL，孵育4h。吸弃培养液，每孔加入150μL的DMSO， 振荡10min，550nm酶标仪(Elx800)测定。
抑制率的计算抑制率按如下公式计算：

药效结果见表4。
表4
 白茅根B01组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.25   0.59   0.16   0.17   抑制率(％)   79.19   0.00   100.00   96.86   RSD(％)   1.417   4.861   5.093   5.272
 白茅根B02组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.26   0.59   0.16   0.17   抑制率(％)   76.28   0.00   100.00   96.86   RSD(％)   7.557   4.861   5.093   5.272
 白茅根B05组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.28   0.59   0.16   0.17   抑制率(％)   72.21   0.00   100.00   96.86   RSD(％)   7.337   4.861   5.093   5.272
 白茅根B06组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.25   0.59   0.16   0.17   抑制率(％)   80.12   0.00   100.00   96.86   RSD(％)   0.864   4.861   5.093   5.272
  白茅根B07组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.24   0.59   0.16   0.17   抑制率(％)   82.09   0.00   100.00   96.86   RSD(％)   2.984   4.861   5.093   5.272
 白茅根B08组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.27   0.59   0.16   0.17   抑制率(％)   75.12   0.00   100.00   96.86   RSD(％)   1.059   4.861   5.093   5.272
 白茅根B09组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.25   0.59   0.16   0.17   抑制率(％)   78.95   0.00   100.00   96.86   RSD(％)   5.36   4.861   5.093   5.272
 白茅根B10组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.22   0.59   0.16   0.17   抑制率(％)   87.09   0.00   100.00   96.86   RSD(％)   4.27   4.861   5.093   5.272
  白茅根B11组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.19   0.59   0.16   0.17   抑制率(％)   93.95   0.00   100.00   96.86   RSD(％)   6.84   4.861   5.093   5.272
  白茅根B12组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.22   0.59   0.16   0.17   抑制率(％)   86.63   0.00   100.00   96.86   RSD(％)   6.18   4.861   5.093   5.272
 白茅根B13组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.15   0.59   0.16   0.17   抑制率(％)   102.33   0.00   100.00   96.86   RSD(％)   6.60   4.861   5.093   5.272
 白茅根B14组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.18   0.59   0.16   0.17   抑制率(％)   95.35   0.00   100.00   96.86   RSD(％)   7.07   4.861   5.093   5.272
  白茅根B15组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.16   0.59   0.16   0.17   抑制率(％)   100.12   0.00   100.00   96.86   RSD(％)   3.99   4.861   5.093   5.272
细胞株：K562肿瘤细胞
细胞培养与种板细胞培养：使用RPMI 1640(Gibco)[添加2g/L碳酸氢 钠]90％，小牛血清(赛乐)10％，非必需氨基酸(Gibco)1％混合培养K 562 细胞。计算需要细胞总量NT＝ρcell·mL-1×VT(ρ＝8×103个/mL)，其中 VT＝0.1mL×孔数+细胞槽剩余量。吹打培养瓶壁上的悬浮细胞，加入离心管 中。取10μL，加10μL胎盘蓝稀释，计算计数板上活细胞数总数NL，则离 心管中的细胞数N为：NL/4×104×2×V个，其中V为离心前离心管中的溶 液体积。离心(900rad/min，10min)，吸去上清液，加入培养液V1mL，吹 打，使细胞混匀，吸取V2mL加入到细胞槽中，使V2＝NT/N×V1。在细胞槽 中再加入VT-V2mL的培养液，用排枪吹打、混匀，取该液，每孔加入100μL， 孵育24h。种板后选取4孔加入培养液作为空白对照，剩余孔加入100μL PBS， 以减少培养液的蒸发。
给药方案白茅根有效组分加入相应体积的DMSO溶解，浓度为约50mg/mL。 震荡溶解，若有大量液滴粘壁，可适当离心。可储存-20℃。96孔板换液， 每孔加入新鲜培养液150μL。在新的96孔板中加入220μL/孔的培养液， 将吸取0.88μL药液加入混匀，稀释250倍，将上述稀释好的药物向种有细 胞的孔每孔加入50μL，此时药物稀释1000倍，即终浓度为50μg/mL。孵 育48h。每个浓度设4(2)个平行复孔，每板设阴性对照组(细胞中加入空 白溶液，空白溶液配法——加入200μL的培养液，将吸取0.88μLDMSO加 入混匀)，阳性对照组(阿霉素终浓度4μg/mL)。SRB染色：细胞培养结束 后，取出培养板，每孔加入40％(质量/体积)的三氯乙酸(TCA)70μL固 定细胞，4℃冰箱中放置1h。培养板各孔用去离子水洗涤5遍，以去除TCA。 在空气中干燥后，每孔加0.4％的SRB100μL(1％色谱纯乙酸溶解)，室温下 放置20min，弃去各孔内液体后用1％乙酸洗涤5遍，去除未结合的染料，空 气中干燥后用10mmol/L Tris150μL/孔溶解，振荡5min，使用酶标仪(ELx 800)测定，所用波长为490nm。
抑制率的计算抑制率按如下公式计算：

药效结果见表5。
表5
 白茅根B01组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.12   0.69   0.04   0.12   抑制率(％)   87.15   0.00   100.00   87.19   RSD(％)   0.57   6.622   1.33   4.363
 白茅根B02组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.13   0.69   0.04   0.12   抑制率(％)   86.92   0.00   100.00   87.19   RSD(％)   1.13   6.622   1.33   4.363
 白茅根B05组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.12   0.69   0.04   0.12   抑制率(％)   87.54   0.00   100.00   87.19   RSD(％)   2.34   6.622   1.33   4.363


  白茅根B07组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.12   0.69   0.04   0.12   抑制率(％)   87.46   0.00   100.00   87.19   RSD(％)   4.07   6.622   1.33   4.363   白茅根B08组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.13   0.69   0.04   0.12   抑制率(％)   86.85   0.00   100.00   87.19   RSD(％)   2.82   6.622   1.33   4.363
 白茅根B09组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.12   0.69   0.04   0.12   抑制率(％)   87.62   0.00   100.00   87.19   RSD(％)   7.63   6.622   1.33   4.363
 白茅根B10组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.12   0.69   0.04   0.12   抑制率(％)   87.92   0.00   100.00   87.19   RSD(％)   5.37   6.622   1.33   4.363


 白茅根B12组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.11   0.69   0.04   0.12   抑制率(％)   89.00   0.00   100.00   87.19   RSD(％)   1.90   6.622   1.33   4.363
  白茅根B13组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.11   0.69   0.04   0.12   抑制率(％)   88.62   0.00   100.00   87.19   RSD(％)   2.48   6.622   1.33   4.363
 白茅根B14组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.13   0.69   0.04   0.12   抑制率(％)   86.62   0.00   100.0   87.19   RSD(％)   5.57   6.622   1.33   4.363
 白茅根B15组分   阴性   空白   阳性   平均细胞存活数   0.11   0.73   0.06   0.12   抑制率(％)   92.46   0.00   100.00   91.68   RSD(％)   5.76   2.26   4.53   4.426
本发明的有益效果为：
1.本发明的提取分离工艺中使用了反相硅胶柱，能有效地除去叶绿素等易 在制备色谱柱上形成死吸附的杂质，提高有效成分的含量，能快速准确的得到有 效成分。
2.本发明提供的白茅根有效组分化学成分简单明确，在药理研究上更易于 阐明其作用机制，在生产中更易于药物的质量控制。
本发明提供的方法首次从白茅根药材中得到含有B01、B02、B05、B06、 B07、B08、B09、B10、B11、B12、B13、B14、B15有效组分，并首次 将其在多种肿瘤细胞株上进行药效筛选，由于成分确切，含量明确，制备工艺便 捷，活性好，适宜开发成抗肿瘤中药新药。
附图说明
图1为本发明白茅根有效组分B01的HPLC分析图。
图2为本发明白茅根有效组分B02的HPLC分析图。
图3为本发明白茅根有效组分B05的HPLC分析图。
图4为本发明白茅根有效组分B06的HPLC分析图。
图5为本发明白茅根有效组分B07的HPLC分析图。
图6为本发明白茅根有效组分B08的HPLC分析图。
图7为本发明白茅根有效组分B09的HPLC分析图。
图8为本发明白茅根有效组分B10的HPLC分析图。
图9为本发明白茅根有效组分B11的HPLC分析图。
图10为本发明白茅根有效组分B12的HPLC分析图。
图11为本发明白茅根有效组分B13的HPLC分析图。
图12为本发明白茅根有效组分B14的HPLC分析图。
图13为本发明白茅根有效组分B15的HPLC分析图。

下面将结合本发明的实施例进一步详细说明本发明的实质内容，该实施例仅 用于说明本发明而对本发明并没有限制。
实施例1白茅根有效组分的制备
白茅根粉碎，粉碎后过20目筛，加入8倍量乙酸乙酯∶乙醇＝1∶1，加热回流1小 时，提取2次，药渣加入8倍量70％乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得 提取液，将提取液浓缩后，用5％乙醇溶解上样，过ODS-C18柱，首先，采用 1250ml 5％乙醇作为流动相，然后改换1250ml 50％乙醇作为流动相，得洗脱液， 用制备液相色谱继续分离洗脱液，分离条件：色谱柱为Agilent制备柱(Zorbax SB-C18；21.2mm×250mm)，流动相为水A和乙腈B，梯度洗脱程序如下

流速为10ml/min，柱温为室温；样品用100％乙醇溶解，经制备液相色谱分离， 在时间段4.0-8.0分钟、8.0-12.0分钟、20.0-24.0分钟、24.0-28.0分钟、28.0-32.0 分钟、32.0-36.0分钟、36.0-40.0分钟、40.0-44.0分钟、44.0-48.0分钟、48.0-52.0 分钟、52.0-56.0分钟、56.0-60.0分钟或60.0-64.0分钟收集溶液，溶液经浓缩干 燥后得到有效组分。
实施例2白茅根有效组分的分析
色谱条件色谱柱Agilent Zorbax SB-C18柱(4.6mm×150mm，5μm)；采用 梯度洗脱，流动相A相为0.2％冰醋酸水溶液，流动相B相为含0.2％冰醋酸的乙 腈溶液；梯度洗脱程序如下：0分钟时，流动相A为90％的0.2％冰醋酸水溶液、 流动相B为10％的0.2％冰醋酸的乙腈溶液；10分钟时，流动相A为50％的0.2％ 冰醋酸水溶液、流动相B为50％的0.2％冰醋酸的乙腈溶液；30分钟时，流动相A 为5％的0.2％冰醋酸水溶液、流动相B为95％的0.2％冰醋酸的乙腈溶液；35分钟 时，流动相A为5％的0.2％冰醋酸水溶液、流动相B为95％的0.2％冰醋酸的乙腈。 溶液流速0.5mL·min-1；检测波长全波长；柱温30℃；ELSD条件：漂移管温度105 ℃；氮气流速2.0L/min
供试品溶液的制备称取本发明有效组分，用甲醇溶液溶解在容量瓶中，稀 释至刻度，摇匀，即得。
测定方法精密吸取供试品溶液，注入液相色谱仪，测定。
实施例3白茅根有效组分制剂
取实施例1的白茅根有效组分1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13， 0.5g与10.5g聚乙二醇-6000混合均匀，加热熔融，化料后移至滴丸滴灌中，药 液滴至6-8℃液体石蜡中，除油，制得滴丸400粒。
实施例4白茅根有效组分制剂
取实施例1的白茅根有效组分1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12 或13，0.5g、葡萄糖4.5g、硫代硫酸钠0.9g和蒸馏水1ml，上述组分混合均匀 后，冷冻干燥，分装500支，即得。
实施例5白茅根有效组分制剂
取降香油1.5g，加入到13ml饱和的羟丙基β-环糊精中，搅拌溶解，滤过， 滤叶低温干燥，的降香油和羟丙基β-环糊精的包合物粉末。除上述降香油合羟 丙基β-环糊精的包合物粉末外，再取实施例1的白茅根有效组分，0.5g、甘露 醇5.5g、依地酸钙钠0.9g和蒸馏水2ml，上述组分混匀后，冷冻干燥，分装300 支，即得。