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    • 3. 发明申请
    • SCREENINGVERFAHREN ZUR FINDUNG VON DIE ENDOCYTOSE FÖRDERNDEN HILFSSTOFFEN
    • 检查方法用于确定促销的内吞作用的佐剂
    • WO2002016935A1
    • 2002-02-28
    • PCT/EP2001/007509
    • 2001-06-30
    • RINA-NETZWERK RNA TECHNOLOGIEN GMBHLANG, ChristineGESSNER, ReinhardNEUKAMM, BirgitPRINZ, BiankaNEVOIGT, Elke
    • LANG, ChristineGESSNER, ReinhardNEUKAMM, BirgitPRINZ, BiankaNEVOIGT, Elke
    • G01N33/50
    • G01N33/502C12Q1/025G01N33/5008
    • Die Erfindung lehrt ein Screeningsverfahren zur Findung von die Endocytose von nieder- und/oder makromolekularen Verbindungen, insbesondere Nukleinsäuren, in Zellen fördernden Hilfsstoffen mit den folgenden Verfahrensschritten: a) es wird ein Hefestamm ausgewählt und hieraus werden Hefezellen kultiviert, b) die Hefezellen werden mit einem potentiellen, die Endocytose von nieder- und/oder makromolekularen Verbindungen, insbesondere Nukleinsäuren, in Zellen fördernden Hilfsstoff sowie mit einer replizierbaren und/oder im Kern und/oder im Cytosol der Hefezellen replizierbaren Nukleinsäure oder nieder- und/oder makromolekularer Verbindung inkubiert, c) es wird die Transformationsrate oder die Transportrate in das Cytosol oder den Kern bestimmt und auf Erhöhung der Transformationsrate oder der Transportrate, verglichen mit der Transformationsrate oder Transportrate in einem Referenzversuch ohne Einsatz des Hilfsstoffes, untersucht, d) der Hilfsstoff wird selektriert oder verworfen nach Massgabe des erhaltenen Wertes der Erhöhung der Transformationsrate oder Transportrate in Stufe c), ein Screeningverfahren entsprechender Art unter Verwendung von Vertebratenzellen sowie die Verwendung mit solchen Verfahren erhaltener Hilfsstoffe zur Herstellung pharmazeutischer Zusammensetzungen.
    • 本发明教导了一种筛选方法,用于发现低和/或大分子化合物的细胞内吞作用,特别是核酸,细胞,包括以下方法步骤:a)的酵母菌株被选择和酵母细胞中培养由此,b)将酵母细胞用 一个潜在的孵育低和/或大分子化合物的细胞内吞作用,特别是核酸,细胞,赋形剂和具有可复制的和/或在核心和/或酵母细胞中复制的核酸或低和/或大分子化合物c的胞质溶胶 )确定转化率或运输速率进入细胞质或细胞核,和转化率或运输速率的增加,相对于转化率或在参考测试输送速率,而不使用辅助物质,检查,d)中的赋形剂是NA selektriert或丢弃 CH小于本所得到的转化率的增加或在步骤c运输速率),使用脊椎动物细胞以及与这样的用于生产药物组合物的方法获得的佐剂使用的筛选方法对应的方式的值。